GasPak EZ Systemy pojemników wytwarzaj¹cych gaz

Transkrypt

1 GasPak EZ Systemy pojemników wytwarzaj¹cych gaz / /09 Polski PRZEZNACZENIE Systemy pojemników wytwarzaj¹cych gaz GasPak EZ Gas Generating Container Systems s¹ systemami wielorazowego u ytku, wytwarzaj¹cymi atmosferê sprzyjaj¹c¹ pierwotnej izolacji i hodowli bakterii beztlenowych, mikroaerofilnych lub kapnofilnych przez zastosowanie torebek wytwarzaj¹cych gaz wewn¹trz pojemników do inkubacji, które przeznaczone s¹ do wielorazowego u ytku. STRESZCZENIE I OBJAŒNIENIE W roku 1965 Brewer i Allgeier wprowadzili jednorazow¹ kopertê wytwarzaj¹c¹ wodór, któr¹ póÿniej zmodyfikowano tak, aby uzyskaæ tak e wytwarzanie dwutlenku wêgla i funkcjê katalizatora wewnêtrznego. 1,2 Systemy pojemników wytwarzaj¹cych gaz GasPak EZ Gas Generating Container Systems zapewniaj¹ wydajnoœæ biologiczn¹ i wiarygodnoœæ, eliminuj¹c jednoczeœnie koniecznoœæ stosowania katalizatora lub procedury aktywacji. Torebka GasPak EZ Gas Generating Sachet zawiera wszystkie sk³adniki niezbêdne do wytworzenia swoistej atmosfery, niezbêdnej do inkubacji próbek. Torebkê i próbkê umieszcza siê w przezroczystym, plastikowym pojemniku do inkubacji GasPak EZ Incubation Container, przeznaczonym do uk³adania w stosy. Pojemnik zamyka siê i inkubuje. Standardowy pojemnik do inkubacji GasPak EZ, nr kat , mieœci p³ytek Petriego BBL Stacker. Du y pojemnik do inkubacji GasPak EZ, nr kat , mieœci p³ytek Petriego BBL lub po³¹czenie p³ytek Petriego i po ywek w probówkach. System BBL GasPak 100, nr kat , mieœci 12 p³ytek Petriego BBL Stacker lub po³¹czenie p³ytek Petriego i po ywek w probówkach. Du y system do hodowli w warunkach beztlenowych BBL GasPak 150, nr kat , mieœci 36 p³ytek Petriego BBL Stacker lub po³¹czenie p³ytek Petriego i po ywek w probówkach. ZASADA PROCEDURY Torebka wytwarzaj¹ca gaz GasPak EZ sk³ada siê z torebki z odczynnikiem, zawieraj¹cej wêglan nieorganiczny, wêgiel aktywowany, kwas askorbinowy i wodê. Po usuniêciu torebki z opakowania zewnêtrznego torebka ulega aktywacji pod wp³ywem ekspozycji na dzia³anie powietrza. Aktywowan¹ torebkê z odczynnikiem i próbki umieszcza siê w pojemniku do inkubacji GasPak EZ i pojemnik zamyka siê. Torebka szybko zmniejsza stê enie tlenu wewn¹trz pojemnika. Jednoczeœnie wêglan nieorganiczny produkuje dwutlenek wêgla. Przy hodowli bakterii beztlenowych torebki systemu pojemników do hodowli w warunkach beztlenowych GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets wytwarzaj¹ atmosferê beztlenow¹ w ci¹gu 2,5 h przy stê eniu dwutlenku wêgla nie mniejszym ni 15% w ci¹gu 24 h. Przy hodowli bakterii mikroaerofilnych torebki systemu pojemników GasPak EZ Campy Container System Sachets wytwarzaj¹ atmosferê mikroaerofilow¹ w ci¹gu 2 h, zawieraj¹c¹ oko³o 6-16% tlenu i 2-10% dwutlenku wêgla w ci¹gu 24 h. Przy hodowli drobnoustrojów wymagaj¹cych obecnoœci dwutlenku wêgla torebki systemu pojemników GasPak EZ CO 2 Container System Sachets wytwarzaj¹ w ci¹gu 24 h atmosferê o zawartoœci nie mniej ni 2,5% dwutlenku wêgla. ODCZYNNIKI Ostrze enia i œrodki ostro noœci: Do stosowania w diagnostyce in vitro. Podczas przeprowadzania wszystkich procedur nale y przestrzegaæ ustalonych œrodków ostro noœci, zwi¹zanych z czynnikami ryzyka mikrobiologicznego. Przed utylizacj¹ pojemniki na próbki oraz inny ska ony materia³ nale y poddaæ sterylizacji w autoklawie. Po u yciu torebka mo e zostaæ ciep³a. Torebkê wyrzucaæ po zakoñczeniu reakcji (kiedy jest ch³odna). NIE U YWAÆ torebki, je eli folia zewnêtrzna jest otwarta lub w jakikolwiek sposób uszkodzona. Unikaæ wystawiania na bezpoœrednie dzia³anie œwiat³a s³onecznego i na skrajn¹ temperaturê. Je eli u ywa siê wiêcej ni jednej torebki, NIE WOLNO uk³adaæ ich w stos. NIE OTWIERAÆ pojemnika przed zakoñczeniem inkubacji. Torebki systemu GasPak EZ Container System Sachets s¹ przeznaczone do u ycia w pojemnikach do inkubacji GasPak EZ, w systemie BBL GasPak 100 lub du ym systemie do hodowli w warunkach beztlenowych BBL GasPak 150 Large. Ich stosowanie w innych systemach mo e spowodowaæ uzyskanie b³êdnych wyników. Pojemniki do inkubacji GasPak EZ s¹ przeznaczone do stosowania z torebkami do systemu pojemników GasPak EZ. Nie u ywaæ z innymi torebkami lub kopertami wytwarzaj¹cymi gaz (takimi jak np. BBL GasPak/GasPak Plus Envelopes). Instrukcja przechowywania: Po otrzymaniu torebki przechowywaæ w temperaturze 2-25 C w suchym œrodowisku. Torebki GasPak EZ Container System Sachets s¹ gotowe do u ycia. Data wa noœci dotyczy torebek nieotwartych, nienaruszonych i prawid³owo przechowywanych. Nie otwieraæ do chwili u ycia. Pogorszenie jakoœci produktu: Je eli opakowanie zewnêtrzne jest uszkodzone lub otwarte, produktu nie nale y stosowaæ. Nie u ywaæ pojemników popêkanych, z od³upanymi kawa³kami, uszkodzonymi uszczelkami lub innymi nieregularnoœciami. Sk³adniki czynne: Kwas askorbinowy, wêgiel aktywowany i woda Ostrze enie: Wêgiel aktywowany ma dzia³anie dra ni¹ce na oczy, uk³ad oddechowy i skórê.

2 PROCEDURA Materia³y dostarczone: System pojemników GasPak EZ. Ka dy system wymaga stosowania pojemnika i torebki lub torebek (zob. rozdzia³ Dostêpnoœæ ). Pojemnik Liczba torebek GasPak EZ Standard Incubation Container (Cat. No ) 2 GasPak EZ Large Incubation Container (Cat. No ) 3 BBL GasPak 100 System (Cat. No ) 1 BBL GasPak 150 Large Anaerobic System (Cat. No ) 3 Materia³y wymagane, ale niedostarczane: Taca na pojemniki do inkubacji GasPak EZ (zob. rozdzia³ Dostêpnoœæ ), stojak na probówki BBL GasPak, pomocnicza po ywka hodowlana, odczynniki, wskaÿniki warunków beztlenowych, drobnoustroje do kontroli jakoœci i sprzêt laboratoryjny niezbêdny do tej procedury. Procedura testowa: 1. Odpowiednie p³ytki umieœciæ na tacy wewn¹trz pojemnika do inkubacji GasPak EZ. (Je eli stosuje siê probówki w s³oju BBL GasPak, u yæ stojaka na probówki BBL GasPak, nr kat ) 2. Za pomoc¹ powy szej tabeli ustaliæ liczbê torebek niezbêdn¹ na 1 pojemnik. Wyj¹æ torebkê lub torebki do systemu pojemników GasPak EZ z opakowania kartonowego. Zdj¹æ zewnêtrzne opakowanie foliowe. 3. Aktywowane torebki umieœciæ w pojemniku do inkubacji GasPak EZ lub w s³oju BBL GasPak wraz z p³ytkami. Torebkê lub torebki nale y umieœciæ wzd³u p³ytek, miêdzy tac¹ na p³ytki a zewnêtrzn¹ stron¹ pojemnika. Je eli do inkubacji u ywa siê torebki do warunków beztlenowych GasPak EZ Anaerobe Sachet, dodaæ jednoczeœnie do pojemnika lub s³oja wskaÿnik warunków beztlenowych (Nr cat ). Przy u ywaniu GasPak EZ ze wskaÿnikiem nie potrzeba dodawaæ dodatkowego wskaÿnika poziomu O 2. WskaŸnik O 2 bêdzie bia³y po wyjêciu saszetki z opakowania foliowego. Wraz z ekspozycj¹ saszetki na dzia³anie atmosfery tlenowej stopniowo bêdzie stawa³ siê niebieski. Nastêpnie ponownie zmieni barwê na bia³¹, kiedy atmosfera ulegnie redukcji. 4. Zamkn¹æ pojemnik GasPak EZ, zak³adaj¹c na dno pojemnika pokrywê. Dok³adnie zatrzasn¹æ wszystkie cztery zatrzaski. Przy u ywaniu s³oja BBL GasPak instrukcjê stosowania mo na znaleÿæ w ulotce do³¹czanej do s³oja. 5. Inkubowaæ system pojemników GasPak EZ w temperaturze odpowiedniej dla hodowanego drobnoustroju, jednak nieprzekraczaj¹cej 45 C. Pojemniki GasPak EZ mo na uk³adaæ w stosy, jeden na drugim, oszczêdzaj¹c w ten sposób przestrzeñ wewn¹trz inkubatora. 6. Po inkubacji pojemnik otworzyæ, wyj¹æ p³ytki i odpowiednio zutylizowaæ torebki GasPak EZ Container System Sachets. Zalecenia odnoœnie do konserwacji: Odpowiednia konserwacja pojemnika do inkubacji GasPak EZ polega na stosowaniu siê do nastêpuj¹cych zaleceñ: 1. Unikaæ kontaktu ze œrodkami œciernymi. 2. Unikaæ kontaktu z rozpuszczalnikami i detergentami. 3. Po umyciu delikatnym detergentem przep³ukaæ i dok³adnie wysuszyæ. 4. Pojemnika ani pokrywy nie wolno sterylizowaæ w autoklawie. Kontrola jakoœci przez u ytkownika: Ka dy system pojemników do wytwarzania gazu GasPak nale y okresowo badaæ pod k¹tem jego zdolnoœci do zapewnienia odpowiednich warunków wzrostu danych bakterii. System Drobnoustrój do kontroli jakoœci GasPak EZ Anaerobe Container System Bacteroides fragilis ATCC GasPak EZ Campy Container System Campylobacter jejuni ATCC GasPak EZ CO 2 Container System Neisseria gonorrhoeae ATCC Nale y postêpowaæ zgodnie z obowi¹zuj¹cymi wymogami kontroli jakoœci, wynikaj¹cymi z przepisów miejscowych, krajowych i (lub) federalnych, wymogami akredytacji i rutynowymi procedurami kontroli jakoœci w danym laboratorium. Zaleca siê, aby u ytkownik stosowa³ siê do odpowiednich zaleceñ CLSI (dawniej NCCLS) i przepisów CLIA, dotycz¹cych sposobów kontroli jakoœci. WYNIKI Warunki beztlenowe uzyskuje siê w ci¹gu 2,5 h, przy czym przy temperaturze 35 C po 24 h stê enie dwutlenku wêgla wynosi nie mniej ni 15%. W ci¹gu 30 minut od aktywacji powinien uwidoczniæ siê kondensat. P³ytki z agarem zawieraj¹cym krew wygl¹daj¹ na zredukowane w ci¹gu 2-4 h w temperaturze 35 C. Wbudowany wskaÿnik atmosfery beztlenowej powinien wskazaæ atmosferê zredukowan¹ (barwa bia³a) w okresie 9 h w temperaturze 35 C. Warunki mikroaerofilowe osi¹ga siê w ci¹gu 2 h, przy czym w temperaturze 35 C stê enie tlenu wynosi oko³o 6-16%, a po 24 h stê enie dwutlenku wêgla wynosi 2-10%. Warunki atmosfery wzbogaconej w dwutlenek wêgla osi¹ga siê w ci¹gu 24 h, przy czym w temperaturze 35 C stê enie dwutlenku wêgla wynosi nie mniej ni 2,5%. CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŒCIOWA System pojemników do hodowli w warunkach beztlenowych GasPak EZ Anaerobic Container System (260678) Przed dopuszczeniem produktu do obrotu przyk³adowe próbki ka dej serii torebek systemu GasPak EZ Anaerobic Container System Sachets s¹ badane co do charakterystyki wydajnoœciowej. Ka d¹ próbkê torebki systemu pojemników GasPak EZ Anaerobic Container System aktywuje siê i umieszcza w pojemniku do inkubacji wraz z wskaÿnikiem warunków beztlenowych. Pojemnik zamyka siê zgodnie z instrukcj¹ na etykiecie i obserwuje przez czas niezbêdny do wytworzenia siê widocznej kondensacji. Nastêpnie pojemnik inkubuje siê 2

3 w temperaturze 35 ± 2 C. Po oko³o 2,5 h, do pojemnika do inkubacji wprowadza siê ig³ê kaliber 22 i d³ugoœci 1,5" i pobiera siê próbkê gazu. Próbkê tê umieszcza siê w chromatografie gazowym i analizuje pod k¹tem zawartoœci tlenu w pojemniku do inkubacji. Odsetek tlenu w ka dym pojemniku nie przekracza 1%, a œredni odsetek dla wszystkich próbek badanych pod k¹tem zawartoœci tlenu wynosi poni ej 0,7%. Po oko³o 24 h inkubacji w temperaturze 35 ± 2 C z pojemnika pobiera siê kolejn¹ próbkê i analizuje pod k¹tem zawartoœci dwutlenku wêgla. Odsetek dwutlenku wêgla w ka dym pojemniku wynosi co najmniej 15%. W okresie 9 h wskaÿnik atmosfery beztlenowej zmienia barwê na bia³¹ (atmosfera zredukowana). Œredni czas uwidocznienia siê kondensacji wewn¹trz pojemników do inkubacji wynosi 20 minut od momentu inkubacji. System ze wskaÿnikiem do hodowli w warunkach beztlenowych GasPak EZ Anaerobic System with Indicator (260001) Przed dopuszczeniem produktu do obrotu przyk³adowe próbki ka dej serii torebek systemu GasPak EZ Anaerobic System Sachets with Indicator s¹ badane co do charakterystyki wydajnoœciowej. Ka d¹ próbkê torebki systemu ze wskaÿnikiem do hodowli w warunkach beztlenowych GasPak EZ Anaerobic System with Indicator aktywuje siê i umieszcza w pojemniku do inkubacji. Pojemnik zamyka siê zgodnie z instrukcj¹ na etykiecie i obserwuje przez czas niezbêdny do wytworzenia siê widocznej kondensacji. Nastêpnie pojemnik inkubuje siê w temperaturze 35 ± 2 C. Po oko³o 2,5 h do pojemnika do inkubacji wprowadza siê ig³ê kaliber 22 i d³ugoœci 1,5",po³¹czon¹ ze strzykawk¹ o pojemnoœci 3 ml, i pobiera siê próbkê gazu. Próbkê tê umieszcza siê w chromatografie gazowym i analizuje pod k¹tem zawartoœci tlenu w pojemniku do inkubacji. Odsetek tlenu w ka dym pojemniku nie przekracza 1%, a œredni odsetek dla wszystkich próbek badanych pod k¹tem zawartoœci tlenu wynosi poni ej 0,7%. Po oko³o 24 h inkubacji w temperaturze 35 ± 2 C z pojemnika pobiera siê kolejn¹ próbkê i analizuje pod k¹tem zawartoœci dwutlenku wêgla. Odsetek dwutlenku wêgla w ka dym pojemniku wynosi co najmniej 15%. W ci¹gu 24 h inkubacji w temperaturze 35 ± 2 C musi dojœæ do redukcji tabletki bêd¹cej wskaÿnikiem warunków beztlenowych. Œredni czas pojawienia siê wewn¹trz s³ojów widocznej kondensacji wynosi do 20 minut od aktywacji. System pojemników GasPak EZ Campy Container System (260680) Przed dopuszczeniem produktu do obrotu przyk³adowe próbki ka dej serii systemu GasPak EZ Campy Container System s¹ badane co do charakterystyki wydajnoœciowej. Ka d¹ próbkê torebki systemu GasPak EZ Campy Container System aktywuje siê i umieszcza w pojemniku do inkubacji. Pojemnik zamyka siê zgodnie z instrukcj¹ na etykiecie i obserwuje przez czas niezbêdny do wytworzenia siê widocznej kondensacji. Nastêpnie pojemnik inkubuje siê w temperaturze 35 ± 2 C. Po oko³o 2 h do pojemnika do inkubacji wprowadza siê ig³ê kaliber 22 i d³ugoœci 1,5" i pobiera siê próbkê gazu. Próbkê tê umieszcza siê w chromatografie gazowym i analizuje pod k¹tem zawartoœci tlenu w pojemniku do inkubacji. Odsetek tlenu w ka dym pojemniku wynosi od 6 do 16%. Po oko³o 24 h inkubacji w temperaturze 35 ± 2 C z pojemnika pobiera siê kolejn¹ próbkê i analizuje pod k¹tem zawartoœci dwutlenku wêgla. Odsetek dwutlenku wêgla w ka dym pojemniku wynosi od 2 do 10%. Œredni czas pojawienia siê wewn¹trz pojemników do inkubacji widocznej kondensacji wynosi do 20 minut od aktywacji. System pojemników GasPak EZ CO 2 Container System (260679) Przed dopuszczeniem produktu do obrotu przyk³adowe próbki ka dej serii systemu GasPak EZ CO 2 Container System s¹ badane co do charakterystyki wydajnoœciowej. Ka d¹ próbkê torebki systemu GasPak EZ CO 2 Container System aktywuje siê i umieszcza w pojemniku do inkubacji wraz z 2 nape³nionymi p³ytkami Petriego. Pojemnik zamyka siê zgodnie z instrukcj¹ na etykiecie i inkubuje w temperaturze 35 ± 2 C. Po oko³o 24 h do pojemnika do inkubacji wprowadza siê ig³ê kaliber 22 i d³ugoœci 1,5" i pobiera siê próbkê gazu. Próbkê tê umieszcza siê w chromatografie gazowym i analizuje pod k¹tem zawartoœci dwutlenku wêgla w pojemniku do inkubacji. Odsetek dwutlenku wêgla w ka dym pojemniku wynosi co najmniej 3%. DOSTÊPNOŒÆ Numer kat. Opis Pojemnik do inkubacji GasPak EZ Standard (15-18 plytek) Pojemnik do inkubacji GasPak EZ Large (30-33 plytek) Torebki do systemu pojemników do hodowli w warunkach beztlenowych GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets (20 torebek na pudelko) Torebki do systemu pojemników do hodowli w warunkach beztlenowych, ze wskaÿnikiem GasPak EZ Anaerobe Container System Sachets with Indicator (20 torebek na pude³ko) Torebki do systemu pojemników GasPak EZ Campy Container System Sachets (20 torebek na pudelko) Torebki do systemu pojemników GasPak EZ CO 2 Container System Sachets (20 torebek na pudelko) Taca do pojemników do inkubacji GasPak EZ Standard (15-18 plytek) Taca do pojemników do inkubacji GasPak EZ Large (30-33 plytek) Stojak na probówki BBL GasPak Paskowe suche wskaÿniki warunków beztlenowych BBL GasPak Dry (opakowanie 100 szt.) System BBL GasPak System do hodowli beztlenowej BBL GasPak 150 Large PISMIENNICTWO 1. Brewer, J.H. and D.L. Allgeier Disposable hydrogen generator. Science 147: Brewer, J.H. and D.L. Allgeier Safe self-contained carbon dioxide-hydrogen anaerobic system. Appl. Microbiol. 16:

4 4

5 Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland USA BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon County Clare, Ireland Tel: Fax: ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BBL, BD, BD Logo, GasPak and Stacker are trademarks of Becton, Dickinson and Company BD.