Artisan Grocott s Methenamine Silver Eosin Stain Kit. Nr kat. AR376. Przeznaczenie Do stosowania w diagnostyce in vitro.

Transkrypt

1 Artisan Grocott s Methenamine Silver Eosin Stain Kit Nr kat. AR376 Przeznaczenie Do stosowania w diagnostyce in vitro. Zestaw Grocott s Methenamine Silver (GMS) Eosin Stain Kit jest przeznaczony do zastosowań laboratoryjnych i słuŝy do wykrywania grzybów oraz organizmów Pneumocystis jirovecii (dawniej nazywanych carinii) w preparatach tkankowych przy uŝyciu mikroskopii świetlnej. 1-3 Do badań nadają się tkanki poddane rutynowej obróbce wstępnej (zatapiane w parafinie). Preferowanym środkiem utrwalającym jest obojętna buforowana formalina. Interpretacja kliniczna dodatniego lub ujemnego odczynu musi być uzupełniona przez ocenę morfologiczną, wykonanie odpowiednich prób kontrolnych i interpretowana przez doświadczonego patologa w kontekście historii choroby pacjenta i innych badań diagnostycznych. Wszystkie odczynniki wchodzące w skład zestawu GMS Eosin Stain Kit zostały optymalnie przygotowane do uŝycia w systemie Artisan Link Staining System firmy Dako i nie wymagają mieszania ani rozcieńczania. Streszczenie i informacje ogólne Zestaw GMS Eosin Stain Kit jest przeznaczony do wykrywania grzybów w skrawkach tkankowych. Lepiej nadaje się do diagnostyki zakaŝeń grzybiczych niŝ metody oparte na barwieniu hematoksyliną, eozyną i kwasem nadjodowym (Shiffa), zwłaszcza gdy liczba drobnoustrojów jest niewielka. Najbardziej powszechnym zastosowaniem tej techniki jest identyfikacja Pneumocystis jirovecii, oportunistycznych grzybów, które mogą rozwijać się w płucach pacjentów chorych na AIDS. 1 Zasady procedury Grzyby są widoczne pod mikroskopem świetlnym w preparatach barwionych hematoksyliną i eozyną. Zastosowanie tego specjalnego barwnika pozwala jednak na uzyskanie większej czułości detekcji grzybów. Zestaw GMS Eosin Stain Kit działa w oparciu o zmodyfikowaną metodę Grocotta (Grocott s Methenamine Silver). 2 Eozyna zastąpiła w nim barwnik Light Green i słuŝy do barwienia kontrastowego. Zestaw GMS Eosin Stain Kit jest zoptymalizowany do stosowania w Artisan Link Staining System z lub bez Artisan Clearing Solution. Po wszystkich etapach barwienia następują etapy płukania. Po wybarwieniu, wysuszone powietrzem preparaty są wyjmowane z aparatu, zmywane ksylenem lub substytutem ksylenu i zatapiane przy uŝyciu odpowiedniego środka do zatapiania. Wynik reakcji ocenia się w standardowej mikroskopii świetlnej. Tkanka do próby kontrolnej: Tkanka z Aspergillus, Candida lub Pneumocystis. Dostarczane odczynniki Zestaw GMS Eosin Stain Kit składa się z ośmiu gotowych do uŝycia pakietów z dozownikami. KaŜdy pakiet zawiera: Chromian sodu 10% Chromian sodu w wodzie dejonizowanej Kwas nadchlorowy 10% Kwas nadchlorowy w wodzie dejonizowanej Dwusiarczyn sodu 1% Dwusiarczyn sodu w wodzie dejonizowanej Azotan srebra 0,21% Azotan srebra w wodzie dejonizowanej Urotropina z boranem 3% 2,7% urotropiny i 0,38% boranu sodu w wodzie dejonizowanej Chlorek złota 0,2% Chlorek złota w wodzie dejonizowanej ( ) P04310PL_01/AR376/ str. 1/5

2 Tiosiarczan sodu 2% Tiosiarczan sodu w wodzie dejonizowanej z dodatkiem 0,05% ProClin 300 Dako Eosin Eozyna w wodzie dejonizowanej Przed uŝyciem pakietów odczynników GMS naleŝy poczekać, aŝ ogrzeją się do temperatury pokojowej. Firma Dako dostarcza te odczynniki w składzie optymalnym do stosowania zgodnie z instrukcjami wykonywania odczynu na przygotowanych skrawkach tkankowych. Wszelkie odstępstwa od zalecanych procedur badania mogą spowodować, Ŝe deklaracje dotyczące oczekiwanych wyników staną się niewaŝne. Materiały wymagane, ale niedostarczane 1. Szkiełka mikroskopowe 2. Artisan Link Staining System 3. Wash Solution (nr kat. AR102) 4. Artisan Clearing Solution (nr kat. AR309) - opcjonalnie Środki ostroŝności 1. Do stosowania przez wyszkolony personel. 2. NaleŜy unikać zanieczyszczeń mikrobiologicznych odczynnika. W przeciwnym wypadku moŝe nastąpić nasilenie nieswoistego odczynu. 3. Po wykonaniu przewidzianej liczby testów opakowania mogą zawierać resztki odczynników. 4. Stosowanie innych od opisanych parametrów czasu inkubacji, temperatury lub metod, moŝe powodować błędne wyniki badania. UŜytkownik musi zweryfikować wszelkie odstępstwa w procedurze przewidzianej przez producenta. 5. Pakiety z odczynnikami, które nie są uŝywane w aparacie, naleŝy przechowywać w pozycji pionowej. 6. Pakiety z odczynnikami naleŝy przechowywać w miejscu nienaraŝonym na bezpośrednie działanie promieni słonecznych i z dala od źródeł ciepła. 7. Jako zasadę naleŝy przyjąć zakaz pracy z produktem osobom w wieku poniŝej 18 lat. UŜytkowników naleŝy starannie poinstruować co do właściwych procedur pracy, niebezpiecznych własności produktu i środków ostroŝności. 8. W celu uniknięcia kontaktu z oczami i skórą, naleŝy nosić odpowiednie osobiste wyposaŝenie ochronne. 9. Niewykorzystany odczynnik naleŝy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i krajowymi. 10. Karta Charakterystyki Substancji Niebezpiecznej jest dostępna na Ŝądanie. Sodium Chromate 10%: 10-30% Chromic acid (H2CrO4), disodium salt, tetrahydrate H311 + H331 Działa toksycznie w kontakcie ze skórą lub w następstwie wdychania. H302 Działa szkodliwie po połknięciu. H334 MoŜe powodować objawy alergii lub astmy lub trudności w oddychaniu w następstwie wdychania. H340 MoŜe powodować wady genetyczne. H350 MoŜe powodować raka. H360 MoŜe działać szkodliwie na płodność lub na dziecko w łonie matki. H372 Powoduje uszkodzenie narządów poprzez długotrwałe lub powtarzane naraŝenie. P201 Przed uŝyciem zapoznać się ze specjalnymi środkami ostroŝności. P202 Nie uŝywać przed zapoznaniem się i zrozumieniem wszystkich środków bezpieczeństwa. P281 Stosować wymagane środki ochrony indywidualnej. P285 W przypadku niedostatecznej wentylacji stosować indywidualne środki ochrony dróg oddechowych. P271 Stosować wyłącznie na zewnątrz lub w dobrze wentylowanym pomieszczeniu. P260 Nie wdychać par. P270 Nie jeść, nie pić i nie palić podczas uŝywania produktu. P314 W przypadku złego samopoczucia zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. P308 + P313 W PRZYPADKU naraŝenia lub styczności: Zwrócić się o pomoc lekarską. P304 + P340 + W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO DRÓG ODDECHOWYCH: Wyprowadzić lub wynieść poszkodowanego na świeŝe powietrze i zapewnić warunki do odpoczynku w pozycji umoŝliwiającej swobodne oddychanie. Natychmiast P342 + P311 W przypadku wystąpienia objawów ze strony układu oddechowego: Skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ/lekarzem/ P W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: Natychmiast P330 + P331 Wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. P303 + P361 + W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ (lub z włosami): Natychmiast zdjąć całą zanieczyszczoną odzieŝ. Spłukać P353 + P363 + skórę pod strumieniem wody/prysznicem. Wyprać zanieczyszczoną odzieŝ przed ponownym uŝyciem. Natychmiast ( ) P04310PL_01/AR376/ str. 2/5

3 P302 + P352 + P312 P333 + P313 P338 + W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: Umyć duŝą ilością wody z mydłem. W przypadku złego samopoczucia W przypadku wystąpienia podraŝnienia skóry lub wysypki: Zgłosić się do lekarza po poradę. Perchloric Acid 10%: 5-10% kwas nadchlorowy H272 MoŜe intensyfikować poŝar; utleniacz. H370 Powoduje uszkodzenie narządów. P210 Przechowywać z dala od źródeł ciepła, gorących powierzchni, źródeł iskrzenia, otwartego ognia i innych źródeł zapłonu. Nie palić. P220 Trzymać/przechowywać z dala od odzieŝy, materiałów niezgodnych i materiałów zapalnych. P221 Zastosować wszelkie środki ostroŝności w celu uniknięcia mieszania z materiałami zapalnymi i innymi materiałami niezgodnymi. P260 Nie wdychać par. P270 Nie jeść, nie pić i nie palić podczas uŝywania produktu. P307 + P311 W PRZYPADKU naraŝenia: Skontaktować się z P304 + P340 + W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO DRÓG ODDECHOWYCH: Wyprowadzić lub wynieść poszkodowanego na świeŝe powietrze i zapewnić warunki do odpoczynku w pozycji umoŝliwiającej swobodne oddychanie. Natychmiast P W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: Natychmiast P330 + P331 P303 + P361 + P353 + P363 + P338 + Wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ (lub z włosami): Natychmiast zdjąć całą zanieczyszczoną odzieŝ. Spłukać skórę pod strumieniem wody/prysznicem. Wyprać zanieczyszczoną odzieŝ przed ponownym uŝyciem. Natychmiast Methenamine Borate 3%: 30-60% Borax (B4Na2O7.10H2O), 30-60% Methenamine H360 MoŜe działać szkodliwie na płodność lub na dziecko w łonie matki. P201 Przed uŝyciem zapoznać się ze specjalnymi środkami ostroŝności. P202 Nie uŝywać przed zapoznaniem się i zrozumieniem wszystkich środków bezpieczeństwa. P281 Stosować wymagane środki ochrony indywidualnej. Stosować rękawice ochronne. P308 + P313 W PRZYPADKU naraŝenia lub styczności: Zwrócić się o pomoc lekarską. P302 + P352 + P363 W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: Umyć duŝą ilością wody z mydłem. Wyprać zanieczyszczoną odzieŝ przed ponownym uŝyciem. P333 + P313 W przypadku wystąpienia podraŝnienia skóry lub wysypki: Zgłosić się do lekarza po poradę. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- P304 + P340 + W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO DRÓG ODDECHOWYCH: Wyprowadzić lub wynieść poszkodowanego na świeŝe powietrze i zapewnić warunki do odpoczynku w pozycji umoŝliwiającej swobodne oddychanie. Natychmiast ( ) P04310PL_01/AR376/ str. 3/5

4 P P330 + P331 P303 + P361 + P353 + P363 + P302 + P352 P333 + P313 P338 + W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: Natychmiast Wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ (lub z włosami): Natychmiast zdjąć całą zanieczyszczoną odzieŝ. Spłukać skórę pod strumieniem wody/prysznicem. Wyprać zanieczyszczoną odzieŝ przed ponownym uŝyciem. Natychmiast W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: Umyć duŝą ilością wody z mydłem. W przypadku wystąpienia podraŝnienia skóry lub wysypki: Zgłosić się do lekarza po poradę. Uwaga Sodium Thiosulfate 2%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone Stosować rękawice ochronne. P302 + P352 + P363 W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: Umyć duŝą ilością wody z mydłem. Wyprać zanieczyszczoną odzieŝ przed ponownym uŝyciem. P333 + P313 W przypadku wystąpienia podraŝnienia skóry lub wysypki: Zgłosić się do lekarza po poradę. Przechowywanie Azotan srebra 0,21%, urotropinę z boranem 3%, chromian sodu 10%, kwas nadchlorowy10% i tiosiarczan sodu 2% przechowywać w temperaturze 2-8 C. Chlorek złota 0,2%, dwusiarczy n sodu 1% i Dako Eosin przechowywać w temperaturze pokojowej. Nie naleŝy uŝywać po upływie terminu waŝności. Jeśli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niŝ podane powyŝej, uŝytkownik musi zweryfikować takie warunki. Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego produktu. Dlatego, w celu weryfikacji naleŝy wykonywać odczyny kontrolne na odpowiednich tkankach. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie moŝna wyjaśnić róŝnicami w procedurach laboratoryjnych lub nieprawidłowymi warunkami przechowywania, naleŝy skontaktować się z działem wsparcia technicznego firmy Dako. Procedura uŝycia w aparacie / wykonania odczynu Uwagi wstępne Szczegółowe instrukcje zawiera Artisan Link Basic User Guide (Podręcznik uŝytkownika systemu Artisan). Wstępne napełnianie dozowników w pakietach odczynników Przed rozpoczęciem barwienia naleŝy wypełnić pakiety z odczynnikami i sprawdzić ich szczelność. Wstępne napełnianie i sprawdzenie szczelności kaŝdego pakietu naleŝy przeprowadzić przed pierwszym uŝyciem nowego zestawu i przed pierwszą serią odczynów w danym dniu. 1. Nad ręcznikiem papierowym, o ile jest dostępny, zdjąć czerwony lub czarny korek transportowy z zespołu dozownika w pakiecie odczynników. NaleŜy w tym celu delikatnie pociągnąć korek w dół. 2. Aby wypełnić nowy pakiet odczynników, naleŝy chwycić pakiet w taki sposób, by zespół dozownika był skierowany w dół, i 2-3 razy lekko postukać w bok pakietu odczynników, aby uwolnić pęcherzyki powietrza, które mogły zgromadzić się w zespole dozownika. 3. Energicznie, 3-4 razy całkowicie wcisnąć i zwolnić tłoczek, cały wylany płyn zbierając ręcznikiem papierowym, tamponem pochłaniającym lub podobnym materiałem. 4. NaleŜy unikać rozlewania duŝych ilości odczynników podczas wstępnego napełniania. Mogłoby to spowodować utratę odczynnika, a w konsekwencji wyczerpanie się płynu w pakiecie odczynników przed wykonaniem załoŝonej liczby testów. 5. Przed kaŝdym uŝyciem dozowniki pakietów odczynników moŝna wstępnie napełnić 1 2 razy, uzyskując stały strumień. 6. Trzymając pakiet odczynników jedną ręką, wsunąć prowadnicę montaŝową z tyłu pakietu do szczelin w statywie karuzelowym, pewnie osadzając pakiet. Procedura Szczegółowy opis zalecanej procedury znajduje się w sekcji Protocol w oprogramowaniu Dako Link Software. Po zakończeniu barwienia preparaty będą suche. Zanurz preparaty w ksylenie lub w jego odpowiedniku i trwale zatop. Interpretacja wybarwienia Grzyby:...czarne Pneumocystis:...czarne Tło:...róŜowe Rozwiązywanie problemów NaleŜy zapoznać się z rozdziałem dotyczącym konserwacji i rozwiązywania problemów w podręczniku Artisan User Guide (Podręcznik uŝytkownika systemu Artisan) lub skontaktować się z naszym działem wsparcia technicznego. Piśmiennictwo 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition, McGraw-Hill Book Company, New York, New York, 1968 ( ) P04310PL_01/AR376/ str. 4/5

5 3. Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods in Histotechnology, 1st edition, American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 Wydanie 08/15 ( ) P04310PL_01/AR376/ str. 5/5