(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2011/02 EP B1 (13) (51) T3 Int.Cl. C07D 471/04 ( ) A61K 31/4375 ( ) A61P 25/08 ( ) (54) Tytuł wynalazku: Pochodne naftyrydyny jako modulatory kanału potasowego (30) Pierwszeństwo: US P US (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2010/19 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 2011/06 (73) Uprawniony z patentu: Valeant Pharmaceuticals International, Inc., Aliso Viejo, US (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 JEAN-MICHEL VERNIER, Laguna Niguel, US (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Jolanta Mitura PRZEDSIĘBIORSTWO RZECZNIKÓW PATENTOWYCH PATPOL SP. Z O.O. SKR. POCZT Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 Opis Zakres wynalazku [0001] Wynalazek dotyczy nowych związków stanowiących modulatory kanałów potasowych. Związki te są użyteczne w leczeniu i zapobieganiu chorobom i zaburzeniom, na które wywiera wpływ działanie potasowych kanałów jonowych. Jednym z takich stanów jest epilepsja. Tło wynalazku [0002] Stwierdzono, że retigabina (ester etylowy kwasu N-[2-amino-4-fluorobenzyloamino)fenylo]- karbamowego] (patent USA nr ) jest skuteczna w leczeniu epilepsji u dzieci. Bialer, M. et al, Epilepsy Research 1999, 34, Stwierdzono także, że retigabina jest użyteczna w leczeniu bólu, w tym bólu neuropatycznego. Blackburn-Munro and Jensen, Eur. J. Pharmacol. 2003, 460, ; Wickenden, A. D. et al. Export Opin. Ther. Patents (4). [0003] Postać epilepsji znana jako łagodne rodzinne drgawki noworodkowe związana jest z mutacjami w kanałach KCNQ2/3. Biervert, C. i in., Science 1998, 27, ; Singh, N.A., i in., Nat. Genet. 1998, 18, 25-29; Charlier, C. i in., Nat. Genet. 1998, 18, 53-55, Rogawski, Trends in Neurosciences 2000, 23, W kolejnych badaniach ustalono, że podstawowym obszarem działania retigabiny jest kanał KCNQ2/3. Wickenden, A.D. et al. Mol. Pharmacol. 2000, 58, ; Main, M.J. i in., Mol. Pharmacol. 2000, 58, Wykazano, że retigabina zwiększa przewodnictwo kanałów przy spoczynkowym potencjale błonowym oraz wiąże bramkę aktywacyjną kanału KCNQ 2/3. Wuttke, T.V. i in., Mol. Pharmacol. 2005, 67, Przy zwiększeniu zaawansowania badań w tym obszarze, wykazano, że retigabina zwiększa neuronalne prądy M oraz zwiększa prawdopodobieństwo otwarcia kanału dla kanałów KCNQ 2/3. Delmas, P. i Brown, D.A. Nat. Revs Neurosci., vol. 6, 2005, ; Tatulian, L. i Brown, D.A., J. Physiol., (2003) 549, [0004] Uznanie retigabiny za modulator kanału potasowego spowodowało podjęcie licznych poszukiwań innych modulatorów kanału potasowego wśród związków o różnych cechach strukturalnych wspólnych z retigabiną. [0005] Modulatory kanałów potasowych ujawnione są również w WO 2005/100349, patencie USA 2004/ oraz WO 2008/ Skrócony opis wynalazku [0006] W jednym z wykonań, niniejszy wynalazek dostarcza związku o wzorze I 1

3 w którym W i Z oznaczają, niezależnie, CH lub N; Y oznacza CH 2, O lub NH; w którym R 1 i R 2 oznaczają niezależnie, H, halogen, CH 2 F, CHF 2, CF 3, CF 2 CF 3, C 1 -C 6 alkil, C(=O)C 1 - C 6 alkil, CH 2 C (=O)C 1 -C 6 alkil, NH-C 1 -C 6 alkil, NHC(=O)C 1 -C 6 alkil, C(=O)N(CH 3 ) 2, C(=O)N(Et) 2, C(=O)NH-C 1 -C 6 alkil, C(=O) OC 1 -C 6 alkil, OC(=O)C 1 -C 6 alkil, OC 1 -C 6 alkil, SC 1 -C 6 alkil, C 3 -C 6 cykloalkil, (CH 2 ) m C 3 -C 6 cykloalkil, C 3 -C 6, cykloalkenyl, (CH 2 ) m C 3 -C 6 cykloalkenyl, C 2 -C 6 alkenyl, C 2 -C 6 alkinyl, Ar 1, (CH 2 ) m Ar 1, fenyl, pirydyl, pirolil, (CH 2 ) m imidazolil, (CH 2 ) m pirazyl, furyl, tienyl, (CH 2 ) m oksazolil, (CH 2 ) m i- zoksazolil, (CH 2 ) m tiazolil, (CH 2 ) m izotiazolil, (CH 2 ) m fenyl, (CH 2 ) m pirolil, (CH 2 ) m pirydyl lub (CH 2 ) m pirymidyl, które to grupy cykloalkilowe i cykloalkenylowe zawierają ewentualnie jeden lub dwa heteroatomy wybrane niezależnie spośród O, N, oraz S, przy czym alkil, cykloalkil, cykloalkenyl, alkenyl, alkinyl, imidazolil, pirazyl, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, fenyl, pirolil, pirydyl lub pirymidyl są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami wybranymi niezależnie z grupy obejmującej OH, halogen, grupę cyjanową, metyl, etyl lub trifluorometyl, gdzie m oznacza 0, 1 lub 2; albo R 1 i R 2, wraz z atomami pierścienia węglowego, do którego są przyłączone, tworzą skondensowany 5- lub 6-członowy pierścień, który może być nasycony, nienasycony lub aromatyczny i ewentualnie zawiera jeden lub dwa heteroatomy wybrane niezależnie spośród O, N i S, i jest ewentualnie podstawiony halogenem, CF 3, lub C 1 -C 3 alkilem; R oznacza H, halogen, CF 3, lub C 1 -C 3 alkil; R 3 i R 4 oznaczają, niezależnie, H, NH 2, (C 1 -C 3 alkil)nh, CN, halogen, CF 3, OCF 3, OC 1 -C 3 alkil lub C 1 -C 3 alkil, przy czym wszystkie grupy C 1 -C 3 alkilowe i C 1 -C 6 alkilowe są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami niezależnie wybranymi z grupy obejmującej OH, halogen, C 1 -C 3 alkil, OC 1 -C 3 alkil lub trifluorometyl; q=1 lub 0; R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil, CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, CR 6 =CH-C 3 -C 6 cykloalkil, CH=CR 6 -C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w C 5 -C 6 cykloalkenyl, CH 2 (CHR 6 ) w C 5 -C 6 cykloalkenyl, C 2 -C 6 alkenyl, C 2 -C 6 alkinyl, Ar 1, (CHRAr 1, CH 2 (CHR 6 ) w Ar 1 lub (CHR 6 ) w CH 2 Ar 1, gdzie w=0-3, Ar 1 oznacza fenyl, pirydyl, furyl, tienyl, pirolil, oksazolil, tiazolil lub imidazolil, przy czym C 1 -C 6 alkil jest ewentualnie podstawiony hydroksylem, metoksylem, grupą metylotio lub halogenem, a cykloalkil oraz cykloalkenyl są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami niezależnie wybranymi z grupy obejmującej OH, halogen, grupę cyjanową, metyl, etyl lub trifluorometyl; R 6 oznacza wodór, metyl, halogen lub metoksyl; oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole. Związki te są modulatorami kanałów potasowych. [0007] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek dostarcza lub obejmuje kompozycję zawierającą farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, substancję pomocniczą lub rozcieńczalnik i co najmniej jeden z 2

4 następujących: i) farmaceutycznie skuteczną ilość związku o wzorze I; ii) jego farmaceutycznie dopuszczalną sól; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalny ester; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalny solwat. [0008] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek ujawnia sposób leczenia lub zapobiegania chorobie lub zaburzeniu, na które wpływ ma zwiększenie neuronalnych prądów M, obejmujący podawanie wymagającemu tego pacjentowi jednego lub więcej spośród następujących: i) farmaceutycznie skutecznej ilości związku o wzorze I; ii) jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalnego estru; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalnego solwatu. [0009] W jeszcze innym wykonaniu, niniejszy wynalazek ujawnia sposób zapobiegania lub leczenia choroby lub zaburzenia, na które wpływ ma aktywacja bramkowanych napięciem kanałów potasowych, obejmujący podawanie wymagającemu tego pacjentowi jednego lub więcej spośród następujących: i) farmaceutycznie skutecznej ilości związku o wzorze I; ii) jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalnego estru; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalnego solwatu. [0010] W jeszcze innym wykonaniu, niniejszy wynalazek ujawnia sposób leczenia lub zapobiegania epilepsji u ludzi, obejmujący podawanie dotkniętemu lub potencjalnie dotkniętemu takim zaburzeniem pacjentowi jednego lub więcej spośród następujących: i) farmaceutycznie skutecznej ilości związku o wzorze I; ii) jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalnego estru; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalnego solwatu. [0011] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek dostarcza lub obejmuje formulację farmaceutyczną do podawania doustnego, zawierającą terapeutycznie skuteczną ilość związku o wzorze I oraz odpowiedni środek tabletkujący lub odpowiedni syrop do zastosowania pediatrycznego. [0012] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek dostarcza lub obejmuje tabletkę do podawania doustnego, zawierającą terapeutycznie skuteczną ilość związku o wzorze I oraz odpowiedni środek tabletkujący. [0013] W innym odpowiednim wykonaniu, niniejszy wynalazek dostarcza lub obejmuje syrop do zastosowania pediatrycznego, zawierający roztwór lub zawiesinę związku o wzorze I i odpowiedni syrop. [0014] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek obejmuje formulację farmaceutyczną do podawania zwierzętom, w tym zwierzętom towarzyszącym (psom i kotom) oraz zwierzętom gospodarskim, zawierającą terapeutycznie skuteczną ilość związku o wzorze I oraz weterynaryjnie dopuszczalny nośnik. [0015] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek dostarcza sposobu zapobiegania lub leczenia choroby lub zaburzenia, na które wpływ ma aktywacja bramkowanych napięciem kanałów potasowych, obejmującego podawanie wymagającemu tego zwierzęciu jednego lub więcej spośród następujących: i) farmaceutycznie skutecznej ilości związku o wzorze I; ii) jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalnego estru; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalnego solwatu. [0016] W innym wykonaniu, niniejszy wynalazek ujawnia sposób leczenia epilepsji u zwierząt, obejmujący podawanie dotkniętemu lub potencjalnie dotkniętemu takim zaburzeniem zwierzęciu jednego lub więcej spośród następujących: i) farmaceutycznie skutecznej ilości związku o wzorze I; ii) 3

5 jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli; iii) jego farmaceutycznie dopuszczalnego estru; iv) oraz jego farmaceutycznie dopuszczalnego solwatu. [0017] Niniejszy wynalazek obejmuje wszystkie tautomery, sole i formy stereoizomeryczne związków o wzorze I. Wynalazek obejmuje także wszystkie związki według wynalazku, w których jeden lub więcej atomów zastąpione jest ich izotopem promieniotwórczym. [0018] W bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA [0019] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB. [0020] W jeszcze bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA, w którym W i Z oznaczają N. [0021] W innym jeszcze bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA, w którym W oznacza N, a Z oznacza CH. [0022] W innym jeszcze bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA, w którym W oznacza CH, a Z oznacza N. [0023] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA, w którym R oznacza H, halogen, CF 3 lub metyl. [0024] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IA, w którym W i Z oznaczają N, a R oznacza H, F lub metyl. [0025] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB, w którym W i Z oznaczają N. [0026] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB, w którym W oznacza N, a Z oznacza CH. 4

6 [0027] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB, w którym W oznacza CH, a Z oznacza N. [0028] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB, w którym R oznacza H, halogen, CF 3 lub metyl. [0029] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza związku o wzorze IB, w którym W i Z oznaczają N, R oznacza H, F lub metyl. [0030] W bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA, w którym R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 ),NC 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil. [0031] W bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IB, w którym R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 )a,c 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil. [0032] Ponadto, w bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA, w którym R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 )C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil; a R 1 oznacza H, CF 3 lub halogen. [0033] W jeszcze bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA, w którym R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, podstawiony metoksylem, grupą metylotio lub halogenem; R oznacza metyl lub H; a R 1 oznacza H, CF 3 lub halogen. [0034] W innym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze I, w którym R 5 oznacza CR 6 =CH-C 3 -C 6 cykloalkil, CH=CR 6 -C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w C 5 -C 6 cykloalkenyl, CH 2 (CHR 6 ) w C 5 -C 6 cykloalkenyl, C 2 -C 6 alkenyl lub C 2 -C 6 alkinyl; R oznacza metyl lub H; a R 1 oznacza H, CF 3 lub halogen. [0035] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA, w którym R oznacza metyl lub H; R 1 oznacza H, CF 3 lub halogen; R 3 i R 4 oznaczają metyl, aminometyl lub chlor; a R 5 oznacza Ar 1, (CHR 6 ) w Ar 1, CH 2 (CHR 6 ) w Ar 1 lub (CHR 6 ) w CH 2 Ar 1. [0036] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA, w którym R oznacza lub H; R 1 oznacza H, CF 3 lub halogen; R 3 i R 4 oznaczają metyl; a R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 )CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 )C 3 -C 6 cykloalkil. [0037] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA lub IB, w których R 2 oznacza H lub F; R oznacza H lub halogen; R 3 i R 4 oznaczają metyl; a R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil. [0038] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA lub IB, w których RS oznacza CHZCHZcyklopentyl lub jedną z poniższych grup: 5

7 [0039] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA lub IB, w którym R 1 oznacza halogen lub halogenometyl; R 2 oznacza H lub halogen; a R 5 oznacza jedną powyższych grup. [0040] W innym bardziej konkretnym wykonaniu, wynalazek dostarcza lub obejmuje związek o wzorze IA lub IB, w którym R 1 oznacza fenyl, pirydyl, pirolil, (CH 2 ) m imidazolil, (CH 2 ) m pirazyl, (CH 2 ) m oksazolil, (CH2) m izoksazolil, (CH 2 ) m tiazolil, (CH 2 ) m izotiazolil, (CH 2 ) m fenyl, (CH 2 ) m pirolil, (CH 2 ) m pirydyl lub (CH 2 ) n pirymidyl, a R 5 oznacza C 5 -C 6 alkil lub CH 2 -C 3 -C 6 cykloalkil. [0041] Poniższe przykłady mają na celu przedstawienie, ale bez ograniczenia w żaden sposób, różnych możliwych wykonań wynalazku. 6

8 Szczegółowy opis wynalazku [0042] Opracowując związki o właściwościach terapeutycznych lepszych od wykazywanych przez retigabinę, 7

9 twórcy niniejszego wynalazku stwierdzili, że para N-1,2,3,4-tetrahydroizochinoliloanilidy oraz karbaminiany o strukturze przedstawionej wzorem I mają zadziwiającą i wyjątkową aktywność względem kanałów potasowych, co zostało udowodnione w opisanym poniżej badaniu wypływu rubidu przez pomiar ich silnej aktywności. [0043] W użytym tu znaczeniu, określenie modulator kanału potasowego dotyczy związku zdolnego do spowodowania zwiększenia prądów w kanale potasowym. Określenie to dotyczy także związku zdolnego do zwiększenia prawdopodobieństwa otwarcia kanału KCNQ2/3. Do wstępnego zbadania związków pod kątem zdolności do modulowania kanału potasowego, twórcy wynalazku zastosowali opisane poniżej badanie wypływu jonów rubidu. [0044] Zgodnie z niniejszym wynalazkiem, związki o wzorze I przeznaczone są do podawania doustnego lub dożylnego w dawce wynoszącej do około 1200 mg dziennie. Zatem, niniejszy wynalazek obejmuje roztwory i zawiesiny związków o wzorze I, którym nadano postać do podawania dożylnego. Podobnie, oprócz związków o wzorze I, wynalazek obejmuje także roztwory i zawiesiny obejmujące wśród wielu innych przykładów syrop, taki jak sorbitol lub glikol propylenowy, do podawania pediatrycznego. Ponadto, wynalazek obejmuje również tabletki zawierające związki o wzorze I, wraz z farmaceutycznie dopuszczalnymi środkami tabletkującymi i innymi, farmaceutycznie dopuszczalnymi, nośnikami i substancjami pomocniczymi, zarówno nadające się do żucia, jak i nienadające się do żucia. W użytym tu znaczeniu, określenie farmaceutycznie dopuszczalny nośnik obejmuje substancje pomocnicze, substancje wiążące, środki poślizgowe, środki tabletkujące i środki dezintegrujące typowo stosowane w technice wytwarzania farmaceutyków. Przykłady takich środków obejmują, lecz nie wyłącznie, celulozę mikrokrystaliczną, laktozę, skrobię, fosforan diwapnia oraz 8

10 Povidon. Dodatkowo, uwzględnione są środki dezintegrujące, takie jak sól sodowa glikolanu skrobi, środki poślizgowe, takie jak kwas stearynowy i SiO 2, oraz środki zwiększające rozpuszczalność, takie jak cyklodekstryny, wśród wielu innych przykładów dla każdej grupy. Substancje takie oraz sposoby ich zastosowania są dobrze znane w dziedzinie farmacji. Dodatkowe przykłady są zawarte w Kibbe, Handbook of Pharmaceutical Excipients, London, Pharmaceutical Press, [0045] W niniejszym wynalazku uwzględnione są również formulacje farmaceutyczne, obejmujące formulacje szczepionek, zawierające terapeutycznie skuteczną ilość związku o wzorze I i dopuszczalny weterynaryjnie nośnik, do podawania zwierzętom, w tym zwierzętom towarzyszącym (psom i kotom) oraz zwierzętom gospodarskim, takim jak bydło, świnie, owce i konie. Jednakże, zakresem wynalazku objęte jest każde zwierzę dotknięte epilepsją. Standardowy sposób podawania stanowi podawanie domięśniowe, doustne lub przezskórne wstrzyknięcie od około 0,05 ml do około 25 ml preparatu. Jednakże, jak wskazano powyżej, związki o wzorze I przeznaczone są do podawania w ilości do około 1200 mg dziennie. Szczepienie można przeprowadzić w jednej lub kilku iniekcjach. Objęte wynalazkiem kompozycje szczepionek stosowane w sposobach według niniejszego wynalazku mogą zawierać jeden lub więcej weterynaryjnie dopuszczalnych nośników. Określenie weterynaryjnie dopuszczalny nośnik obejmuje dowolne i wszystkie rozpuszczalniki, środki dyspersyjne, środki powlekające, adiuwanty, stabilizatory; rozcieńczalniki, substancje pomocnicze, środki konserwujące, środki izotoniczne. Rozcieńczalniki mogą obejmować wodę, sól fizjologiczną, dekstrozę, etanol, glicerol i tym podobne. Środki izotoniczne mogą obejmować, przykładowo, chlorek sodu, dekstrozę, mannitol, sorbitol i laktozę. Adiuwanty uwzględnione w niniejszym wynalazku obejmują saponiny, cholesterol, wodorotlenek glinu w żelu, kompletne i niepełne adiuwanty Freunda. Niniejszy wynalazek obejmuje także formulacje szczepionek obejmujące od około 1 mg/ml do około 2000 mg adiuwanta na dawkę kompozycji szczepionki. Synteza Schematy ogólne [0046] Część I. Wytwarzanie związków o wzorze V przedstawiono na Schemacie 1. 9

11 [0047] Część II. Wytwarzanie związków o wzorze VII przedstawiono na Schemacie 2. [0048] Część III. Wytwarzanie związku o wzorze IX przedstawiono na Schemacie 3. 10

12 [0049] Część IV. Wytwarzanie związku o wzorze X przedstawiono na Schemacie 4. [0050] Część V. Wytwarzanie związku o wzorze XI przedstawiono na Schemacie 5. 11

13 [0051] Część VI. Wytwarzanie związku o wzorze XIII przedstawiono na Schemacie 6. Wytwarzanie poszczególnych związków Synteza N-[2,6-dimetylo-4-(2-trifluorometylo-7,8-dihydro-5H-[1,6]naftyrydyn-6-ylo)-fenylo]-3,3- dimetylobutyramidu (11) 12

14 [0052] 1-benzylo-4-pirolidyn-1-ylo-1,2,3,6-tetrahydropirydyna (3) [0053] Roztwór zawierający N-benzylopiperydon 1 (5g, 26,4 mmol) i pirolidynę 2 (2,82g, 39,6 mmol) w toluenie (60 ml) ogrzewano do temperatury wrzenia pod chłodnicą zwrotną usuwając azeotropowo wodę. Następnie schłodzono mieszaninę reakcyjną i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymany olej rozpuszczono w eterze, wysuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surową enaminę 3 zastosowano w następnym etapie. 6-benzylo-2-trifluorometylo-5,6,7,8-tetrahydro-[1,6]naftyrydyna (5) [0054] Do roztworu surowej enaminy 3 (500 mg, 2,1 mmol) w dioksanie (5 ml) dodano związek 4 (0,3 ml, 2,1 mmol) i przez noc mieszano mieszaninę w temperaturze pokojowej. Następnie dodano octan amonu (20 mg) i ogrzewano mieszaninę do temperatury wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 18 godzin. Następnie schłodzono mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej, zakwaszono 10% HCI, ekstrahowano dichlorometanem i zatężono. W wyniku oczyszczenia metodą preparatywnej chromatografii cienkowarstwowej (DCM/MeOH 5%) otrzymano związek 5. 13

15 2-trifluorometylo-5,6,7,8-tetrahydro-[1,6]naftyrydyna (7) [0055] Do roztworu 5 (500 mg, 1,7 mmol) w dichlorometanie (8 ml) dodano związek 6, chlorek 3- chloropropionylu (0,22 ml, 2,1 mmol) i mieszano mieszaninę reakcyjną przez 18 godzin, w temperaturze 40 C. Następnie schłodzono mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej i zatężono. Uzyskaną pozostałość rozpuszczono w metanolu (16 ml) i mieszano przez 3 godziny w temperaturze 40 C. Następnie schłodzono mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej i zatężono. N-(4-bromo-2,6-dimetylo-fenylo)-3,3-dimetylo-butyramid (8) [0056] Do roztworu 4-bromo-2-chloro-6- (trifluorometylo)aniliny (5,0 g, 25 mmol) w acetonitrylu (30 ml) dodano chlorek 3,3-dimetylobutanoilu (3,37 g, 3,5 ml, 25 mmol) oraz trietyloaminę (2,53g, 3,5 ml, 25 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Do mieszaniny dodano wodę, zebrano uzyskany osad i otrzymano tytułowy związek w postaci proszku (7,46 g, wydajność 100%). N-[2,6-dimetylo-4-(2-trifluorometylo-7,8-dihydro-5H-[1,6]naftyrydyn-6-ylo)-fenylo]-3,3-dimetylobutyramid (11) [0057] Do bezwodnego toluenu (5 ml, oczyszczany argonem przez 30 min) dodano bis(dibenzylidynoaceton)palladu (15 mg, 0,026 mmol) oraz (2 - dicykloheksylofosfanylo-bifenyl-2-ilo)- dimetylaminę (40 mg, 0,1 mmol) i mieszano mieszaninę przez dodatkowe 30 minut, w temperaturze pokojowej, pod argonem. Następnie dodano tert-butanolan potasu (188 g, 71 mmol), związek 7 (191 mg, 0,8 mmol), związek pomocniczy 8 (200 mg, 0,67 mmol); mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze 80 C. Następnie mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury pokojowej, przesączono przez wkład z żelu krzemionkowego, oczyszczono metodą preparatywnej TLC (DCM/MeOH 5%) i otrzymano związek 11. N-(2,6-dimetylo-4-(3-(trifluorometylo)-7,8-dihydro-1,6-naftyrydyn-6(5H)-ylo)fenylo)-3,3- dimetylobutanamid [0058] 14

16 [0059] Do bezwodnego toluenu (1 ml, oczyszczony argonem) dodano bis(dibenzylidynoacetono)- pallad (4 mg, 0,069 mmol) oraz (2 -dicykloheksylofosfanylo-bifenyl-2-ilo)-dimetyloaminę (7 mg, 0,015 mmol) i poddano mieszaniu przez 15 minut pod argonem. Następnie dodano tert-butanolan potasu (36 mg, 0,32 mmol), N-(4-bromo-2,6-dimetylofenylo)-3,3-dimetylobutanamid (52 mg, 0,17 mmol) oraz 3-(trifluorometylo)-5,6,7,8-tetrahydro-1,6-naftyrydynę (WO/ ) (40 mg, 0,15 mmol) i mieszano mieszaninę reakcyjną przez noc, w temperaturze 80 C. Następnie schłodzono mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej, zatężono, oczyszczono stosując urządzenie firmy Biotage (75 % octan etylu:heksany) i otrzymano żądany związek w postaci ciała stałego. 1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 1,05 (s, 9H), 2,11 (s, 6H), 2,17 (s, 2H), 3,08 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,64 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 4,48 (s, 2H), 6,76 (s, 2H), 8,08 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,90 (s, 1H). Synteza innych podstawionych tetrahydro-1,6-naftyrydyn [0060] Podstawienia w pozycjach 2 i 3 tetrahydro-1,6-naftyrydyn można dokonać przez kondensację 1-benzylo-4-piperydynonu z odpowiednimi 3-aminoenonami, a następnie debenzylację. (Schemat II) [0061] Alkilowanie tetrahydro-1,6-naftyrydyn w pozycjach 5 lub 8 można przeprowadzić przez chemiczną modyfikację pochodnych pirydyny. (Patrz Schemat III) 15

17 Wyniki biologiczne [0062] Związki według niniejszego wynalazku oceniono jako modulatory kanału potasowego przez pomiar uwalniania jonu rubidu w poniższym badaniu. [0063] Sposoby: komórki PC-12 hodowano w temperaturze 37 C i 5 % CO 2 na podłożu DMEM/F12 z dodatkiem 10 % surowicy końskiej, 5% cielęcej surowicy płodowej, 2 mm glutaminy, 100 U/ml penicyliny, 100 U/mi streptomycyny. Umieszczono je w pokrytych D-lizyną, 96-studzienkowych mikropłytkach do hodowli komórkowych (40000 komórek/studzienkę) i różnicowano 100 ng/ml NGF-7s przez 2 do 5 dni. Na potrzeby badania, pożywkę odessano, a komórki przemyto jednokrotnie 0,2 ml buforu przemywającego (25 mm HEPES, ph 7,4, 150 mm NaCl, 1 mm MgCl 2, 0,8 mm NaH 2 PO 4, 2 mm CaCl 2 ). Następnie komórki obciążono stosując 0,2 ml buforu obciążającego z jonami rubidu (bufor przemywający oraz 5,4 mm RbCl 2, 5 mm glukozy) i inkubowano w temperaturze 37 C przez 2 godziny. Przyłączone komórki szybko przemyto trzykrotnie buforem (takim samym jak bufor obciążający z jonami rubidu, ale zawierającym 5,4 mm KC1 zamiast RbC1) w celu usunięcia pozakomórkowego Rb+. Natychmiast po przemyciu, do komórek dodano 0,2 ml buforu depolaryzującego (bufor przemywający oraz 15 mm KC1), wraz ze związkami lub bez związków, w celu aktywacji wypływu jonów w kanale potasowym. Po inkubowaniu przez 10 minut w temperaturze pokojowej, supernatant ostrożnie usunięto i zebrano. Komórki poddano lizie przez dodanie 0,2 ml buforu do lizy (bufor depolaryzujący oraz 0,1 % Triton X- 100) i zebrano także lizaty komórkowe. Jeżeli zebranych próbek nie poddano natychmiast badaniu na zawartość Rb+ metodą atomowej spektroskopii absorpcyjnej (patrz poniżej), przechowywano je w temperaturze 4 C, co nie miało negatywnego wpływu na późniejsze badania Rb+. [0064] Stężenie Rb+ w supernatantach (Rb+ sup ) i lizatach komórkowych (Rb+ Lys ) zmierzono ilościowo, stosując spektrometr płomieniowej absorpcji atomowej ICR8000 (Aurora Biomed Inc., Vancouver, B.C.) w warunkach określonych przez producenta. 0,05 ml próbki przetworzono automatycznie z płytki do mikromiareczkowania przez rozcieńczenie taką samą objętością próbki buforu testowego z Rb+ i wstrzyknięcie do płomienia acetylenowo-powietrznego. Ilość Rb+ w próbce 16

18 określono mierząc absorpcję przy 780 nm stosując lampę z katodą wnękową jako źródło światła oraz detektor PMT. Dla każdego zestawu płytek wykreślono krzywą kalibracji w zakresie 0-5 mg/l Rb w próbce buforu testowego. Procentowy wypływ Rb+ (F) określono jako [0065] Działanie (E) związku określono jako: E= [(Fc-Fb)/(Fs-Fb)] x 100 %, gdzie Fc oznacza wypływ w obecności związku w buforze depolaryzującym, Fb oznacza wypływ w buforze podstawowym, Fs oznacza wypływ w buforze depolaryzującym, a F oznacza wypływ w obecności związku w buforze depolaryzującym. Zależność między działaniem (E) i stężeniem związku przedstawiono na wykresie w celu określenia wartości EC 50, stężenia związku dla 50% maksymalnego wypływu Rb+. Wyniki przedstawiono poniżej. Legenda: A: EC 50 = 1 nm - 50 nm; B: EC 50 = 50 nm nm; C: EC 50 = nm Tabela 1 Aktywność przykładowego związku Związek Aktywność A C Zastrzeżenia patentowe 1. Związek o wzorze I 17

19 w którym W i Z oznaczają, niezależnie, CH lub N; Y oznacza CH 2, O lub NH; w którym R 1 i R 2 niezależnie oznaczają, H, halogen, CH 2 F, CHF 2, CF 3, CF 2 CF 3, C 1 -C 6 alkil, C(=O)C 1 - C 6 alkil, CH 2 C (=O)C 1 -C 6 alkil, NH-C 1 -C 6 alkil, NHC(=O)C 1 -C 6 alkil, C(=O)N(CH 3 ) 2, C(=O)N(Et) 2, C(=O)NH-C 1 -C 6 alkil, C(=O) OC 1 -C 6 alkil, OC(=O)C 1 -C 6 alkil, OC 1 -C 6 alkil, SC 1 -C 6 alkil, C 3 -C 6 cykloalkil, (CH 2 ) m C 3 -C 6 cykloalkil, C 3 -C 6, cykloalkenyl, (CH 2 ) m C 3 -C 6 cykloalkenyl, C 2 -C 6 alkenyl, C 2 -C 6 alkinyl, Ar 1, (CH 2 ) m Ar 1, fenyl, pirydyl, pirolil, (CH 2 ) m imidazolil, (CH 2 ) m pirazyl, furyl, tienyl, (CH 2 ) m oksazolil, (CH 2 ) m - izoksazolil, (CH 2 ) m tiazolil, (CH 2 ) m izotiazolil, (CH 2 ) m fenyl, (CH 2 ) m pirolil, (CH 2 ) m pirydyl lub (CH 2 ) m pirymidyl, które to grupy cykloalkilowe i cykloalkenylowe ewentualnie zawierają jeden lub dwa heteroatomy wybrane niezależnie spośród O, N, and S, przy czym alkil, cykloalkil, cykloalkenyl, alkenyl, alkinyl, imidazolil, pirazyl, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, fenyl, pirolil, pirydyn lub pirymidyl są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami niezależnie wybranymi z grupy obejmującej OH, halogen, grupę cyjanową, metyl, etyl lub trifluorometyl, gdzie m oznacza zero, 1 albo 2; lub R 1 i R 2, wraz z atomami pierścienia węglowego, do którego są przyłączone, tworzą skondensowany 5- lub 6-członowy pierścień, który może być nasycony, nienasycony lub aromatyczny i ewentualnie zawiera jeden lub dwa heteroatomy niezależnie wybrane spośród O, N i S, i który jest ewentualnie podstawiony halogenem, CF 3, lub C 1 -C 3 alkilem; R oznacza H, halogen, CF 3, lub C 1 -C 3 alkil; R 3 i R 4 oznaczają, niezależnie, H, NH 2, (C 1 -C 3 alkil)nh, CN, halogen, CF 3, OCF 3, OC 1 -C 3 alkil lub C 1 -C 3 alkil, przy czym wszystkie grupy C 1 -C 3 alkilowe i C 1 -C 6 alkilowe są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami niezależnie wybranymi z grupy obejmującej OH, halogen, C 1 -C 3 alkil, OC 1 - C 3 alkil lub trifluorometyl; q=1 lub 0; R 5 oznacza C 1 -C 6 alkil, (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil, CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, CR 6 =CH-C 3 -C 6 cykloalkil, CH=CR 6 C 3 -C 6 cykloalkil, (CHR 6 ) w C 5 -C 6 cykloalkenyl, CH 2 (CHR 6 ) w C 5 - C 6 cykloalkenyl, C 2 -C 6 alkenyl, C 2 -C 6 alkinyl, Ar 1, (CHRAr 1, CH 2 (CHR 6 ) w Ar 1 lub (CHR 6 ) w CH 2 Ar 1, gdzie w=0-3, Ar 1 oznacza fenyl, pirydyl, furyl, tienyl, pirolil, oksazolil, tiazolil lub imidazolil, przy czym C 1 -C 6 alkil jest ewentualnie podstawiony hydroksylem, metoksylem, grupą metylotio lub halogenem, a cykloalkil oraz cykloalkenyl są ewentualnie podstawione jedną lub dwoma grupami niezależnie wybranymi z grupy obejmującej OH, halogen, grupę cyjanową, metyl, etyl lub trifluorometyl; R 6 oznacza wodór, metyl, halogen lub metoksyl; oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole. 18

20 2. Związek według zastrz. 1, którym jest związek o wzorze IA lub wzorze 1B. 3. Związek według zastrz. 2, w którym W i Z oznaczają CH, a R oznacza halogen, C 1 -C 3 alkil lub H. 4. Związek według zastrz. 2, w którym W i Z oznaczają N, a R oznacza halogen, C 1 -C 3 alkil lub H. 5. Związek według zastrz. 2, w którym W oznacza N, Z oznacza CH, a R oznacza halogen, C 1 -C 3 alkil lub H. 6. Związek według zastrz. 3, w którym R 3 i R 4 oznaczają, metyl, grupę aminową, aminometyl, metoksyl, trifluorometyl lub atom chloru. 7. Związek według zastrz. 6, w którym R 3 i R 4 oznaczają, niezależnie, atom chloru, trifluorometyl, metoksyl lub metyl, R 5 oznacza C 5 -C 6 alkil, (CHR 6 ) w CH 2 C 3 -C 6 cykloalkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil; przy czym grupa C 5 -C 6 alkilowa jest ewentualnie podstawiona metoksylem lub halogenem, a cykloalkil jest ewentualnie podstawiony jedną lub dwoma grupami wybranymi, niezależnie, z grupy obejmującej OH, halogen, grupę cyjanową, metoksyl, metyl, etyl lub trifluorometyl. 8. Związek według zastrz. 7, w którym R 1 oznacza H, halogen, CH 2 F, CHF 2, CF 3, CF 2 CF 3, C 1 -C 6 alkil, C(=O)C 1 -C 6 alkil. 9. Związek według zastrz. 8, w którym R 5 oznacza C 5 -C 6 alkil lub CH 2 (CHR 6 ) w C 3 -C 6 cykloalkil, w którym w = 1, a R 6 oznacza H, metyl lub metoksyl. 19

21 10. Związek według zastrz. 9, w którym R 3 i R 4 oznaczają metyl, a R 5 oznacza neopentyl lub 2- cykloheksyletyl. 11. Związek według zastrz. 10, w którym R 1 oznacza F lub CF 3, a R 2 oznacza H lub F. 12. Związek według zastrz. 1 wybrany z grupy obejmującej: 20

22 13. Kompozycja obejmująca farmaceutycznie dopuszczalny nośnik i co najmniej jeden z poniższych składników: i) farmaceutycznie skuteczna ilość związku o wzorze I; ii) farmaceutycznia dopuszczalna sól związku o wzorze I; iii) farmaceutycznie dopuszczalny ester związku o wzorze I; iv) farmaceutycznie dopuszczalny solwat związku o wzorze I, przy czym farmaceutycznie dopuszczalny nośnik stanowi ewentualnie celuloza mikrokrystaliczna. 14. Związek o wzorze I według zastrz. 1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, solwat lub ester do stosowania w zapobieganiu lub leczeniu choroby lub zaburzenia, na które wpływ wywiera aktywacja bramkowanych napięciem kanałów potasowych. 15. Związek do stosowania według zastrz. 14, w którym chorobę lub zaburzenie stanowi epilepsja. 16. Związek do stosowania według zastrz. 15, którym jest związek o wzorze IA. 17. Związek do stosowania według zastrz. 14, którym jest związek o wzorze I jest wybrany z grupy obejmującej: 21

23 18. Związek do stosowania według dowolnego z zastrz , którego terapeutycznie skuteczna ilość jest w zakresie od około 300 mg do około 2000 mg dziennie. 19. Związek o wzorze I lub jego sól, solwat albo ester, do stosowania do zwiększenia prawdopodobieństwa otwarcia kanału dla kanałów KCNQ2/3 u ssaka. 20. Związek do stosowania według zastrz. 19, którym jest związek o wzorze IA. 21. Związek o wzorze IA, jak określony w zastrz. 2, lub jego sól, solwat lub ester do stosowania do zwiększenia neuronalnych prądów M u ssaka. 22. Tabletka do podawania drogą doustną zawierająca farmaceutycznie dopuszczalny nośnik oraz od około 100 do około 700 mg związku o wzorze IA, jak określony w zastrz. 2 albo jego sól, solwat lub ester, dodatkowo ewentualnie obejmująca środek poślizgowy lub środek dezintegrujący, przy czym tabletka ewentualnie nadaje się do żucia. 23. Farmaceutyczny syrop do zastosowania pediatrycznego, obejmujący od około 100 do około 700 mg na dawkę związku o wzorze IA, jak określony w zastrz. 2 albo jego sól, solwat lub ester. 22

24 PUBLIKACJE CYTOWANE W OPISIE Listę cytowanych przez zgłaszającego odnośników zamieszczono jedynie dla wygody czytającego. Lista ta nie stanowi części europejskiego dokumentu patentowego. Niezależnie od uwagi, którą poświęcono w celu zestawienia tych odnośników, nie wyklucza się błędów i pomyłek i EPO zrzeka się odpowiedzialności w tym względzie. Cytowane w opisie dokumenty patentowe US A [0002] WO A [0005] US A [0005] WO A [0005] WO A [0059] Cytowana w opisie literatura niepatentowa Bialer, M. et al. Epilepsy Research, 1999, vol. 34, 1-41 [0002] Blackburn-Munro ; Jensen. Eur. J. Pharmacol.,2003, vol. 460, [0002] Wickenden, A.D. et al. Expert Opin.Ther. Patents, 2004, vol. 14 (4 [0002] Biervert, C. et al. Science, 1998, vol. 27, [0003] Singh, N.A. et al. Nat. Genet., 1998, vol. 18, [0003] Charlier, C. et al. Nat. Genet, 1998, vol. 18, [0003] Rogawski. Trends in Neurosciences, 2000, vol. 23, [0003] Wickenden, A.D. et al. Mol. Pharmacol., 2000, vol. 58, [0003] Main, M.J. et al. Mol. Pharmacol., 2000, vol. 58, [0003] Wuttke, T.V. et al. Mol. Pharmacol., 2005, vol. 67, [0003] Delmas, P. ; Brown, D.A. Nat. Revs Neurosci., 2005, vol. 6, [0003] Tatulian, L. ; Brown, D.A. J. Physiol., 2003, vol. 549, [0003] 23