Elektroforetyczna identyfikacja enzymów amylolitycznych i fosforolitycznych w tkankach roślinnych.
|
|
- Judyta Turek
- 7 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 Elektroforetyczna identyfikacja enzymów amylolitycznych i fosforolitycznych w tkankach roślinnych. Cel ćwiczenia Ćwiczenie poświęcone jest poznaniu metody rozdzielania enzymów amylolitycznych i fosforolitycznych w żelu poliakrylamidowym oraz badania aktywności tych enzymów w warunkach natywnych na zymogramach. Wprowadzenie W celu zbadania aktywności enzymów amylolitycznych i fosforolitycznych należy po elektroforezie w warunkach natywnych przeprowadzić reakcję enzymatyczną w żelu, po której można wybarwić żele pod kątem aktywności interesującego nas enzymu czyli otrzymać zymogram. Żel stosowany do badania aktywności amylolitycznej zawiera skrobię, a stosowany do badania aktywności fosforolitycznej - glikogen. W miejscu zatrzymania się enzymu amylolitycznego powstanie jasny prążek, a tło pozostanie ciemne (barwienie negatywowe), natomiast w miejscu zatrzymania się fosforylazy pojawi się ciemny prążek na jasnym tle (barwienie pozytywowe). Wykorzystywane na ćwiczeniach substraty - skrobia oraz glikogen są polisacharydami zbudowanymi z reszt sześciowęglowego, redukującego cukru α-d-glukozy. Cząsteczki glukozy połączone są wiązaniami α-1,4- i α-1,6-glikozydowymi. Wskutek reakcji polimeryzacji glukozy, w cząsteczce skrobi dochodzi do wytworzenia jej dwóch frakcji amylozy i amylopektyny (Rys 1). Amyloza zbudowana jest z nierozgałęzionych łańcuchów połączonych wiązaniami α-1,4-glikozydowymi, podczas gdy cząsteczki amylopektyny są rozgałęzione, a rozgałęzienia w łańcuchach utworzone przez wiązania α-1,6-glikozydowe występują dość regularnie co reszt glukozy. Skrobia jest typowym materiałem zapasowym roślin. Natomiast w glikogenie magazynowanym w mięśniach i w wątrobie zwierząt nie obserwuje się 2 frakcji różniących się stopniem polimeryzacji (Rys 1). Rozgałęzienia w łańcuchach glikogenu utworzone są również przez wiązania α-1,6- glikozydowe, ale występują one częściej niż w amylopektynie, bo co reszt glukozy. Częstość występowania wiązań α-1,6-glikozydowych stanowi np. o rozpuszczalności skrobi i glikogenu skrobia po wyizolowaniu z roślin jest praktycznie nierozpuszczalna w wodzie w niskich temperaturach, glikogen zaś dość dobrze rozpuszcza się w wodzie. Rys. 1. wzory amylopektyny, amylozy i glikogenu. 1
2 Cząsteczki skrobi zależnie od ilości zawartej w nich amylozy i amylopektyny adsorbują jod na swojej powierzchni, co daje zabarwienie niebieskie lub niebieskofioletowe. Sama amyloza lub produkty częściowej degradacji skrobi, zależnie od wielkości ich cząsteczek, dają zabarwienie fioletowe (dekstryny wysokocząsteczkowe), czerwone i czerwonobrunatne (dekstryny o średniej masie cząsteczkowej). Dekstryny niskocząsteczkowe nie tworzą kompleksu z jodem. Natomiast glikogen w niskich stężeniach barwi się z jodem na kolor żółto-pomarańczowy. Skrobia i glikogen są rozkładane przez enzymy amylolityczne. Są to jedne z najwcześniej poznanych enzymów zaliczanych do klasy hydrolaz. Enzymy amylolityczne występują z racji pełnionych funkcji we wszystkich organizmach żywych. Oprócz skrobi i glikogenu hydrolizują pokrewne im oligo- i polisacharydy. Najważniejsze enzymy amylolityczne to: α-amylaza (EC ), β-amylaza (EC ) oraz glukoamylaza (EC ). Szczególnie wysoką aktywność enzymów amylolitycznych stwierdzono w kiełkujących ziarniakach zbóż (słód pszenny lub jęczmienny) oraz w bulwie ziemniaka w fazie kiełkowania. Amylazy różnego pochodzenia wykazują optimum aktywności w zakresie ph 4,5-7,0, chociaż znane są enzymy, dla których wartość ta wynosi około 10,0. Optymalna temperatura działania amylaz mieści się w granicach C, a tylko dla niektórych enzymów bakteryjnych (Bacillus licheniformis) jest bardzo wysoka (około 100 C). Amylazy katalizują hydrolizę głównie wiązań α-1,4-glikozydowych w cząsteczkach substratu (Rys 2), w wyniku czego zanika kompleks, jaki tworzy z jodem substrat przed hydrolizą. Zjawisko to zostanie wykorzystane do lokalizacji pasm aktywności amylaz na zymogramie. Rys. 2. Działanie amylaz na amylopektynę: α-amylaza hydrolizuje wiązania glikozydowe wewnątrz cząsteczki polisacharydu, β-amylaza uwalnia β-maltozę, a glukoamylaza β-dglukozę od nieredukującego końca cząsteczki. Zymografia służy nie tylko badaniu aktywności enzymów hydrolitycznych. Metodę tę stosuje się do identyfikacji innych enzymów pod warunkiem, że ubytek substratu lub przyrost produktu można uwidocznić w postaci wyróżniających się z tła prążków. Tak jest na przykład przy badaniu aktywności fosforylaz polisacharydów. Fosforylaza skrobiowa należy do klasy transferaz (EC ), katalizuje odwracalną reakcję przeniesienia reszty glukozy z 2
3 nieredukującego końca oligo- lub polisacharydu na fosforan (Rys. 3). W wyniku tej reakcji powstaje o jedną resztę glukozy krótszy polisacharyd oraz glukozo-1-fosforan. Fosforylaza skrobiowa podobnie jak zwierzęca fosforylaza glikogenowa współdziała z fosforanem pirydoksalu (PLP) jako koenzymem. Fosforylazy różnego pochodzenia wykazują optimum aktywności w zakresie ph 6,5-8,0. Optymalna temperatura działania fosforylaz mieści się w granicach C. Fosforylazy roślinne mogą wykorzystywać także glikogen jako substrat i katalizować reakcje zarówno fosforolizy jak i dodawania reszt glukozy do cząsteczki glikogenu. U roślin fosforylazy znajdują się w plastydach oraz w cytoplazmie. Te izoenzymy różnią się nie tylko lokalizacją w komórce, ale również powinowactwem do substratów. Izoenzym cytoplazmatyczny ma silne powinowactwo do skrobi i glikogenu, a izoenzym plastydowy chętniej wykorzystuje oligosacharydy niż skrobię. Rys 3. Reakcja katalizowana przez fosforylazę skrobiową z glikogenem jako substratem. W wyniku dodawania przez fosforylazę reszt glukozo-1-fosforanu do cząsteczek skrobi lub glikogenu powstają dłuższe polimery jednak nie rozgałęzione, ponieważ fosforylazy nie mają zdolności wytwarzania rozgałęzień w polisacharydzie. Takie wydłużone łańcuchy np. glikogenu wykazują ciemnoniebieską barwę z jodem, inną niż niezmodyfikowany substrat. Można to wykorzystać przy badaniu aktywność fosforylazy w żelu po elektroforezie. Jest to lepszy sposób wizualizacji aktywności fosforylazy na zymogramie, niż przy użyciu skrobi jako substratu, która z jodem tworzy niebieskofioletowy kompleks. Hydroliza skrobi i jej rozkład fosforolityczny nie przebiegają równocześnie w komórkach. Rozkład hydrolityczny ma największe znaczenie dla degradacji skrobi asymilacyjnej w chloroplastach, jak również podczas rozkładu skrobi zapasowej w trakcie kiełkowania nasion czy też bulw ziemniaka. Fosforoliza natomiast, przeważa w warunkach niekorzystnych dla wzrostu roślin, jakimi są zasolenie, chłód, susza. Odczynniki 1. Bufor ekstrakcyjny: 50 mm jabłczan ph 5,4, zawierający 2,5 mm CaCl 2 50 mm NaCl, i 0,005% azydek sodu. 2. Gotowy do użycia 40% w/o roztwór mieszaniny akryloamidu N,N-metyleno-bisakryloamidu w proporcji odpowiednio 37,5: ,5% roztwór skrobi (w/o) 4. 1% roztwór glikogenu (w/o) 5. 0,2 M bufor Tris-Gly ph 9,1 6. TEMED N,N,N,N -tertrametyloetylenodiamina 7. APS (nadsiarczan amonowy) - 10% roztwór w/o 8. Woda dejonizowana 9. Bufor rozwijający - 0,05 M bufor Tris-Gly ph 9, ,05% błękit bromofenolowy w 0,05 M buforze Tris-Gly ph 9,1 11. Glicerol 3
4 12. 0,006% roztwór jodu w jodku potasu roztwór podstawowy do barwienia żeli na aktywność fosforylaz oraz 10-krotnie rozcieńczony jego roztwór do barwienia żeli na aktywność amylaz 13. 0,2 M bufor cytrynianowy o ph 6,5, zawierający 10 mm glukozo-1-fosforan. Wykonanie Przygotowanie aparatu i żelu Do wszystkich prac zaleca się stosowanie rękawiczek jednorazowych. Aparat do elektroforezy (np. wyprodukowany przez Firmę Bio-Rad) przygotować zgodnie z zaleceniami prowadzącego ćwiczenia, zwykle należy upewnić się czy mamy do dyspozycji wszystkie ruchome elementy aparatu oraz odtłuścić szybki przy pomocy stężonego etanolu lub acetonu. Kolejnym etapem jest złożenie szybek w statywie, aby powstały komory do wylania płytek z żelem poliakryloamidowym (PA) zawierającym substrat (skrobię enzymy amylolityczne lub glikogen - fosforylazy). Przygotowanie żelu rozdzielającego z substratem Enzymy amylolityczne (7% PA z 0,05% skrobią): do czystej probówki typu Falcon lub zlewki o objętości ml odmierzyć następujące odczynniki (objętość całkowita wynosić będzie 9,0 ml): 1,6 ml 40% roztworu mieszaniny akryloamidu i bisakryloamidu, 2,25 ml 0,2M buforu Tris-Gly (ph 9,1), 0,9 ml 0,5% roztworu skrobi rozpuszczalnej, 4,65 ml wody dejonizowanej. Składniki te dobrze razem wymieszać, przygotować pipetę do nakładania żelu wyskalowaną na 3,2 ml z czystą końcówką. Następnie dodać 10 µl TEMEDu oraz 80µl 10% nadsiarczanu amonu (APS), wszystkie składniki szybko wymieszać i przenieść do komór formujących żel 2x po 3,2 ml. Na koniec, na wylane między szybkami żele nawarstwić 0,5 ml dejonizowanej wody w celu odcięcia dopływu powietrza i pozostawić bez ruchu na 45 minut, możliwie nie narażając polimeryzujących żeli na szybkie zmiany temperatur (np. otwarte okno). Enzymy fosforolityczne (7% PA z 0,1% glikogenem): do czystej probówki typu Falcon lub zlewki o objętości ml odmierzyć następujące odczynniki (objętość całkowita wynosić będzie 9,0 ml): 1,6 ml 40% roztworu mieszaniny akryloamidu i bisakryloamidu, 2,25 ml 0,2M buforu Tris-Gly (ph 9,1), 0,9 ml 1% roztworu glikogenu, 4,65 ml wody dejonizowanej. Składniki te dobrze razem wymieszać, przygotować pipetę do nakładania żelu wyskalowaną na 3,2 ml z czysta końcówką. Następnie dodać 10 µl TEMED`u oraz 80µl 10% nadsiarczanu amonu (APS), wszystkie składniki szybko wymieszać i przenieść do komór formujących żel 2x po 3,2 ml. Na koniec, na wylane między szybkami żele nawarstwić 0,5 ml dejonizowanej wody w celu odcięcia dopływu powietrza i pozostawić bez ruchu, możliwie nie narażając polimeryzujących żeli na szybkie zmiany temperatur (np. otwarte okno), na 45 minut. Przygotowanie 4% żelu zagęszczającego (na dwie płytki) Po spolimeryzowaniu żelu rozdzielającego, zlać ostrożnie nawarstwioną wcześniej wodę do zlewu przechylając ostrożnie zablokowane w statywie komory do formowania żelu (wcześniej przechylić delikatnie żeby przekonać się, czy zaszła polimeryzacja). Do komór włożyć pod kątem ok stopni grzebienie, tak aby po wlaniu żelu można było łatwo wcisnąć je do komory czynność tą przećwiczyć na sucho. Następnie do czystej probówki typu Falcon lub zlewki o objętości ml odmierzyć następujące odczynniki (objętość całkowita wynosić będzie 10,0 ml): 1,0 ml 40% roztworu mieszaniny akryloamidu i bisakryloamidu, 2,5 ml 0,2 M buforu Tris-Gly (ph 9,1), 6,39 ml wody dejonizowanej. 4
5 Składniki te dobrze razem wymieszać, przygotować pipetę wyskalowaną np. na 4,0 ml z czysta końcówką. Następnie dodać 10 µl TEMED`u oraz 100 µl 10% nadsiarczanu amonu. Wszystkie składniki szybko wymieszać i nanieść na żel rozdzielający poniżej 1-2 mm górnej krawędzi niższej płytki. Płynnie wcisnąć grzebień, począwszy od końca niżej zanurzonego w żelu, tak aby pod krawędziami grzebienia nie zebrały się pęcherzyki powietrza, nadmiar żelu powinien wypłynąć z komory. Tak przygotowane płytki pozostawić do polimeryzacji. Otrzymywanie ekstraktu z preparatów roślinnych lub mąki a. Rozetrzeć w moździerzu 0,75 g drobno pociętej bulwy ziemniaka, a następnie zawiesić w 3 ml buforu ekstrakcyjnego. Uzyskany homogenat przenieść do 2 probówek Eppendorfa (po 1,5 ml homogenatu), wirować przez 5 min przy 10 tys. obrotów/min w 4 C. Uzyskany po wirowaniu supernatant przenieść pipetą do czystej probówki Eppendorfa, opisać i pozostawić w łaźni z lodem lub w lodówce do czasu naniesienia na przygotowany żel. b. Ekstrakty z liści groszku zielonego lub kukurydzy przygotować analogicznie jak z bulwy ziemniaka. c. Odważyć 0,05 g wzorcowej mąki, naważkę przenieść do probówki typu Falcon dodać 10 ml buforu ekstrakcyjnego, wytrząsać przez 10 sekund, następnie pozostawić do sedymentacji. Czynność tą powtórzyć w ciągu 15 minut 5-krotnie. Część zawiesiny odwirować w 2 probówkach na 1,5 ml i postąpić dalej jak w pkt a. Rozdział elektroforetyczny ekstraktów Upewniwszy się że nastąpiła polimeryzacja żelu wyciągnąć grzebienie, na podstawie wskazówek prowadzącego ćwiczenia umieścić płytki z żelem w aparacie do elektroforezy (zaznaczyć która płytka zawiera skrobię, a która glikogen). Następnie przepłukać studzienki buforem rozwijającym i wlać bufor do odpowiedniego poziomu w komorze aparatu do elektroforezy. Przed naniesieniem na żel zmieszać uzyskany ekstrakt z glicerolem w proporcji 9:1 np. 450 µl ekstraktu i 50 µl glicerolu (otrzymując 10% o/o stężenie glicerolu), co ułatwi nanoszenie prób do studzienek, do jednej studzienki bez ekstraktu, dodać roztwór błękitu bromofenolowego o stężeniu 0,05%. Nanieść do studzienek różne ilości uzyskanych ekstraktów (wg wskazówek prowadzącego np. 5 i 40 µl). Aparat do elektroforezy wstawić do pojemnika z buforem rozwijającym i umieścić ostrożnie w pudełku styropianowym wypełnionym lodem lub wstawić do lodówki. Elektroforezę prowadzić przy stałym napięciu 150V do momentu całkowitego wyjścia barwnika z żelu. Wykrywanie aktywności enzymów amylolitycznych i fosforolitycznych Na podstawie wskazówek prowadzącego ćwiczenia wyjąć płytki z żelem, rozdzielić szybki, przy pomocy szerokiej łopatki odkleić żel od szybki i przenieść na szalkę Petriego. Nie oddzielać żelu zagęszczającego od żelu rozdzielającego. Żel zawierający glikogen (wykrywanie aktywności fosforylaz w kierunku syntezy polisacharydu) po przepłukaniu dwukrotnym wodą destylowaną umieścić w 50 ml 0,2 M buforu cytrynianowego o ph 6,5, zawierającego 10 mm glukozo-1-fosforan na minut w temperaturze pokojowej. Po tym czasie bufor zlać, żel przepłukać wodą destylowaną i przenieść do wcześniej przygotowanego roztworu jodu w jodku potasu. Żel barwić do momentu uzyskania kontrastu (ok. 10 sekund). Po tym czasie roztwór barwiący jodu w jodku potasu zlać. Tło powinno być lekko żółte, miejsca gdzie znajdują się fosforylazy 5
6 ciemnoniebieskie. Żel przepłukać wodą destylowaną i obejrzeć na transiluminatorze, sfotografować. Żel zawierający skrobię (wykrywanie aktywności amylolitycznej) po przepłukaniu dwukrotnym wodą destylowaną umieścić w 50 ml 0,2 M buforu octanowego o ph 4,5 na minut w temperaturze pokojowej. Po tym czasie bufor zlać, żel przepłukać wodą destylowaną i przenieść do wcześniej przygotowanego roztworu jodu w jodku potasu. Żel barwić do momentu uzyskania kontrastu (ok. 10 sekund). Tło powinno być ciemne, miejsca aktywności amylaz- bezbarwne. Po tym czasie roztwór barwiący jodu w jodku potasu zlać, żel przepłukać wodą destylowaną i obejrzeć na transiluminatorze, ewentualnie sfotografować. Opracowanie wyników Na podstawie analizy zymogramu porównać aktywności enzymatyczne badanych ekstraktów, wskazać liczbę izoform amylaz lub fosforylaz zidentyfikowanych na podstawie różnej mobilności w polu elektrycznym. Sprawdzić czy intensywność prążków obrazujących aktywność enzymów jest proporcjonalna do ilości naniesionych ekstraktów. Literatura. 1. Albrecht T., Greve B., Pusch K., Kossmann J., Buchner P., Wobus U., Steup M. (1998) Homodimers and heterodimers of Pho1-type phosphorylase isoforms in Solanum tuberosum L. as revealed by sequence-specific antibodies. Eur J Biochem. 251: Alpha-amylase assay procedure (Ceraplha Method) for measurement of plant and microbial alpha-amylases Megazyme International Ireland Brust H, Orzechowski S, Fettke J., Steup M. (2013) Starch synthesizing reactions and paths: in vitro and in vivo studies. J. Appl. Glycosci. 60: Orzechowski S. (2008) Starch metabolism in leaves. Acta Biochm. Pol, 55: Weise S.E., Schrader S.M., Kleinbeck K.R., Sharkey T.D. (2006) Carbon balance and circadian regulation of hydrolytic and phosphorolytic breakdown of transitory starch. Plant Physiol 141:
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Farmacja 2016
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Farmacja 2016 Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa farmacjamolekularna@wum.edu.pl
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa Ćwiczenie 3 Izolacja i rozdział
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska Oznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną ĆWICZENIE 5 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI -AMYLAZY SŁODU METODĄ KOLORYMETRYCZNĄ Enzymy
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności enzymów amylolitycznych.
Oznaczanie aktywności enzymów amylolitycznych. Zajęcia 3 godzinne część A, zajęcia 4 godzinne część A i B. Cel ćwiczenia Ćwiczenie poświęcone jest zapoznaniu się z metodami oznaczania aktywności enzymów
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa tel. 22 572 0735, 606448502
Bardziej szczegółowoWpływ ph i temperatury na aktywność enzymów na przykładzie α-amylazy [EC ]
Wpływ ph i temperatury na aktywność enzymów na przykładzie α-amylazy [EC 3.2.1.1.] Szybkość katalizowanej przez enzym przemiany danego substratu w określony produkt jest ściśle uzależniona od stężenia
Bardziej szczegółowoOtrzymany w pkt. 8 osad, zawieszony w 2 ml wody destylowanej rozpipetować do 4 szklanych probówek po ok. 0.5 ml do każdej.
Kwasy nukleinowe izolacja DNA, wykrywanie składników. Wymagane zagadnienia teoretyczne 1. Struktura, synteza i degradacja nukleotydów purynowych i pirymidynowych. 2. Regulacja syntezy nukleotydów. Podstawowe
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE II. PRZYGOTOWANIE ŻELU POLIAKRYLAMIDOWEGO DO ELEKTROFOREZY BIAŁEK W WARUNKACH DENATURUJĄCYCH (SDS-PAGE)
ĆWICZENIE II. ELEKTROFOREZA W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM (ANG. POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS - PAGE) PRZYGOTOWANIE ŻELU POLIAKRYLAMIDOWEGO DO ELEKTROFOREZY BIAŁEK W WARUNKACH DENATURUJĄCYCH (SDS-PAGE)
Bardziej szczegółowoIlościowe oznaczenie glikogenu oraz badanie niektórych jego właściwości
Ilościowe oznaczenie glikogenu oraz badanie niektórych jego właściwości Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia jest zapoznanie się z podstawową wiedzą dotyczącą budowy, funkcji i właściwości glikogenu jak również
Bardziej szczegółowoPróba kontrolna (PK) 1000 l 1000 l
Ćwiczenie 10. A. Oznaczanie stężenia bilirubiny całkowitej w surowicy krwi. Wymagane zagadnienia teoretyczne 1. Biosynteza hemu - metabolity pośrednie syntezy hemu. 2. Katabolizm hemu - powstawanie barwników
Bardziej szczegółowoENZYMOLOGIA. Ćwiczenie 4. α-amylaza (cz. I) Oznaczanie aktywności enzymu metodą kolorymetryczną
ENZYMOLOGIA Wydział Nauk o Żywności i Rybactwa Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych ul. Klemensa Janickiego 35 71-270 Szczecin Ćwiczenie 4 α-amylaza (cz. I) Oznaczanie aktywności
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa IZOLACJA DNA Z HODOWLI KOMÓRKOWEJ.
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 3. Cukry mono i disacharydy
ĆWICZENIE 3 Cukry mono i disacharydy Reakcja ogólna na węglowodany (Reakcja Molischa) 1 ml 1% roztworu glukozy 1 ml 1% roztworu fruktozy 1 ml 1% roztworu sacharozy 1 ml 1% roztworu skrobi 1 ml wody destylowanej
Bardziej szczegółowoCz. XXVIII - c Węglowodany - cukry - sacharydy: disacharydy i polisacharydy
Cz. XXVIII - c Węglowodany - cukry - sacharydy: disacharydy i polisacharydy I. Budowa i właściwości disacharydów Wiązanie między monosacharydami powstaje z udziałem dwóch grup hydroksylowych pochodzących
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 5 Barwniki roślinne. Ekstrakcja barwników asymilacyjnych. Rozpuszczalność chlorofilu
ĆWICZENIE 5 Barwniki roślinne Ekstrakcja barwników asymilacyjnych 400 mg - zhomogenizowany w ciekłym azocie proszek z natki pietruszki 6 ml - etanol 96% 2x probówki plastikowe typu Falcon na 15 ml 5x probówki
Bardziej szczegółowoKINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie z wytworzeniem -D-glukozy i -D-fruktozy. Jest to reakcja
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności enzymów
Oznaczanie aktywności enzymów Instrukcja do zajęć laboratoryjnych z przedmiotu Biotechnologia Enzymatyczna Prowadzący: mgr inż. Anna Byczek CEL ĆWICZENIA Celem ćwiczenia jest oznaczanie aktywności enzymu
Bardziej szczegółowoELEKTROFORETYCZNY ROZDZIAŁ
POLITECHNIKA ŁÓDZKA INSTRUKCJA Z LABORATORIUM W ZAKŁADZIE BIOFIZYKI Ćwiczenie 2 ELEKTROFORETYCZNY ROZDZIAŁ BIAŁEK I. WSTĘP TEORETYCZNY Elektroforeza jest ruchem fazy rozproszonej względem fazy rozpraszanej,
Bardziej szczegółowoWydział Chemiczny Politechniki Gdańskiej Katedra Technologii Leków i Biochemii
Wydział Chemiczny Politechniki Gdańskiej Katedra Technologii Leków i Biochemii Badanie wpływu temperatury, ph, aktywatorów i inhibitorów na aktywność α-amylazy Wstęp Szybkość reakcji enzymatycznej jest
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 4. Identyfikacja wybranych cukrów w oparciu o niektóre reakcje charakterystyczne
Klasyczna Analiza Jakościowa Organiczna, Ćw. 4 - Identyfikacja wybranych cukrów Ćwiczenie 4 Identyfikacja wybranych cukrów w oparciu o niektóre reakcje charakterystyczne Zagadnienia teoretyczne: 1. Budowa
Bardziej szczegółowoMetody badania ekspresji genów
Metody badania ekspresji genów dr Katarzyna Knapczyk-Stwora Warunki wstępne: Proszę zapoznać się z tematem Metody badania ekspresji genów zamieszczonym w skrypcie pod reakcją A. Lityńskiej i M. Lewandowskiego
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 4 i 21 (skrypt) ćwiczenie laboratoryjne nr 3 dla e-rolnictwa
Ćwiczenie 4 i 21 (skrypt) ćwiczenie laboratoryjne nr 3 dla e-rolnictwa Właściwości i budowa węglowodanów. Sacharydy są podstawową i bardzo zróżnicowaną grupą związków naturalnych występujących we wszystkich
Bardziej szczegółowoCukry - czy każdy cukier jest słodki? Wykrywanie skrobi.
1 Cukry - czy każdy cukier jest słodki? Wykrywanie skrobi. Czas trwania zajęć: 45 minut Pojęcia kluczowe: - skrobia, - wielocukier, - glukoza, - rośliny Hipoteza sformułowana przez uczniów: 1. Istnieją
Bardziej szczegółowoCukry właściwości i funkcje
Cukry właściwości i funkcje Miejsce cukrów wśród innych składników chemicznych Cukry Z cukrem mamy do czynienia bardzo często - kiedy sięgamy po białe kryształy z cukiernicy. Większość z nas nie uświadamia
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 5 MECHANIZMY PROMUJĄCE WZROST ROŚLIN
ĆWICZENIE 5 MECHANIZMY PROMUJĄCE WZROST ROŚLIN CZĘŚĆ TEORETYCZNA Mechanizmy promujące wzrost rośli (PGP) Metody badań PGP CZĘŚĆ PRAKTYCZNA 1. Mechanizmy promujące wzrost roślin. Odczyt. a) Wytwarzanie
Bardziej szczegółowoBłonnik pokarmowy: właściwości, skład, występowanie w żywności
Błonnik pokarmowy: właściwości, skład, występowanie w żywności Dr hab. Jarosława Rutkowska, prof. nadzwycz. SGGW Zakład Analiz Instrumentalnych Wydział Nauk o Żywieniu Człowieka i Konsumpcji, SGGW w Warszawie
Bardziej szczegółowodata ĆWICZENIE 12 BIOCHEMIA MOCZU Doświadczenie 1
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 12 BIOCHEMIA MOCZU Doświadczenie 1 Cel: Wyznaczanie klirensu endogennej kreatyniny. Miarą zdolności nerek do usuwania i wydalania
Bardziej szczegółowoLaboratorium 3 Toksykologia żywności
Laboratorium 3 Toksykologia żywności Literatura zalecana: Orzeł D., Biernat J. (red.) 2012. Wybrane zagadnienia z toksykologii żywności. Wydawnictwo Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu. Wrocław. Str.:
Bardziej szczegółowoELEKTROFOREZA BIAŁEK W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM W WARUNKACH DENATURUJĄCYCH
ELEKTROFOREZA BIAŁEK W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM W WARUNKACH DENATURUJĄCYCH WPROWADZENIE Elektroforeza od ponad 60 lat pozostaje najczęściej stosowaną metodą izolacji makrocząstek w układach biologicznych
Bardziej szczegółowoBadanie termostabilności oraz wpływu aktywatorów i inhibitorów na działanie α-amylazy [EC ]
Badanie termostabilności oraz wpływu aktywatorów i inhibitorów na działanie α-amylazy [EC 3.2.1.1.] Termostabilność enzymów Dla większości enzymów zmiany denaturacyjne zachodzą bardzo intensywnie powyżej
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 3 DGGE- ELEKTROFOREZA W ŻELU Z GRADIENTEM CZYNNIKA DENATURUJĄCEGO
ĆWICZENIE 3 DGGE- ELEKTROFOREZA W ŻELU Z GRADIENTEM CZYNNIKA DENATURUJĄCEGO CZĘŚĆ TEORETYCZNA Metody badań i cechy w oparciu o które przeprowadzana jest klasyfikacja i identyfikacja mikroorganizmówh Struktura
Bardziej szczegółowo1.1 Reakcja trójchlorkiem antymonu
ĆWICZENIE IV - WYKRYWANIE WITAMIN Odczynniki: - chloroform bezwodny, - bezwodnik kwasu octowego, - trójchlorek antymonu roztwór nasycony w chloroformie, - 1,3-dichlorohydryna gliceryny - żelazicyjanek
Bardziej szczegółowoENZYMOLOGIA. Ćwiczenie 5. α-amylaza (cz. II) Enzymatyczna hydroliza skrobi. Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych
ENZYMOLOGIA Wydział Nauk o Żywności i Rybactwa Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych ul. Klemensa Janickiego 35 71-270 Szczecin Ćwiczenie 5 α-amylaza (cz. II) Enzymatyczna
Bardziej szczegółowoWłaściwości kinetyczne fosfatazy kwaśnej z ziemniaka
Właściwości kinetyczne fosfatazy kwaśnej z ziemniaka Celem ćwiczenia jest zapoznanie się metodyką wyznaczania szybkości reakcji Vmax oraz stałej Michaelisa Menten dla fosfatazy kwaśnej z ziemniaka WPROWADZENIE
Bardziej szczegółowoMultipol Standard. Aparat do jednoczesnego wylewania do 6 żeli poliakrylamidowych. Instrukcja Obsługi. Numer katalogowy:
Multipol Standard Aparat do jednoczesnego wylewania do 6 żeli poliakrylamidowych Instrukcja Obsługi Numer katalogowy: 101-150 Aby uzys k ać pomoc techniczną : T 22 668 71 47 Spis treści 1. Informacje ogólne
Bardziej szczegółowoKINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA)
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA) ĆWICZENIE PRAKTYCZNE I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie
Bardziej szczegółowobi ~ Zestaw dydal<tyczny umożliwiający przeprowadzenie izolacji genomowego DNA z bakterii EasyLation Genomie DNA INSTRUI<CJA DLA STUDENTÓW
Zestaw dydaktyczny EasyLation Genomie DNA Nr kat. DY80 Wersja zestawu: 1.2014 Zestaw dydal
Bardziej szczegółowo1. Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej i jej zależności od stężenia enzymu oraz żółci jako modulatora reakcji enzymatycznej.
ĆWICZENIE OZNACZANIE AKTYWNOŚCI LIPAZY TRZUSTKOWEJ I JEJ ZALEŻNOŚCI OD STĘŻENIA ENZYMU ORAZ ŻÓŁCI JAKO MODULATORA REAKCJI ENZYMATYCZNEJ. INHIBICJA KOMPETYCYJNA DEHYDROGENAZY BURSZTYNIANOWEJ. 1. Oznaczanie
Bardziej szczegółowodata ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ Amidohydrolazy (E.C.3.5.1 oraz E.C.3.5.2) są enzymami z grupy hydrolaz o szerokim powinowactwie
Bardziej szczegółowoMECHANIZMY REAKCJI CHEMICZNYCH. REAKCJE CHARAKTERYSTYCZNE GRUP FUNKCYJNYCH ZWIĄZKÓW ORGANICZNYCH
Ćwiczenie 2 semestr 2 MECHANIZMY REAKCJI CHEMICZNYCH. REAKCJE CHARAKTERYSTYCZNE GRUP FUNKCYJNYCH ZWIĄZKÓW ORGANICZNYCH Obowiązujące zagadnienia: Związki organiczne klasyfikacja, grupy funkcyjne, reakcje
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY)
Ćwiczenie 8 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY) Część doświadczalna obejmuje: - sączenie Ŝelowe ekstraktu uzyskanego z bielma niedojrzałych nasion kukurydzy - oznaczanie aktywności
Bardziej szczegółowoPiotr Chojnacki 1. Cel: Celem ćwiczenia jest wykrycie jonu Cl -- za pomocą reakcji charakterystycznych.
SPRAWOZDANIE: REAKCJE CHARAKTERYSTYCZNE WYBRANYCH ANIONÓW. Imię Nazwisko Klasa Data Uwagi prowadzącego 1.Wykrywanie obecności jonu chlorkowego Cl - : Cel: Celem ćwiczenia jest wykrycie jonu Cl -- za pomocą
Bardziej szczegółowoOznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej.
Oznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej. Zajęcia 3 godzinne w parach, zajęcia 4 godzinne indywidualnie. Cel ćwiczenia Ćwiczenie ma na celu zapoznanie się z metodą oznaczenia aktywności aminotransferazy
Bardziej szczegółowoWyznaczanie krzywej progresji reakcji i obliczenie szybkości początkowej reakcji katalizowanej przez β-fruktofuranozydazy
Wyznaczanie krzywej progresji reakcji i obliczenie szybkości początkowej reakcji katalizowanej przez β-fruktofuranozydazy W organizmach żywych reakcje chemiczne rzadko zachodzą w nieobecności katalizatora.
Bardziej szczegółowoPlan ćwiczeń wykonywanych w ramach Pracowni Biologii Molekularnej, część II Ekspresja i oczyszczanie białek.
Pracownia Biologii Molekularnej Część II Plan ćwiczeń wykonywanych w ramach Pracowni Biologii Molekularnej, część II Ekspresja i oczyszczanie białek. Spis treści 1 I spotkanie: Ekspresja białka w komórkach
Bardziej szczegółowoProtokół: Reakcje charakterystyczne cukrowców
Protokół: Reakcje charakterystyczne cukrowców 1. Rekcja na obecność cukrów: próba Molischa z -naftolem Jest to najbardziej ogólna reakcja na cukrowce, tak wolne jak i związane. Ujemny jej wynik wyklucza
Bardziej szczegółowoLaboratorium 8. Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych
Laboratorium 8 Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych Literatura zalecana: Jakubowska A., Ocena toksyczności wybranych cieczy jonowych. Rozprawa doktorska, str. 28 31.
Bardziej szczegółowoPolisacharydy skrobia i celuloza
Polisacharydy skrobia i celuloza 1. Cele lekcji a) Wiadomości Uczeń zna: podział cukrów, właściwości fizyczne skrobi i celulozy, reakcję charakterystyczną służącą do identyfikacji skrobi. b) Umiejętności
Bardziej szczegółowoOtrzymywanie 1-fosforanu α-d-glukopiranozy przez fosforolizę skrobi
Katedra Chemii rganicznej, Bioorganicznej i Biotechnologii trzymywanie 1-fosforanu α-d-glukopiranozy przez fosforolizę skrobi Prowadzący: Miejsce ćwiczeń: sala 102 mgr inż. Marta Grec 1. Cel ćwiczenia
Bardziej szczegółowoSCENARIUSZ ZAJĘĆ SZKOLNEGO KOŁA NAUKOWEGO Z PRZEDMIOTU BIOLOGIA PROWADZONEGO W RAMACH PROJEKTU AKADEMIA UCZNIOWSKA
SCENARIUSZ ZAJĘĆ SZKOLNEGO KOŁA NAUKOWEGO Z PRZEDMIOTU BIOLOGIA PROWADZONEGO W RAMACH PROJEKTU AKADEMIA UCZNIOWSKA Temat lekcji Jaki wpływ na skrobię ma ślina i proszek do prania? Na podstawie pracy uczniów
Bardziej szczegółowoWykazanie obecności oksydoreduktaz w materiale biologicznym
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska Wykazanie obecności oksydoreduktaz w materiale biologicznym ĆWICZENIE 9 ZADANIE 1 OTRZYMYWANIE PREPARATU ENZYMATYCZNEGO 1. Umyty ziemniak utrzeć
Bardziej szczegółowoSPRAWOZDANIE Z ĆWICZEŃ Z HIGIENY, TOKSYKOLOGII I BEZPIECZEŃSTWA ŻYWNOŚCI
Data.. Imię, nazwisko, kierunek, grupa SPRAWOZDANIE Z ĆWICZEŃ Z HIGIENY, TOKSYKOLOGII I BEZPIECZEŃSTWA ŻYWNOŚCI OCENA JAKOŚCI WODY DO PICIA Ćwiczenie 1. Badanie właściwości fizykochemicznych wody Ćwiczenie
Bardziej szczegółowoEnzymatyczna hydroliza skrobi do produktów małocząsteczkowych
Enzymatyczna hydroliza skrobi do produktów małocząsteczkowych Instrukcja do zajęć laboratoryjnych z przedmiotu Chemia Bioorganiczna i Bionieorganiczna Dla studentów kierunku Chemia specjalność Chemia Bioorganiczna
Bardziej szczegółowoWYŻEJ OPISANA CZĘŚĆ DOŚWIADCZENIA JEST PRZYGOTOWANA EOZYNA ŻÓŁTAWA
ĆWICZENIE 6 Gospodarka wodna Szybkość dyfuzji barwników organicznych w żelatynie Materiał: a/ odczynniki: 20 % roztwór żelatyny, tusz, 1-2 mm roztwory eozyny żółtawej, błękitu metylenowego, oranżu metylowego
Bardziej szczegółowoPRZYKŁADOWE ZADANIA WĘGLOWODANY
PRZYKŁADOWE ZADANIA WĘGLOWODANY Zadanie 1216 (2 pkt) Przeczytaj poniższy tekst i zapisz poniżej nazwy cukrów X i Y, o których mowa. Kwasy nukleinowe są długimi łańcuchami poliestrowymi, zbudowanymi z połączonych
Bardziej szczegółowoNa tej pracowni wyjątkowo odpowiedzi na zadania należy udzielić na osobnym arkuszu odpowiedzi.
Pracownia biochemiczna arkusz zadań Czas: 90 min. Łączna liczba punktów do zdobycia: 30 Na tej pracowni wyjątkowo odpowiedzi na zadania należy udzielić na osobnym arkuszu odpowiedzi. Drodzy uczestnicy!
Bardziej szczegółowoOTRZYMYWANIE EMULSJI I BADANIE ICH WŁAŚCIWOŚCI
OTRZYMYWANIE EMULSJI I BADANIE ICH WŁAŚCIWOŚCI Odczynniki: wosk pszczeli (4 g) olej parafinowy (9 cm 3 i 6 cm 3 ) oliwa z oliwek (5,5 cm 3 ) boraks (Na 2 B 4 O 7 10H 2 O) (0,2 g) olejek zapachowy (lawendowy
Bardziej szczegółowoWykrywanie obecności enzymów.
ĆWICZENIE 5 Wykrywanie obecności enzymów. Prowadzący: mgr inż. Jadwiga ZAWISZA Miejsce ćwiczenia: sala 104 CEL ĆWICZENIA Celem ćwiczenia jest praktyczne poznanie enzymów z klasy oksydoreduktaz. PODSTAWY
Bardziej szczegółowoGel-Out. 50 izolacji, 250 izolacji. Nr kat , Zestaw do izolacji DNA z żelu agarozowego. wersja 0617
Gel-Out Zestaw do izolacji DNA z żelu agarozowego. wersja 0617 50 izolacji, 250 izolacji Nr kat. 023-50, 023-250 Pojemność kolumny do izolacji DNA - do 20 µg DNA, minimalna pojemność - 2 µg DNA (przy zawartości
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 3: CHROMATOGRAFIA PLANARNA
ĆWICZENIE 3: CHROMATOGRAFIA PLANARNA Chromatografia jest to metoda chemicznej analizy instrumentalnej, w której dokonuje się podziału substancji (w przeciwprądzie) między fazę nieruchomą i fazę ruchomą.
Bardziej szczegółowoCEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową procedurą odsalania oczyszczanych preparatów enzymatycznych w procesie klasycznej filtracji żelowej.
LABORATORIUM 3 Filtracja żelowa preparatu oksydazy polifenolowej (PPO) oczyszczanego w procesie wysalania siarczanem amonu z wykorzystaniem złoża Sephadex G-50 CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową
Bardziej szczegółowo46 Olimpiada Biologiczna
46 Olimpiada Biologiczna Pracownia biochemiczna Radosław Mazur 22 kwietnia 2017 r. Biochemia Czas: 90 min. Łączna liczba punktów do zdobycia: 35 Na tej pracowni wyjątkowo odpowiedzi na zadania należy udzielić
Bardziej szczegółowo6. Wykorzystanie tyrozynazy otrzymywanej z pieczarki dwuzarodnikowej (Agaricus Bisporus) do produkcji L-DOPA
6. Wykorzystanie tyrozynazy otrzymywanej z pieczarki dwuzarodnikowej (Agaricus Bisporus) do produkcji L-DOPA L-DOPA (L-3,4-dihydroksyfenyloalanina) jest naturalnym prekursorem dopaminy, jednego z najważniejszych
Bardziej szczegółowoANALIZA PORÓWNAWCZA IZOFORM PEROKSYDAZY W KOLE- OPTYLACH OWSA METOD
ANALIZA PORÓWNAWCZA IZOFORM PEROKSYDAZY W KOLE- OPTYLACH OWSA METODĄ ELEKTROFOREZY W śelu POLIAKRYLOAMIDOWYM. WYBARWIANIE ROZDZIELONYCH BIAŁEK COOMASSIE BRILLANT BLUE-G250 WSTĘP Powstawanie nadtlenku wodoru
Bardziej szczegółowoG-VII. Substancje o znaczeniu biologicznym
G-VII. Substancje o znaczeniu biologicznym Odczynnik Postać Piktogram GHS Hasło Zwroty H HCl roztwór 5% UWAGA H315, H319, H335 HNO 3 H 2 SO 4 stężony stężony NaOH roztwór 5% H314, EUH071 H314 H314 CuSO
Bardziej szczegółowo3b 2. przedstawione na poniższych schematach. Uzupełnij obserwacje i wnioski z nich wynikające oraz równanie zachodzącej reakcji.
3b 2 PAWEŁ ZYCH IMIĘ I NAZWISKO: KLASA: GRUPA A 1. W celu zbadania właściwości sacharozy wykonano dwa doświadczenia, które zostały przedstawione na poniższych schematach. Uzupełnij obserwacje i wnioski
Bardziej szczegółowoCHROMATOGRAFIA ADSORPCYJNA I PODZIAŁOWA. 1. Rozdział barwników roślinnych metodą chromatografii adsorpcyjnej (techniką kolumnową)
Ćwiczenie nr 7 CHROMATOGRAFIA ADSORPCYJNA I PODZIAŁOWA 1. Rozdział barwników roślinnych metodą chromatografii adsorpcyjnej (techniką kolumnową) Zasada: Barwniki roślinne charakteryzują się różnym powinowactwem
Bardziej szczegółowoAmpliTest Babesia spp. (PCR)
AmpliTest Babesia spp. (PCR) Zestaw do wykrywania sekwencji DNA specyficznych dla pierwotniaków z rodzaju Babesia techniką PCR Nr kat.: BAC21-100 Wielkość zestawu: 100 oznaczeń Objętość pojedynczej reakcji:
Bardziej szczegółowoKREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb. Metoda cyjanmethemoglobinowa: Zasada metody:
KREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb Metoda cyjanmethemoglobinowa: Hemoglobina i niektóre jej pochodne są utleniane przez K3 [Fe(CN)6]do methemoglobiny, a następnie przekształcane pod wpływem KCN w trwały związek
Bardziej szczegółowoPOLITECHNIKA ŁÓDZKA INSTRUKCJA Z LABORATORIUM W ZAKŁADZIE BIOFIZYKI. Ćwiczenie 3 ANALIZA TRANSPORTU SUBSTANCJI NISKOCZĄSTECZKOWYCH PRZEZ
POLITECHNIKA ŁÓDZKA INSTRUKCJA Z LABORATORIUM W ZAKŁADZIE BIOFIZYKI Ćwiczenie 3 ANALIZA TRANSPORTU SUBSTANCJI NISKOCZĄSTECZKOWYCH PRZEZ BŁONĘ KOMÓRKOWĄ I. WSTĘP TEORETYCZNY Każda komórka, zarówno roślinna,
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 1. Aminokwasy
ĆWICZENIE 1 Aminokwasy Przygotować 5 (lub więcej) 1% roztworów poszczególnych aminokwasów i białka jaja kurzego i dla każdego z nich wykonać wszystkie reakcje charakterystyczne. Reakcja ksantoproteinowa
Bardziej szczegółowoWYCHOWANIE FIZYCZNE - STUDIA ZAOCZNE 2010/2011
WYCHOWANIE FIZYCZNE - STUDIA ZAOCZNE 2010/2011 INSTRUKCJE DO ĆWICZEŃ LABORATORYJNYCH Z BIOCHEMII Zasady postępowania w laboratorium: 1. Do wykonania ćwiczenia moŝna przystąpić dopiero po dokładnym zapoznaniu
Bardziej szczegółowoWĘGLOWODANÓW HO H H O H C H C O H O H HC C H O H C H O C C 3 H 2 O. H furfural. H pentoza C H 2 O H O H H C O H HC C C C H.
7. JAKŚIWA ANALIZA WĘGLWDANÓW Monosacharydy pod wpływem stęŝonych kwasów (octowego, solnego lub siarkowego) i podwyŝszonej temperatury ulegają odwodnieniu. Na działanie rozcieńczonych kwasów w temperaturze
Bardziej szczegółowoLaboratorium 1. Izolacja i wykrywanie trucizn cz. 1
Laboratorium 1 Izolacja i wykrywanie trucizn cz. 1 Literatura zalecana: Bajguz A., Piotrowska A. 2005. Ćwiczenia z toksykologii środowiska. Wydawnictwo Uniwersytetu w Białymstoku, Białystok. Str. 15 17,
Bardziej szczegółowoMINIPOL 2. Zestaw do minielektroforezy płytowej w jednym lub dwóch żelach poliakrylamidowych. Instrukcja Obsługi. Numer katalogowy:
MINIPOL 2 Zestaw do minielektroforezy płytowej w jednym lub dwóch żelach poliakrylamidowych Instrukcja Obsługi Numer katalogowy: 103-100 Aby uzys k ać pomoc techniczną : T 22 668 71 47 Spis treści 1. Informacje
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej, Wydział Farmaceutyczny, WUM.
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: TERAPIA GENOWA Plan ćwiczeń Ćwiczenie 1: Przygotowanie warsztatu terapii genowej 1. Kontrola jakościowa preparatów plazmidowych paav/lacz,
Bardziej szczegółowoSaccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna.
Saccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna. wersja 0916 6 x 20 transformacji Nr kat. 4010-120 Zestaw zawiera
Bardziej szczegółowoBadanie aktywności enzymów z klasy oksydoreduktaz. Oznaczenie witaminy C
1 S t r o n a U W A G A!!!!!! Badanie aktywności enzymów z klasy oksydoreduktaz. Oznaczenie witaminy C A. Badanie aktywności enzymów z klasy oksydoreduktaz. Odczynniki : - 3% roztwór H 2 O 2, - roztwór
Bardziej szczegółowoSACHARYDY MONOSACHARYDY POLISACHARYDY OLIGOSACHARYDY
SACHARYDY MONOSACHARYDY POLISACHARYDY OLIGOSACHARYDY C x H 2y O y y = 2-10 Oligosacharydy oligomery węglowodanowe, które zawierają od 2 do 10 monomerów, którymi są cukry proste (monosacharydy), np. glukoza,
Bardziej szczegółowofix RNA Roztwór do przechowywania i ochrony przed degradacją próbek przeznaczonych do izolacji RNA kat. nr. E0280 Sierpień 2018
Sierpień 2018 fix RNA Roztwór do przechowywania i ochrony przed degradacją próbek przeznaczonych do izolacji RNA kat. nr. E0280 EURx Ltd. 80-297 Gdansk Poland ul. Przyrodnikow 3, NIP 957-07-05-191 KRS
Bardziej szczegółowoAmylaza Wykrywanie aktywności enzymatycznej amylazy w ślinie
14367 Takao Ishikawa Szkoła Festiwalu Nauki ul. Ks. Trojdena 4 02-109 Warszawa E-mail: sfn@iimcb.gov.pl Amylaza Wykrywanie aktywności enzymatycznej amylazy w ślinie Wstęp Amylaza (E.C. 3.2.1.1) jest enzymem
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Chlamydia trachomatis w moczu lub w kulturach komórkowych
Nr kat. PK15 Wersja zestawu: 1.2016 Zestaw do wykrywania w moczu lub w kulturach komórkowych na 50 reakcji PCR (50µl), włączając w to kontrole Detekcja oparta jest na amplifikacji fragmentu genu crp (cysteine
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE ZAWARTOŚCI MANGANU W GLEBIE
OZNACZANIE ZAWARTOŚCI MANGANU W GLEBIE WPROWADZENIE Przyswajalność pierwiastków przez rośliny zależy od procesów zachodzących między fazą stałą i ciekłą gleby oraz korzeniami roślin. Pod względem stopnia
Bardziej szczegółowoKierunek Biotechnologia Biotechnologia w utylizacji odpadów stałych od 2014 Enzymatyczna hydroliza skrobi
Enzymy hydrolizujące skrobie Oprócz celulozy skrobia jest głównym polisacharydem pochodzenia roślinnego. Z przemysłowego punktu widzenia istotne znaczenie maja przede wszystkim produkty jej hydrolizy umożliwiające
Bardziej szczegółowoWPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW
WPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW Wstęp W przypadku trudno rozpuszczalnej soli, mimo osiągnięcia stanu nasycenia, jej stężenie w roztworze jest bardzo małe i przyjmuje się, że ta
Bardziej szczegółowoWŁASNOŚCI SPEKTRALNE NUKLEOTYDÓW PIRYDYNOWYCH (NAD +, NADP + ) OZNACZANIE AKTYWNOŚCI TRANSAMINAZY ALANINOWEJ
WŁASNOŚCI SPEKTRALNE NUKLEOTYDÓW PIRYDYNOWYCH (NAD +, NADP + ) OZNACZANIE AKTYWNOŚCI TRANSAMINAZY ALANINOWEJ WSTĘP Nukleotydy pirydynowe (NAD +, NADP + ) pełnią funkcję koenzymów dehydrogenaz przenosząc
Bardziej szczegółowoE.coli Transformer Kit
E.coli Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli. Metoda chemiczna. wersja 1117 6 x 40 transformacji Nr kat. 4020-240 Zestaw zawiera komplet odczynników
Bardziej szczegółowoScenariusz lekcji otwartej z biologii - zakres rozszerzony w klasie I LO
Scenariusz lekcji otwartej z biologii - zakres rozszerzony w klasie I LO Temat: Wykrywanie białek, cukrów i tłuszczy w materiale roślinnym Dział: Komórka podstawowa jednostka organizmu Zakres materiału:
Bardziej szczegółowoSpis treści. Aparatura
Spis treści Aparatura I. Podstawowe wyposażenie laboratoryjne... 13 I.I. Probówki i naczynia laboratoryjne... 13 I.II. Pipety... 17 I.II.I. Rodzaje pipet automatycznych... 17 I.II.II. Techniki pipetowania...
Bardziej szczegółowoWPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW
WPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW Wstęp Mianem rozpuszczalności określamy maksymalną ilość danej substancji (w gramach lub molach), jaką w danej temperaturze można rozpuścić w określonej
Bardziej szczegółowoWęglowodany metody jakościowe oznaczania cukrów reakcja Molisha, Fehlinga, Selivanowa; ilościowe oznaczanie glukozy metodą Somogyi Nelsona
Ćwiczenie nr 7 Węglowodany metody jakościowe oznaczania cukrów reakcja Molisha, Fehlinga, Selivanowa; ilościowe oznaczanie glukozy metodą Somogyi Nelsona Celem ćwiczenia jest: zapoznanie z metodami jakościowej
Bardziej szczegółowoUWAGA NA WRZĄCY OLEJ!!!!
ĆWICZENIE 4 Lipidy Wykazanie obecności glicerolu próba akroleinowa 0,5 ml oleju 0,5ml glicerolu kilka kryształów bezwodnego CuSO 4 2x pipetka plastikowa kuchenka elektryczna 1x chwytak do probówek Przygotuj
Bardziej szczegółowoTechniki molekularne ćw. 1 1 z 6
Techniki molekularne ćw. 1 1 z 6 Instrukcja do ćwiczeń Nr 1. Temat: Izolacja całkowitego DNA z tkanki ssaczej metodą wiązania DNA do kolumny krzemionkowej oraz spektrofotometryczna ocena jego czystości
Bardziej szczegółowoReakcje charakterystyczne sacharydów
Reakcje charakterystyczne sacharydów Cel ćwiczenia Ćwiczenie poświęcone jest budowie i właściwościom sacharydów. Stosowane w doświadczeniach sacharydy (glukoza, fruktoza, arabinoza, sacharoza, maltoza,
Bardziej szczegółowoTaqNova-RED. Polimeraza DNA RP20R, RP100R
TaqNova-RED Polimeraza DNA RP20R, RP100R RP20R, RP100R TaqNova-RED Polimeraza DNA Rekombinowana termostabilna polimeraza DNA Taq zawierająca czerwony barwnik, izolowana z Thermus aquaticus, o przybliżonej
Bardziej szczegółowoHYDROLIZA SOLI. ROZTWORY BUFOROWE
Ćwiczenie 9 semestr 2 HYDROLIZA SOLI. ROZTWORY BUFOROWE Obowiązujące zagadnienia: Hydroliza soli-anionowa, kationowa, teoria jonowa Arrheniusa, moc kwasów i zasad, równania hydrolizy soli, hydroliza wieloetapowa,
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE III. ELEKTROFOREZA W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM (ANG. POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS - PAGE)
ĆWICZENIE III. ELEKTROFOREZA W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM (ANG. POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS - PAGE) ELEKTROFOREZA BIAŁEK W ŻELU POLIAKRYLAMIDOWYM W WARUNKACH DENATURUJĄCYCH (SDS-PAGE) DETEKCJA BIAŁEK
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej, Wydział Farmaceutyczny, WUM.
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: TERAPIA GENOWA Plan ćwiczeń Ćwiczenie 1: Przygotowanie warsztatu terapii genowej 1. Kontrola jakościowa preparatów plazmidowych paav/lacz,
Bardziej szczegółowoPracownia biochemiczna arkusz zadań
Pracownia biochemiczna arkusz zadań Drodzy uczestnicy, W trakcie egzaminu wykonacie dwa zadania: Część A jest zadaniem praktycznym, którego celem jest rozdzielanie i identyfikacja aminokwasów (20 punktów),
Bardziej szczegółowoEGZAMIN POTWIERDZAJĄCY KWALIFIKACJE W ZAWODZIE Rok 2017 CZĘŚĆ PRAKTYCZNA
Arkusz zawiera informacje prawnie chronione do momentu rozpoczęcia egzaminu Układ graficzny CKE 2016 Nazwa kwalifikacji: Przygotowywanie sprzętu, odczynników chemicznych i próbek do badań analitycznych
Bardziej szczegółowo