(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2010/44 EP B1 (13) (51) T3 Int.Cl. A61K 39/395 ( ) A61P 1/16 ( ) A61P 35/00 ( ) C07K 14/47 ( ) C07K 16/18 ( ) C12N 15/09 ( ) C12P 21/08 ( ) C07K 16/30 ( ) (54) Tytuł wynalazku: Przeciwciała anty-glipikan 3 (30) Pierwszeństwo: JP (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2006/26 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 2011/04 (73) Uprawniony z patentu: CHUGAI SEIYAKU KABUSHIKI KAISHA, Tokyo, JP (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 KIYOTAKA NAKANO, Gotemba, JP TAKESHI YOSHINO, Tokyo, JP JUN-ICHI NEZU, Gotemba, JP HIROYUKI TSUNODA, Gotemba, JP TOMOYUKI IGAWA, Gotemba, JP HIROKO KONISHI, Gotemba, JP MEGUMI TANAKA, Gotemba, JP IZUMI SUGO, Gotemba, JP SHIGETO KAWAI, Kamakura, JP TAKAHIRO ISHIGURO, Kamakura, JP YASUKO KINOSHITA, Kamakura, JP (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Sylwia Anna Grzelak WTS RZECZNICY PATENTOWI WITEK, ŚNIEŻKO I PARTNERZY ul. R. Weigla Wrocław Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 Opis TŁO WYNALAZKU Dziedzina wynalazku [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy przeciwciała anty-glipikan 3, inhibitora wzrostu komórek i czynnika przeciwnowotworowego zawierających to przeciwciało jako składnik aktywny. Opis stanu techniki [0002] Glipikan 3 (GPC3) należy do rodziny glipikanów siarczanowo-heparanowych proteoglikanów obecnych na powierzchni komórek. Sugeruje się, że GPC3 może odgrywać rolę w podziałach komórki w rozwoju wzrostu komórek nowotworowych, jego funkcja nie została jednak dotychczas dobrze zbadana. [0003] Stwierdzono, że pewien rodzaj przeciwciał wiążących GPC3 wykazuje zdolność hamowania wzrostu komórek za pośrednictwem aktywności zależnej od przeciwciał cytotoksyczności komórkowej (ADCC) i cytotoksyczności zależnej od układu dopełniacza (CDC) (Międzynarodowe Zgłoszenie Patentowe WO 2003/000883). Ponadto sugerowano, że GPC3 jest przecinany in vivo i wydzielany do krwi jako wydzielana postać GPC3, i że możliwe jest diagnozowanie nowotworów za pomocą przeciwciała zdolnego do wykrywania wydzielanej postaci GPC3 (Międzynarodowe Zgłoszenia Patentowe WO 2004/022739, WO 03/ i WO 2004/018667). WO opisuje przeciwciała przeciwko N-końcowi i C-końcowi GPC3. [0004] Przy opracowywaniu czynnika przeciwnowotworowego opartego na aktywności cytotoksycznej przeciwciała korzystne jest, by stosowane przeciwciało wykazywało wysoką aktywność ADCC lub CDC. Zgodnie z tym, przeciwciało anty-gpc3 wykazujące wysoką aktywność cytotoksyczną jest pożądane jako przeciwciało rozpoznające GPC3. [0005] Celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie przeciwciała anty-gpc3 wykazującego wyższą aktywność ADCC i CDC w porównaniu z aktywnościami przeciwciała konwencjonalnego. STRESZCZENIE WYNALAZKU [0006] Twórcom niniejszego wynalazku udało się uzyskać przeciwciało o wyższej aktywności cytotoksycznej w porównaniu z aktywnością konwencjonalnego przeciwciała anty-glipikan 3. Ponadto, przeanalizowali epitopy takiego przeciwciała i udało im się wyznaczyć obszary GPC 3 rozpoznawane przez przeciwciało o wysokiej aktywności cytotoksycznej. [0007] Niniejszy wynalazek dostarcza przeciwciało zdolne do wiązania glipikanu 3, gdzie przeciwciało to jest: (a) przeciwciałem obejmującym: (i) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 123, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 124, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 125; oraz (ii) obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 143, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; 3

3 (b) przeciwciało obejmujące (i) i zdolne do współzawodniczego (kompetycyjnego) hamowania wiązania przeciwciała według (a) z glipikanem 3; (c) przeciwciało obejmujące (ii) i zdolne do współzawodniczego hamowania wiązania przeciwciała według (a) z glipikanem 3; (d) przeciwciało wykazujące taką samą aktywność wiązania z glipikanem 3 jak przeciwciało według któregokolwiek z (a) do (c), w którym jedna reszta aminokwasowa jest podstawiona, wydeletowana lub dodana i/lub wstawiona w sekwencjach aminokwasowych przedstawionych w (a); (e) przeciwciało zdolne do wiązania z epitopem, z którym może wiązać się przeciwciało według (a), gdzie to przeciwciało według (a) obejmuje zarówno sekwencje obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego, jak i lekkiego wymienione w (a); lub (f) przeciwciało zdolne do wiązania z peptydem złożonym z sekwencji reszt aminokwasowych glipikanu 3. [0008] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 według któregokolwiek z (1) (12): (1) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 123, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 124, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 125; (2) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 109, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 110, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 111; (3) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 106, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 107, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 108; (4) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 132, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 133, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 134; (5) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 106, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 135, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 136; (6) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 126, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 127, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 128; (7) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 129, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 130, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 131; (8) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 103, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 104, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 105; (9) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 118, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 121, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 122; 4

4 (10) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 115, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 116, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 117; (11) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 112, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 113, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 114; lub (12) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 118, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 119, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 120. [0009] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 według któregokolwiek z (1) (13): (1) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 143, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (2) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 143, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 145; (3) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 140, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 141, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 142; (4) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 167, CDR12 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 168, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 169; (5) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 170, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 171; (6) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 159, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 160, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 161; (7) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 162, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 147, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 163; (8) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 164, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 165, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 166; (9) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 137, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 138, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 139; (10) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 155, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 156, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 157; 5

5 (11) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 149, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 150, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 151; (12) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 146, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 147, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 148; lub (13) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 152, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 153, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 154. [0010] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała wybranego z grupy złożonej z któregokolwiek z (1) (13): (1) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 143, 144 i 158; (2) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 109, 110 i 111, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 143, 144 i 145; (3) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 106, 107 i 108, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 140, 141 i 142; (4) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 132, 133 i 134, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 167, 168 i 169; (5) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 106, 135 i 136, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 170, 144 i 171; (6) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 126, 127 i 128, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 159, 160 i 161; (7) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 129, 130 i 131, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 162, 147 i 163; (8) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 129, 130 i 131, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 164, 165 i 166; 6

6 (9) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 103, 104 i 105, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 137, 138 i 139; (10) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 118, 121 i 122, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 155, 156 i 157; (11) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 115, 116 i 117, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 149, 150 i 151; (12) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 112, 113 i 114, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 146, 147 i 148; i (13) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 118, 119 i 120, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 152, 153 i 154. [0011] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego według któregokolwiek z (1) (7): (1) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 84; (2) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 85; (3) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 86; (4) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 87; (5) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 88; (6) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 89; lub (7) obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 90. [0012] Wynalazek odnosi się ponadto do przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha lekkiego przedstawiony w SEKW. NR ID.: 92. [0013] Korzystnie, przeciwciało według wynalazku jest wybrane z grupy złożonej z przeciwciała według któregokolwiek z (1) (7): (1) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 84 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; (2) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 85 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; 7

7 (3) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 86 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; (4) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 87 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; (5) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 88 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; (6) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 89 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92; i (7) przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha ciężkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 90 oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92. [0014] Wynalazek odnosi się do przeciwciała obejmującego obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 według któregokolwiek z (1) (15): (1) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 174, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (2) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 175, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (3) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 176, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (4) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 177, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (5) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 178, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (6) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 179, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (7) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 180, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (8) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 181, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; 8

8 (9) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 182, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (10) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 183, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (11) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 184, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (12) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 185, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (13) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 186, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; (14) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 187, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158; lub (15) CDR1 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 188, CDR2 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 144, i CDR3 obejmujący sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 158. [0015] W innym aspekcie wynalazek dostarcza przeciwciało wybrane z grupy złożonej z przeciwciał (1) (15): (1) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 174, 144 i 158; (2) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 175, 144 i 158; (3) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 176, 144 i 158; (4) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 177, 144 i 158; (5) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 178, 144 i 158; 9

9 (6) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 179, 144 i 158; (7) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 180, 144 i 158; (8) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 181, 144 i 158; (9) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 182, 144 i 158; (10) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 183, 144 i 158; (11) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 184, 144 i 158; (12) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124, i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 185, 144, i 158; (13) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124, i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 186, 144 i 158; (14) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 187, 144 i 158; i (15) przeciwciało obejmujące obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124 i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 188, 144 i 158. [0016] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha lekkiego wybrany z (1) (15): 10

10 (1) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 191; (2) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 192; (3) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 193; (4) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 194; (5) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 195; (6) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 196; (7) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 197; (8) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 198; (9) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 199; (10) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 200; (11) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 201; (12) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 202; (13) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 203; (14) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 204; i (15) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 205. [0017] W innym aspekcie wynalazek dostarcza przeciwciało posiadające obszar zmienny łańcucha lekkiego wybrany z grupy złożonej z (1) (15): (1) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 191; (2) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 192; (3) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 193; (4) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 194; 11

11 (5) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 195; (6) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 196; (7) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 197; (8) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 198; (9) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 199; (10) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 200; (11) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 201; (12) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 202; (13) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 203; (14) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 204; i (15) obszaru zmiennego łańcucha lekkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 205. oraz obszar zmienny łańcucha ciężkiego wybrany z grupy złożonej z (1) (7): (1) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 84; (2) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 85; (3) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 86; (4) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 87; (5) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 88; (6) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 89; i (7) obszaru zmiennego łańcucha ciężkiego obejmującego sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID: 90. [0018] Obszar zmienny łańcucha ciężkiego, obszar zmienny łańcucha lekkiego i sekwencje CDR 1, 2 i 3, oraz SEKW. NR ID. podsumowano w tabeli poniżej. 12

12 Przeciwciało i obszary zmienne SEKW. NR ID. M3C11 H 22 M13B3 H 23 M1E7 H 24 M3B8 H 25 M11F1 H 26 M19B11 H 27 M6B1 H 28 M18D4 H 29 M5B9 H 30 M10D2 H 31 L9G11 H 32 M3C11 L 44 M13B3 L 45 M1E7 L 46 M3B8 L 47 M11F1 L 48 M19B11 L 49 M6B1 L 50 M18D4 L 51 M5B9 L 52 M10D2 L 53 L9G11 L 54 GC199 H 60 GC202 H 61 GC33 H 62 GC179 H 63 GC194 H 64 GC199 L 71 GC202 L 72 GC33 L 73 GC179 L 74 GC194(1) L 75 GC 194(2) L 76 GC33.ver.a H 84 GC33.ver.c H 85 GC33.ver.f H 86 GC33.ver.h H 87 GC33.ver.i H 88 GC33.ver.j H 89 GC33.ver.k H 90 GC33.ver.a L 92 M13B3(H) CDR1 103 CDR2 104 CDR3 105 M3B8(H) CDR1 106 CDR2 107 CDR3 108 M11F1(H) CDR1 109 CDR2 110 CDR3 111 M5B9(H) CDR1 112 CDR2 113 CDR3 114 M6B1(H) CDR1 115 CDR2 116 CDR3 117 M10D2(H) CDR

13 CDR2 119 CDR3 120 L9G11(H) CDR1 118 CDR2 121 CDR3 122 GC33(H) CDR1 123 CDR2 124 CDR3 125 GC179(H) CDR1 126 CDR2 127 CDR3 128 GC194(H) CDR1 129 CDR2 130 CDR3 131 GC199(H) CDR1 132 CDR2 133 CDR3 134 GC202(H) CDR1 106 CDR2 135 CDR3 136 M13B3(L) CDR1 137 CDR2 138 CDR3 139 M3B8(L) CDR1 140 CDR2 141 CDR3 142 M11F1(L) CDR1 143 CDR2 144 CDR3 145 M5B9(L) CDR1 146 CDR2 147 CDR3 148 M6B1(L) CDR1 149 CDR2 150 CDR3 151 M10D2(L) CDR1 152 CDR2 153 CDR3 154 L9G11(L) CDR1 155 CDR2 156 CDR3 157 GC33(L) CDR1 143 CDR2 144 CDR3 158 GC179(L) CDR1 159 CDR2 160 CDR3 161 GC194(L)1 CDR1 162 CDR2 147 CDR3 163 GC194(L)2 CDR1 164 CDR2 165 CDR3 166 GC199(L) CDR1 167 CDR2 168 CDR3 169 GC202(L) CDR1 170 CDR

14 CDR3 171 GC33(L) G34A 174 GC33(L) G34D 175 GC33(L) G34E 176 GC33(L) G34F 177 GC33(L) G34H 178 GC33(L) G34N 179 GC33(L) G34P 180 GC33(L) G34Q 181 GC33(L) G34I 182 GC33(L) G34K 183 GC33(L) G34L 184 GC33(L) G34V 185 GC33(L) G34W 186 GC33(L) G34Y 187 GC33(L) G34R 188 [0019] Wynalazek obejmuje ponadto przeciwciało posiadające aktywność równoważną aktywności przeciwciała opisanego powyżej, gdzie jedną lub więcej reszt aminokwasowych podstawiono, wydeletowano lub dodano i/lub wstawiono w sekwencjach aminokwasowych opisanych powyżej. [0020] Korzystnie, przeciwciało jest przeciwciałem humanizowanym. [0021] Zatem w innym aspekcie wynalazek dostarcza humanizowane przeciwciało zdolne do wiązania glipikanu 3. [0022] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała zdolnego do wiązania peptydu złożonego z sekwencji reszt aminokwasowych glipikanu 3. [0023] Wynalazek odnosi się też do przeciwciała zdolnego do wiązania peptydu złożonego z sekwencji reszt aminokwasowych glipikanu 3. Wynalazek odnosi się też do przeciwciała zdolnego do wiązania peptydu złożonego z sekwencji reszt aminokwasowych glipikanu 3. [0024] Korzystnie, przeciwciało jest zdolne do wiązania peptydu złożonego z sekwencji reszt aminokwasowych , lub glipikanu 3 lub peptydu złożonego z sekwencji reszt aminokwasowych glipikanu 3. [0025] W jeszcze innym aspekcie wynalazek dostarcza przeciwciało zdolne do wiązania epitopu, z którym może wiązać się drugie przeciwciało, gdzie to drugie przeciwciało obejmuje obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 123, 124, i 125, oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego posiadający CDR 1, 2 i 3 obejmujące sekwencję aminokwasową przedstawioną odpowiednio w SEKW. NR ID: 143, 144, i 158. Konkretnie, przeciwciało według wynalazku jest zdolne do współzawodniczenia w wiązaniu GPC3 z drugim przeciwciałem. [0026] W korzystnym wykonaniu przeciwciało według wynalazku jest zdolne do wiązania glipikanu 3 i wykazuje wysoką aktywność CDC przeciwko komórce wyrażającej glipikan 3 i/lub wykazuje wysoką aktywność ADCC przeciwko komórce wyrażającej glipikan 3. [0027] W innym aspekcie wynalazek dostarcza polinukleotyd kodujący obszar zmienny łańcucha ciężkiego lub obszar zmienny łańcucha lekkiego przeciwciała według wynalazku. 15

15 [0028] W jednym z aspektów polinukleotyd ma jedną z sekwencji przedstawionych w SEKW. NR ID.: 57, 67, lub 91. [0029] Korzystnie, polinukleotyd według wynalazku ma sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 11-21, 33-43, 55-59, i [0030] W jeszcze innym aspekcie wynalazek dostarcza inhibitor wzrostu komórek i czynnik przeciwnowotworowy zawierające w charakterze składnika czynnego przeciwciało według wynalazku. Korzystnie, czynnik przeciwnowotworowy według wynalazku jest stosowany do leczenia wątrobiaka. [0031] Wynalazek odnosi się też do peptydu obejmującego sekwencję reszt aminokwasowych glipikanu 3, sekwencję reszt aminokwasowych glipikanu 3, sekwencję reszt aminokwasowych glipikanu 3 lub sekwencję reszt aminokwasowych glipikanu 3. [0032] Dostarczony jest także wektor zawierający polinukleotyd według wynalazku. Wynalazek dostarcza ponadto komórkę gospodarza zawierającą taki wektor. [0033] Wynalazek dostarcza ponadto sposób wytwarzania przeciwciała obejmujący: (a) hodowanie komórki gospodarza według wynalazku, (b) izolowanie przeciwciała z hodowli (a), oraz (c) oczyszczanie z niej przeciwciała. [0034] Wynalazek dotyczy również przeciwciała według wynalazku do stosowania w leczeniu choroby nowotworowej. [0035] Ponadto dostarczony jest peptyd obejmujący sekwencję aminokwasową reszt aminokwasowych glipikanu 3. KRÓTKI OPIS FIGUR [0036] Fig. 1 przedstawia aktywność wiązania przeciwciała anty-gpc3 z komórką CHO, komórką CHO wyrażającą pełnej długości GPC3, Hep2 i HuH-7, zbadaną za pomocą cytometrii przepływowej. M1E7 (linia ciągła) i M11F (linia przerywana) zastosowano odpowiednio, w stężeniach 5 μg/ml. Fig. 2 jest tabelą przedstawiającą wyniki klasyfikacji epitopów za pomocą współzawodniczego oznaczenia ELISA. Stopień hamowania współzawodniczego przeciwko wiązaniu biotynylowanego przeciwciała anty- GPC3 wyrażono w procentach. Epitopy sklasyfikowano w 5 grupach od a do e na podstawie wzoru hamowania współzawodniczego. Fig. 3 przedstawia wyniki badania za pomocą Western blot czy przeciwciało anty-gpc3 wiąże się z N- końcowym fragmentem o wielkości 40 kda rozpuszczalnej postaci rdzeniowego białka GPC-3 lub jej C- końcowym fragmentem o wielkości 30 kda. Stwierdzono, że L9G11 wiąże się z fragmentem N-końcowym, zaś M3C11 wiąże się z fragmentem C-końcowym. Fig. 4 przedstawia wyniki wykrywania obecności wydzielanej postaci GPC3 w supernatantach hodowli HepG2 za pomocą kanapkowego oznaczenia ELISA. Była ona wyraźnie wykrywana za pomocą kombinacji przeciwciał wiążących fragment N-końcowy, takich jak M6B1, M18D4 lub M19B11, a nie była wyraźnie wykrywana za pomocą przeciwciał wiążących fragment C-końcowy, takich jak M3C11, M13B3 lub M3B8. Fig. 5 przedstawia wyniki immunoprecypitacji supernatantu hodowli HepG2 przy użyciu przeciwciała anty- GPC3 i wykrywania wydzielanej postaci GPC3. Pożywka w charakterze kontroli (ścieżki 1 i 3) oraz 16

16 supernatant podłoża z hodowli HepG2 (ścieżki 2 i 4) immunoprecypitowano za pomocą M1E7 (ścieżki 1 i 2) i M10D2 (ścieżki 3 i 4). Fig. 6 przedstawia wyniki analizy epitopów dla przeciwciał wiążących C-końcowy fragment GPC3 za pomocą Western blot przy użyciu fuzyjnego białka C-końcowego peptydu GPC3 z GST. Rozpuszczalną postać rdzeniowego białka GPC3 (ścieżka 1), GST (ścieżka 2), GC-1 (ścieżka 3), GC-2 (ścieżka 4), GC-3 (ścieżka 5), GC-4 (ścieżka 6) i GC-5 (ścieżka 7) poddano elektroforezie SDS w warunkach redukujących i wykrywano za pomocą Western blot przy użyciu M3C11 i M11F1. Fig. 7 przedstawia wyniki oceny aktywności CDC chimerycznego mysio-ludzkiego przeciwciała anty-gpc3 wobec komórki CHO wyrażającej GPC3. Fig. 8 przedstawia wyniki oceny aktywności ADCC chimerycznego mysio-ludzkiego przeciwciała anty-gpc3 wobec komórki CHO wyrażającej GPC3 i HepG2. Fig. 9 przedstawia wyniki oceny aktywności ADCC przeciwciała GC33 wobec linii ludzkiego wątrobiaka HuH-7, za pomocą komórek efektorowych pochodzących ze szpiku kostnego myszy. Fig. 10 przedstawia wyniki oceny aktywności przeciwnowotworowej przeciwciała GC33 wobec modelu mysiego z przeszczepionym ludzkim wątrobiakiem. Fig, 11 przedstawia wyniki oceny aktywności CDC chimerycznego mysio-ludzkiego przeciwciała GC33 wobec komórki CHO wyrażającej GPC3. Fig. 12 przedstawia wyniki oceny aktywności ADCC chimerycznego mysio-ludzkiego przeciwciała GC33 wobec HepG2. Fig. 13 przedstawia pochodzące z GPC3 sekwencje zawarte w białkach fuzyjnych z GST (GC-4, 5, 6, 7, 8, 9, 11, 12, 13 i 14) przygotowanych do analizy epitopu GC33. Fig. 14 przedstawia wyniki Western blot przy użyciu GC-33 po rozdzieleniu GST, GC-7, 8, 9, 11, 12, 13 i 14 za pomocą SDS-PAGE w warunkach redukujących. Fig. 15 przedstawia wyniki oceny aktywności wiązania GPC3 przez humanizowane GC33 za pomocą oznaczenia ELISA. Fig. 16 przedstawia panel przeciwciał podsumowujący izotypy i wyniki oznaczeń ELISA, BIAcore i FACS, analizy epitopów i testu immunoprecypitacji dla klonów uzyskanych od myszy immunizowanej rozpuszczalną postacią GPC. Fig. 17 przedstawia panel przeciwciał podsumowujący izotypy i wyniki oznaczeń ELISA, FACS i analizy epitopów dla klonów uzyskanych od myszy immunizowanej PC-3. Fig. 18 przedstawia wyniki oceny aktywności wiązania rozpuszczalnej postaci rdzeniowego białka GPC3 przez modyfikowane przeciwciała za pomocą oznaczenia ELISA. Gly34 zlokalizowana w CDR1 w humanizowanym łańcuchu lekkim GC33 została zastąpiona dowolnym z 17 aminokwasów innych niż Cys i Met. Fig. 19 przedstawia wyniki oceny aktywności CDC chimerycznych mysio-ludzkich przeciwciał GC33, M3C11 i M1E7 wobec komórki CHO wyrażającej pełnej długości GPC3. Fig. 20 przedstawia wyniki oceny aktywności ADCC chimerycznych mysio-ludzkich przeciwciał GC33, M3C11 i M1E7 wobec linii ludzkiego wątrobiaka SK-03 wyrażającej pełnej długości GPC3. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYNALAZKU Przeciwciało [0037] Niniejszy wynalazek dostarcza przeciwciała opisane w następujących punktach od (I) do (XI). 17

17 (I) Przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 (GC33). Przeciwciało rozpoznaje C-końcowy peptyd glipikanu 3 (peptyd obejmujący aminokwasy od 374-tego do 580-tego aminokwasu glipikanu 3) oraz jest użyteczne jako przeciwciało terapeutyczne. (II) Przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 143, 144 i 158 (GC33). Przeciwciało rozpoznaje C-końcowy peptyd glipikanu 3 (peptyd obejmujący aminokwasy od 374-tego do 580-tego aminokwasu glipikanu 3) oraz jest użyteczne jako przeciwciało terapeutyczne. (III) Przeciwciało wybrane z grupy złożonej z przeciwciał opisanych w następujących punktach od (1) do (13): (1) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 143, 144 i 158 (GC33). [0038] Opisane przeciwciało rozpoznaje C-końcowy peptyd glipikanu 3 (peptyd obejmujący aminokwasy od 374-tego do 580-tego aminokwasu glipikanu 3) oraz jest użyteczne jako przeciwciało terapeutyczne. (IV) Przeciwciało posiadające obszar zmienny łańcucha ciężkiego według któregokolwiek z (1) (7): (1) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 84 (GC33 VH ver.a), (2) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 85 (GC33 VH ver.c), (3) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 86 (GC33 VH ver.f), (4) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 87 (GC33 VH ver.h), (5) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 88 (GC33 VH ver.i), (6) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 89 (GC33 VH ver.j), i (7) obszar zmienny łańcucha ciężkiego posiadający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 90 (GC33 VH ver.k). [0039] Wśród przeciwciał opisanych w (1) do (7) szczególnie korzystne są przeciwciała opisane w (2) do (7). (V) Przeciwciało posiadające obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierające sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a) (VI) Przeciwciało wybrane z grupy złożonej z przeciwciał opisanych w następujących punktach (1) do (7): (1) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 84 (GC33 VH ver.a) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), (2) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 85 (GC33 VH ver.c) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), 18

18 (3) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 86 (GC33 VH ver.f) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), (4) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 87 (GC33 VH ver.h) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), (5) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 88 (GC33 VH ver.i) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), (6) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 89 (GC33 VH ver.j) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a), i (7) przeciwciała posiadającego obszar zmienny łańcucha ciężkiego zawierający sekwencję przedstawioną w SEKW. NR ID.: 90 (GC33 VH ver.k) oraz obszar zmienny łańcucha lekkiego zawierający sekwencję aminokwasową przedstawioną w SEKW. NR ID.: 92 (GC33 VL ver.a). [0040] Wśród przeciwciał opisanych w (1) do (7) szczególnie korzystne są przeciwciała opisane w (2) do (7). (VII) Przeciwciało opisane w dowolnym z punktów (1) do (15): (1) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 174, 144 i 158, (2) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 175, 144 i 158, (3) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 176, 144 i 158, (4) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 177, 144 i 158, (5) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 178, 144 i 158, (6) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 179, 144 i 158, (7) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 180, 144 i 158, (8) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 181, 144 i 158, (9) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 182, 144 i 158, (10) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 183, 144 i 158, (11) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 184, 144 i 158, (12) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 185, 144 i 158, 19

19 (13) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 186, 144 i 158, (14) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 187, 144 i 158, i (15) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 188, 144 i 158. [0041] Wśród przeciwciał opisanych w (1) do (15) korzystne jest przeciwciało opisane w (15). (VIII) Przeciwciało opisane w dowolnym z punktów (1) do (15): (1) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 174, 144 i 158, (2) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 175, 144 i 158, (3) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 176, 144 i 158, (4) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 177, 144 i 158, (5) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 178, 144 i 158, (6) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 179, 144 i 158, (7) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 180, 144 i 158, (8) przeciwciało zawierające obszary zmienne łańcucha ciężkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 123, 124 i 125 oraz obszary zmienne łańcucha lekkiego posiadające CDR 1, 2 i 3 złożone z sekwencji aminokwasowych przedstawionych w SEKW. NR ID.: 181, 144 i 158, 20