Krajowy program monitorowania zakażeń wirusami grypy ptaków u drobiu i ptaków dzikich w 2006 r. A. Ogólne kryteria 1. Program monitorowania został opracowany w oparciu o 12 Rozporządzenia Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 17 grudnia 2004 r. w sprawie określania jednostek chorobowych, sposobu prowadzenia kontroli oraz zakresu badań kontrolnych zakażeń zwierząt (Dz. U. Nr 282, poz. 2813) oraz decyzję Komisji z dnia 6 lutego 2006 r. (SANCO/10786/2005/Rev2) w sprawie prowadzenia badań kontrolnych na obecność grypy ptaków u drobiu i ptaków dzikich w Państwach Członkowskich. Stanowi on kontynuację poprzednich badań kontrolnych ustanowionych w decyzjach 2004/111/WE, 2004/630/WE i 2005/464/WE. 2. Celem badań monitoringowych jest: a) określenie częstotliwości występowania zakażeń wirusami influenzy (grypy) ptaków (AI) podtypu H5 i H7 u różnych gatunków drobiu; b) kontynuacja nadzoru dotyczące występowania wirusów grypy ptaków u dzikich ptaków (system wczesnego ostrzegania), które mogłyby przedostawać się z ptaków dzikich do stad drobiu; c) wzbogacenie wiedzy na temat zagrożenia grypą ptaków dla zdrowia zwierząt ze strony dzikich ptaków. 3. Pobieranie próbek obejmuje okres od lutego do grudnia 2006 r. 4. Badaniami objęte są wszystkie gatunki i kierunki produkcji drobiu (z wyjątkiem kurcząt rzeźnych) utrzymywane fermowo oraz ptaki dzikie. 5. Badanie próbek przeprowadza krajowe laboratorium referencyjne ds. diagnostyki AI w Zakładzie Chorób Drobiu Państwowego Instytutu Weterynaryjnego-Państwowego Instytutu Badawczego (PIWet-PIB) w Puławach. Próbki od drobiu będą badane serologicznie testem hamowania hemaglutynacji z antygenami H5N2 i H7N7 (pierwsze badanie) oraz H5N7 i H7N1 (badania potwierdzające). Próbki od ptaków dzikich będą badane wirusologiczne na zarodkach kurzych SPF i metodą RT- PCR/H5. 6. Próbki do badań pobiera i przesyła Inspekcja Weterynaryjna, natomiast badania wykonywane są przez Państwowy Instytut Weterynaryjny - Państwowy Instytut Badawczy w Puławach w ramach Programu Wieloletniego. Koszty badań ponosi Instytut. 7. Terytorialnie właściwe Wojewódzkie Inspektoraty Weterynarii opracują i prześlą do Zakładu Chorób Drobiu PIWet-PIB harmonogram pobierania próbek. 8. Wszystkie izolaty wirusa AI oraz dodatnie surowice od ptaków wodnych będą wysłane do laboratorium referencyjnego Unii Europejskiej. 9. Dodatnie H5 i H7 próbki uzyskane podczas badań kontrolnych drobiu i ptaków dzikich będą zgłaszane Komisji co 2 miesiące. 10. Termin składania ostatecznych wyników badań upływa dnia 31 marca 2007 r. 1
B. Zasady pobierania próbek od drobiu 1. Pobieranie próbek do badań serologicznych odbędzie się w wyznaczonych czterech województwach. Województwa lubuskie (08), łódzkie (10) i pomorskie (22) zostały wybrane z uwagi na dużą koncentrację chowu drobiu wodnego i indyków oraz wysokie ryzyko zakażenia wirusem AI od migrujących ptaków wolnożyjących, zaś województwo podkarpackie (18) ze względu na dużą koncentrację drobiu wodnego oraz na bliskie sąsiedztwo z Ukrainą, gdzie w 2005 r. stwierdzono ogniska wysoce zjadliwej grypy ptaków wywołanej przez wirus H5N1 (HPAI/H5N1) u drobiu. W lubuskim, łódzkim i podkarpackim zostaną przebadane wszystkie kategorie drobiu, natomiast w pomorskim tylko drób wodny. 2. Próbki od drobiu fermowego będą pobierane w okresie od lutego do grudnia 2006 r. 3. Przy wyborze ferm do badań należy uwzględnić chów drobiu z wybiegami, korzystanie z wód powierzchniowych, chów różnych gatunków drobiu i stad w różnym wieku. 4. W odniesieniu do indyków, gęsi, kaczek i strusi badaniami należy objąć przede wszystkim fermy reprodukcyjne, a następnie fermy drobiu rzeźnego uzupełniając do wyznaczonej liczby ferm danego gatunku. 5. W przypadku kur próbki krwi pobierane są tylko z ferm kur reprodukcyjnych oraz kur niosek jaj konsumpcyjnych (nioski towarowe). Kurczęta rzeźne nie są objęte badaniami. 6. Pobieranie próbek od drobiu reprodukcyjnego oraz kur niosek towarowych powinno odbywać się w okresie nieśności, najlepiej ze stad w końcu użytkowania. 7. Pobieranie próbek od drobiu rzeźnego (indyki, gęsi, kaczki, strusie) powinno odbywać się na fermie w końcowym okresie tuczu (w ostatnim tygodniu przed ubojem) lub w rzeźni. 8. Do badań serologicznych należy pobierać próbki krwi z każdej fermy wyznaczonej do badań w liczbie: a) po 10 próbek krwi od kur, indyków, ptaków łownych; b) po 40 próbek krwi od gęsi, kaczek; c) po 5 próbek krwi od strusi. 9. Próbki krwi należy pobierać w ilość ok. 2 ml do probówek o co najmniej 2-krotnie większej pojemności (nie należy używać probówek typu eppendorf) i po szczelnym zamknięciu przesłać (lub wydzieloną surowicę) w warunkach schłodzenia (temperatura ok. 4 C) w ciągu 48 godzin do Zakładu Chorób Drobiu PIWet-PIB. Jeśli czas od pobrania próbek do ich przesłania jest dłuższy, wydzieloną surowicę (bez krwinek) należy zamrozić w temperaturze ok. 20 C i przesłać w stanie zamrożenia w ciągu do 2 tygodni od pobrania. 10. Pismo przewodnie towarzyszące próbkom powinno zawierać informacje dotyczące gatunku drobiu (kura, indyk, gęś, kaczka, struś, ew. inny), typu użytkowego (reprodukcyjny, nieśny towarowy, rzeźny), wieku, miejsca pochodzenia i daty pobrania próbki, szczepień przeciwko rzekomemu pomorowi drobiu. 11. Łączna liczba próbek krwi do badań serologicznych wynosi 11 685 z 503 ferm drobiu. 2
12. W fermach drobiu, gdzie stwierdzono dodatnie wyniki serologiczne przeprowadzone będą badania retrospektywne (ocena stanu epizootycznego, w tym analiza zdrowotności, produkcyjności i śmiertelności stada serododatniego i innych stad znajdujących się na terenie fermy). Jeśli stado seropozytywne znajduje się jeszcze na fermie zostaną pobrane ponownie próbki do badania serologicznego oraz dodatkowo do badania wirusologicznego. 13. Ilościowy wykaz ferm (gospodarstw) poszczególnych gatunków i kierunków użytkowania w wyznaczonych województwach przedstawiają tabele 1-5: Tabela 1. Fermy kur niosek reprodukcyjnych. w objętych badaniem Lubuskie (08) 8 8 80 Łódzkie (10) 25 25 250 Podkarpackie (18) 10 10 100 Suma 43 43 430 Tabela 2. Fermy kur niosek towarowych. w Lubuskie (08) 44 35 350 Łódzkie (10) 53 42 420 Podkarpackie (18) 33 33 330 Suma 130 110 1100 Tabela 3. Fermy indyków. w Lubuskie (08) 112 80 800 Łódzkie (10) 17 17 170 Podkarpackie (18) 8 8 80 Suma 137 105 1050 Tabela 4. Fermy gęsi i kaczek. w (40 próbek z fermy) Lubuskie (08) 86 59 2360 Łódzkie (10) 196 80 3200 Podkarpackie (18) 65 59 2360 Pomorskie (22) 22 22 880 Suma 369 198 8800 3
Tabela 5. Fermy strusi. w (5 próbek z fermy) Lubuskie (08) 13 13 65 Łódzkie (10) 17 17 85 Podkarpackie (18) 3 3 15 Suma 33 33 165 Tabela 6. Fermy ptaków łownych. w Lubuskie (08) 12 12 120 Łódzkie (10) 2 2 20 Podkarpackie (18) 0 0 0 Suma 14 14 140 C. Zasady pobierania próbek od ptaków dzikich I. Wymogi ogólne: 1. Pobieranie próbek do badań jest organizowane i nadzorowane przez Inspekcję Weterynaryjną we współpracy z instytucjami zajmującymi się ochroną/obserwacją ptaków i stacjami obrączkowania oraz myśliwymi. 2. Badania obejmują monitoring czynny (próbki pobierane od żywych lub upolowanych ptaków nie wykazujących objawów klinicznych chorób) i monitoring bierny (próbki pobrane od ptaków padłych). 3. Próbki pobrane od ptaków dzikich badane są wirusologicznie na zarodkach kurzych SPF (wszystkie wirusy grypy typu A) i metodą RT-PCR (wirusy podtypu H5). 4. Z uwagi na zalecenia Decyzji Komisji, aby badanie próbek metodą RT-PCR było wykonane w ciągu 2 tygodni od pobrania, wskazane jest jak najszybsze dostarczanie próbek do laboratorium Zakładu Chorób Drobiu PIWet-PIB. W przypadku wyników dodatnich przeprowadzona będzie możliwie jak najszybciej analiza molekularna w celu określenia patotypu (HPAI lub LPAI). II. Monitoring czynny 1. W okresie luty-maj (wiosenna migracja ptaków z południa na północ) będą pobierane próbki od co najmniej 400 ptaków dzikich z terenu 8 województw: kujawskopomorskie (04), lubuskie (08), łódzkie (10), podkarpackie (18), podlaskie (20), pomorskie (22), warmińsko-mazurskie (28) i zachodniopomorskie (32). Ilościowy wykaz próbek do pobrania w wyznaczonych województwach przedstawia tabela 1. 2. W okresie wrzesień-grudzień (jesienna migracja ptaków dzikich z północy na południe) będą pobierane próbki od co najmniej 800 ptaków dzikich z terenu 11 województw: dolnośląskie (02), kujawsko-pomorskie (04), lubelskie (06), lubuskie (08), łódzkie (10), mazowieckie (14), podkarpackie (18), podlaskie (20), pomorskie (22), warmińsko-mazurskie (28), wielkopolskie (30) i zachodniopomorskie (32). 4
Ilościowy wykaz próbek do pobrania w wyznaczonych województwach przedstawia tabela 2. 3. Pobieranie próbek od ptaków dzikich powinno koncentrować się głównie na gatunkach ptaków stanowiących największe ryzyko zakażenia (tabela 3), na trasach ich przelotów, miejscach postojów/ostoi, mieszania się migrujących różnych gatunków, przebywających w pobliżu ferm/gospodarstw drobiu (możliwy kontakt z drobiem). 4. Do badań wirusologicznych należy pobierać indywidualnie przy pomocy wymazówki świeży kał lub wymazy kałowe z kloaki (na waciku wyraźnie widoczny kał) od różnych gatunków ptaków dzikich, w tym głównie od wędrujących ptaków wodnych z rzędu blaszkodziobych (zwłaszcza łabędzie nieme, kaczki krzyżówki i gęsi) oraz siewkowych (zwłaszcza mewy, bataliony, czajki). Wykaz gatunków dzikich ptaków stanowiących wysokie ryzyko zakażenia grypą ptaków przedstawia tabela 3. 5. Próbki wymazów z kloaki lub świeżego kału należy pobierać indywidualnie od co najmniej 5 ptaków tego samego gatunku, w tym samym miejscu i czasie, a następnie natychmiast umieścić w probówkach z podłożem transportowym dla wirusów (można użyć komercyjnie dostępne wymazówki z podłożem transportowym dla wirusów lub podłoża przygotowane zgodnie z Instrukcją GLWet z VI. 420/lab 1/2003 z dnia 5 czerwca 2003 dotyczącą przeprowadzania badań laboratoryjnych w kierunku influenzy ptaków o wysokiej zjadliwości). W jednej probówce z podłożem transportowym należy umieścić tylko 1 wymazówkę (nie pulować). 6. Pobrane próbki należy bezzwłocznie umieścić w temperaturze ok. 4 C i dostarczyć (transport w temp. ok. 4 C) do Zakładu Chorób Drobiu PIWet-PIB w Puławach, po uprzednim powiadomieniu telefonicznym pracowników Zakładu (tel. 081 886 30 51 w. 167/121). Jeśli dostarczenie próbek nie jest możliwe w ciągu 48 godz. od pobrania to należy je zamrozić (zalecana temp. ok. -70 C) i dostarczyć w stanie zamrożenia (używać suchego lodu). 7. Łączenie w próbki zbiorcze do 5 próbek od ptaków tego samego gatunku, pobrane w tym samym miejscu i czasie odbywać się będzie w laboratorium PIWet-PIB. Tabela 1. Liczba próbek od ptaków dzikich w wyznaczonych województwach w okresie luty-maj (wiosenne migracje ptaków). Liczba próbek kujawsko-pomorskie (04) 75 lubuskie (08) 75 łódzkie (10) 25 podkarpackie (18) 25 podlaskie (20) 75 pomorskie (22) 75 warmińsko-mazurskie (28) 25 zachodniopomorskie (32) 25 ogółem 400 5
Tabela 2. Liczba próbek od ptaków dzikich w wyznaczonych województwach w okresie wrzesień - grudzień (jesienne migracje ptaków). III. Monitoring bierny Liczba próbek dolnośląskie (02) 100 kujawsko-pomorskie (04) 50 lubelskie (06) 50 lubuskie (08) 100 łódzkie (10) 50 mazowieckie (14) 50 podkarpackie (18) 50 podlaskie (20) 50 pomorskie (22) 100 warmińsko-mazurskie (28) 50 wielkopolskie (30) 100 zachodniopomorskie (32) 50 ogółem 800 1. W ramach monitoringu biernego planuje się przebadanie około 300 próbek od ptaków padłych z terenu całego kraju. 2. Wskazaniem do monitoringu biernego jest stwierdzenie przypadków ponadnormatywnej (wyraźnie zwiększonej) śmiertelności i/lub klinicznych zachorowań u ptaków dzikich, zwłaszcza: a) wśród gatunków wymienionych w tabeli 3, a także innych ptaków mających z nimi kontakt; b) w miejscach ostoi/zatrzymywania się ptaków w okresie wędrówki wiosennej i jesiennej; c) w miejscach mieszania się dużej liczby ptaków migrujących różnych gatunków, głównie gatunków wymienionych w tabeli 3; d) w sąsiedztwie gospodarstw/ferm drobiu domowego; e) w pobliżu tras przelotów ptaków migrujących. 3. Z jednego miejsca należy pobrać próbki od ok. 5 ptaków tego samego gatunku, padłych w tym samym czasie. 4. Od świeżo padłych ptaków pobiera się (na miejscu lub najbliższym ZHW) próbki tkanek (mózg, serce, płuca, nerki, jelita). Próbki narządów miąższowych pobrane od tego samego ptaka można łączyć razem, natomiast jelita muszą być zapakowane osobno (używać szczelnie zamykanych opakowań). 5. Warunki dostarczenia próbek do laboratorium są takie same jak podano w punkcie C.II.6. 6. Przy pobieraniu próbek należy zachować dużą ostrożność (minimalizować tworzenie aerozolu, pyłu) i stosować standardowe środki ochronne (rękawice, okulary, maska osłaniająca usta i nos, czepek, fartuch), a po próbobraniu dokładnie umyć ręce w 6
wodzie z mydłem lub innym detergentem. Umyte ręce po wysuszeniu można jeszcze zdezynfekować używając 70% roztwór alkoholu lub inny środek do dezynfekcji rąk. Tabela 3. Tymczasowy wykaz gatunków dzikich ptaków stanowiących zwiększone ryzyko w związku z grypą ptaków Nazwa łacińska Nazwa w języku polskim 1. Cygnus olor łabędź niemy 2. Anser slbifrons gęś białoczelna 3. Anser fabalis gęś zbożowa 4. Anas platyrhynchos krzyżówka (kaczka) 5. Anas strepera krakwa (kaczka) 6. Anas acuta różeniec (kaczka) 7. Anas clypeata płaskonos (kaczka) 8. Anas penelope świstun (kaczka) 9. Anas crecca cyraneczka (kaczka) 10. Anas querquadula cyranka (kaczka) 11. Aythya ferina głowienka (kaczka) 12. Aythya fuligula czernica (kaczka) 13. Vanellus vanellus czajka 14. Philomachus pugnax batalion 15. Larus ridibundus mewa śmieszka 16. Larus canus mewa pospolita Wytyczne opracowali: Minta Z., Śmietanka K., Tomczyk G. Zakład Chorób Drobiu PIWet PIB Puławy, 2006-02-15 7