" Rezultaty badan przeprowadzonych na analizatorach hematologicznych firmy Beckman Coulter serii LH / DXH800, pozwalajace na wykrycie nieprawidlowych

Transkrypt

1 " Rezultaty badan przeprowadzonych na analizatorach hematologicznych firmy Beckman Coulter serii LH / DXH800, pozwalajace na wykrycie nieprawidlowych komórek obecnych w infekcjach bakteryjnych, posocznicach, zakażeniach wirusowych i malarii.

2 Wstęp do Technologii i Sprzętu Beckman COULTER

3 Vacuum Technologia Coultera Aperture Current Pathway Internal Electrode External Electrode Suspension of Cells Detail of Aperture External Housing (Aperture Bath) Aperture Aperture Housing

4 VCS Technology V Volume C-Conductivity S -Scatter

5 V C S

6

7

8 VCS Technology Monos Neuts Eos Lymphs Basos

9 LH780

10 DxH800

11 Infekcje bakteryjne Posocznica Infekcje wirusowe Malaria

12 Infekcje bakteryjne

13 System Immunologiczny Odpornośc Komórkowa System System Odporność Humoralna

14 Zakażenia bakteryjne Neutrophil Eosinophil Monocyte Platelet Basophil Lymphocyte

15 Zmiany w morfologii Neutrofili w wyniku infekcji bakteryjnej Dohle Bodies Toxic Granulation 15 Cytoplasmic Vacuolization Presence of band forms

16 W jaki sposób rozróżniamy komórki? Wielkość Kształt jądra komórkowego Ziarnistości Stosunek wielkości jądra do cytoplazmy Różnice w aktywności enzymatycznej

17 LH CPD(Cell Population Data) 24 dodatkowe parametry 17

18 DxH CPD 56 dodatkowych parametrów

19 Tak samo jak mamy parametr Mean RBC Volume dla RBC (MCV), również mamy Mean NE Volume dla Neutrofili Tak samo jak mamy RDW RBC dla RBC, również mamy NE Szerokość Dystrybucji dla Neutrofili (NE V SD) LEFT SHIFT

20 Przykład : Umiarkowane przesunięcie w lewo CASE WITH MODERATE LEFT SHIFT 20 NORMAL CASE

21 Umiarkowane przesunięcie w lewo NORMAL CASE Wartości CPD pacjenta zdrowego - NORMA 21

22 Zmiany w populacji WBC w trakcie rozwoju choroby Przykład pierwszy od lewej wskazuje wartości prawidłowe.przykład ostatni po prawej - rozrost Imm NE. R Simon et al. Blood Vol 94 NO 10 supl 1 part 2 Nov page 45b.

23 WBC(RPD) Research Population Data Case Study Left Shift Normal Promielocyty Mielocyty Metamielocyty Pałki

24 RPD w ostrej infekcji bakteryjnej Am J Clin Pathol 2005;124: 69 pacjentów z ostrą infekcją bakteryjną, 35 norma Parametry ØNe Mean Volume, ØNe Mean Conductivity, ØNe Mean Scatter Ne Mean Vol Ne Mean Scatter Sepsis 156 ± ± 10.1 Normal 143 ± ± 7.3 Cut-off Ne Mean Vol >150 Swoistość 91% and czułość 70%

25 RPD w ostrej infekcji bakteryjnej Ambrosch A et al. ISLH 2006, Abstr 193 Ne Mean Vol MPV Sepsis 159 ± ± 1.1 Non-systemic infection 148 ± ± 1.0 p=0.002 P=0.019 Cut-off Ne Mean Vol >152.5 swoistość 70% i czułość 64.3% Cut-off MPV >9.07 swoistość 70% i czułość 54% MNV i MPV - dodatkowe parametry odróżniające sepse od ogólnoustrojowej reakcji zapalnej 65 pacjentów z ostrą infekcją bakteryjną Parametry ØNe Mean Vol ØMo Mean Vol ØMPV ØCRP ØWBC ØPLT ØIL6

26 * DxH 800

27 Podsumowanie Istotne parametry IVD : IC/CC parametry: Dodatkowe parametry RUO : WBC count/µl NEU count/µl C-reactive protein IL-6 Procalcitonine MNV SD Vol Ne Zysk : Możliwość konfiguracji metod decyzyjnych w celu potwierdzenia diagnozy

28 Infekcja Wirusowa

29 Neutrophil Eosinophil Monocyt Płytki Basophil Limfocyt

30 Różnorodność morfologii limfocytów Normal: Infekcja wirusowa: Lymphoma (CLL): Lymphoma (others): Acute Lymphatic Leukemia (ALL):

31 Wartości Normalne T Cells B Cells NK Cells PB % 8-20% 5-14 % BM < 40 % < 40 % < 15 % T / B ratio of 5-10 / 1

32 Przykład klasyczny Zmiany Lym w CLL

33 CLL

34 Skategramy VCS B-CLL Normal Infekcja wirusowa

35 Drzewo diagnostyczne > SD Vol Ly/Ly Cut-off 3,47 < < Normals Mean Vol Ly/Mean C Ly Cut-off 0,78 > Suspect Viral infections < Suspect B-Cll Mean Vol Ly Cut-off 79,6 > Suspect OLPD Sensitivity Specificity TP FN PPV NPV

36 Podsumowanie : Istotne parametry IVD : Dodatkowe parametry RUO : WBC count/µl LY count/µl MLV SD VOL LY Zysk : Możliwość konfiguracji metod decyzyjnych w celu potwierdzenia diagnozy wczesne wykrycie populacji małych LY

37 Malaria

38 Podejrzenie Malarii

39 Metody wykrycia malarii Metodą podstawową jest wykonanie rozmazu krwi obwodowej i diagnostyka mikroskopowa. Procedura jest trudna i czasochłonna, często dająca fałszywie negatywne wyniki.

40 Zarodziec malarii w RBC Rozmaz krwi obwodowej

41 Malaria 1. W odpowiedzi na infekcję spowodowaną Malarią następuje wzrost populacji dużych,pobudzonych Monocytów oraz Limfocytów 2. Niski poziom płytek krwi 3. Bardzo niski poziom lub brak Eozynofili 4. Dodatkowy pik w histogramie WBC poniżej 35 Femtolitre

42 Monocyty Lymphocyt Pobudzone Lymphocyte

43 Wygląd skategramów w Malarii w porównaniu z normą NORMAL 5 5 Malaria 1. Normal Monocyte 3. Large vacuoled Monocytes MALARIA 2. Normal Lymphocyte 4. Reactive Lymphocyte 5. Infected Malaria RBC

44 38.9% Plasmodium falciparum Platelets 102 A PEAK AT 35 FL

45 NORMAL MALARIA MALARIA MALARIA MALARIA

46 MALARIA FLAG Informacja Podejrzenie Malarii pojawia się w analizatorach Coulter dzięki technologii VCS wykrywającej Malarię w trakcie rutynowej CBC/Diff. Dzięki temu możemy w szybkim czasie zdiagnozować chorobę, nawet w przypadku gdy jest ona nieoczekiwana

47

48 alaria factor = SD Vol Ly x SD Vol Mo / 100 Cut-off 3,7 Sensitivity 98% Specificity 94%

49 Dodatkowe Kryteria Malaria Factor > 3.7 SD volume Monocytów > 23.2 Mean Volume of Monocytów > 180 Plt < 150 % EO < 0.15% WBC histogram Sensitivity 99.3% Specificity 96.3% AUC 0.991

50 DxH 800 Ramon Simon, MD

51 Malaria - Podsumowanie W pełni zautomatyzowana, szybka metoda oznaczania współczynnika Malarii w rutynowej CBC Tani, szybki test, wczesna diagnoza. Rodzaj Plasmodium nie wpływa na współczynnik Malarii Bardziej czuły i swoisty niż inne testy diagnostyczne wykrywające malarię.

52 Infekcja Bakteryjna Mean Ne Vol SD Vol Ne Infekcja Wirusowa Mean Ly Vol SD Vol Ly Malaria SD Vol Ly SD Vol Mo Plt < 150 % EO < 0.15% WBC histogram

53