(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (13) (51) T3 Int.Cl. A23F 3/18 ( ) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2011/07 EP B1 (54) Tytuł wynalazku: Sposób ekstrahowania teaflawin z herbaty (30) Pierwszeństwo: IN MU EP (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2010/23 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 2011/07 (73) Uprawniony z patentu: Unilever N.V., Rotterdam, NL (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 YOGESH PRABHAKARRAO MEHARE, Maharastra, IN ASHIM MULLICK, Gurgaon, IN (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Jolanta Hawrylak PRZEDSIĘBIORSTWO RZECZNIKÓW PATENTOWYCH PATPOL SP. Z O.O. SKR. POCZT Warszawa 130 Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 Opis TECHNICZNA DZIEDZINA WYNALAZKU [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy polepszonego procesu ekstrahowania teaflawin z herbaty. PODSTAWA WYNALAKZU [0002] Dwa popularne herbaciane produkty to czarna herbata i zielona herbata. Ogólnie, dla wytworzenia czarnej herbaty, świeże liście rośliny Camellia sinensis podaje się więdnięciu (sposób, który pozwala zebranym herbacianym liściom utracić wodę i prowadzi do chemicznych / biochemicznym zmian, zwłaszcza aromatu), macerowaniu, fermentowaniu (w którym procesowe enzymy w herbacianym liściu wykorzystują atmosferyczny tlen do utleniania różnych substratów dla wytworzenia zabarwionych produktów), a następnie suszeniu w wyższych temperaturach (dla zatrzymania aktywności enzymów). Zieloną herbatę wytwarza się w taki sam sposób jak stosowany do wytwarzania czarnej herbaty z tym, że bez etapu wystawiania herbacianych liści na fermentowanie. Częściową fermentację stosuje się do wytwarzania pośrednich gatunków herbat, znanych jako herbata "oolong". [0003] Teaflawiny to poliefenole wytwarzane podczas wytwarzania herbaty. Większość teaflawin jest znanych jako przeciwutleniacze. Dlatego jest duże zainteresowanie w przemyśle żywnościowym, napojów i ogólnie zdrowia wytwarzaniem i wprowadzaniem teaflawin do różnych żywnościowych produktów. Teaflawiny występują w herbacie czarnej i herbacie oolong. [0004] Herbaciany liść, gdy jest zerwany z rośliny herbaty zawiera polifenole znane jako katechiny. Te katechiny są bezbarwnymi związkami. Cztery główne katechiny występujące w herbacianych liściach to epikatechina (EC), epigallokatechina (EGC) epikatechin-3-gallusan (ECG) oraz epigallokatechin-3-gallusan (EGCG). Teaflawiny są wytwarzane podczas utleniającej fermentacji herbacianych liści dla wytworzenia czarnej herbaty. Wyżej wspomniane katechiny (i inne mniej ważne katechiny) ulegają utleniającym biotransformacjom do dimerycznych związków, znanych jako teaflawiny (TF-y), oraz związków o wyższych ciężarach cząsteczkowych, znanych jako tearubiginy (TR-y). Budowa związków TF jest całkiem dobrze opracowana i cztery główne teaflawiny są znane jako teaflawina (TF1), teaflawin-3-monogallusan (TF2), teaflawin-3'- monogallusan (TF3) oraz teaflawin-3-3'-digallusan, (TF4) i są zgodne z podanym poniżej wzorem ogólnym (1): w którym podstawniki R oraz R' są niezależnie wybrane spośród H i G, gdzie G pochodzi z kwasu gallusowego i ma wzór ogólny (2): (1) 1 (2)

3 [0005] Dokładniej, cztery główne związki TF mają wzór (1) w którym: Dla TF1 R = R' = H; dla TF2 R = G, R' = H; dla TF3 R = H, R' = G; oraz dla TF4 R = R' = G. [0006] Charakterystyczny pomarańczowy i brązowy kolor zaparzonej czarnej herbaty wynika z obecności związków TF oraz TR. Ponadto nadają one cierpkości i pełności smaku zaparzonej herbacie. Związki TR występują w większej wielkości i są ciemniejsze niż związki TF. [0007] Herbata jest popularnym, tanim napojem konsumowanym na całym świecie. Jej konsumpcja na subkontynencie indyjskim jest szczególnie duża. Ogólnie, czysta zaparzona czarna herbata znana jest jako zdrowy produkt przeznaczony do picia. Mimo tego, ze względu na dużą konsumpcję herbaty na głowę, na całym świecie podejmuje się wiele wysiłków aby uczynić herbatę bardziej zdrową. Jednym sposobem jest zwiększenie ilości zdrowych teaflawin w herbacie. Jednym ze sposobów uzyskanie tego jest manipulowanie sposobem utleniania herbaty tak, aby zwiększyć wytwarzanie teaflawin. Innym sposobem jest ekstrahowanie teaflawin z dobrej jakości czarnej herbaty, albo gorszej jakości herbacianych produktów, jak herbaciane włókna, herbaciany proszek itp. i ponowne dodawanie wyekstrahowanych teaflawin do czarnej herbaty dla wytworzenia lepszej jakości herbaty. [0008] Twórcy niniejszego wynalazku także pracowali nad problemem dostarczenia herbaty wzbogaconej w teaflawiny. W publikacji patentowej US 2002/ A opisano sposób ekstrahowania teaflawin przez namaczanie czarnej herbaty w gorącej wodzie. Poczym wodny filtrat pozbawiano kofeiny (dekofeinowano). Poczym wodny ekstrakt ekstrahowano z octanem etylowym, dla otrzymania surowej teaflawiny. Podobny sposób jest opisany w publikacji patentowej US - 5,532,012 z tym, że w tym przypadku teaflawinę ekstrahuje się z kremową częścią herbacianego ekstraktu. Twórcy niniejszego wynalazku określili, że przy stosowaniu tych znanych ze stanu techniki metod, występują pewne problemy z uzyskaniem wysokiej wydajności ekstrahowania, albo problemy w operacjach rozdzielania. Stosując wodę o temperaturze około 25 C, do ekstrahowania teaflawin z herbaty, maksymalna wydajność jaką można było uzyskać była rzędu około 5-8%. Gdy stosowano gorącą wodę (około C), to około 30-35% teaflawin można było wyekstrahować, a stosowanie wyższych temperatur powodowało degradację teaflawin przy dłuższej ekspozycji. Gdy stosowano organiczne rozpuszczalniki, takie jak alkohole, to prawie 100% teaflawin można było wyekstrahować, ale były pewne problemy z dalszym wydzielaniem. Teaflawiny są silnie rozpuszczalne w rozpuszczalnikach, takich jak alkohole i octan etylowy, i dlatego wydzielanie związków TF z alkoholu przy stosowaniu dobrze znanych technik rozpuszczalnikowego ekstrahowania z użyciem rozpuszczalników, takich jak octan etylowy, dawało ogólnie słabe wydajności ekstrahowania. Twórcy niniejszego wynalazku podjęli próby opracowania sposobu zwiększenia ekstrahowania związków TF z herbaty. [0009] W naszym równoległym Indyjskim zgłoszeniu patentowym 722/MUM/2007, ujawniliśmy sposób zwiększonego ekstrahowania teaflawin z herbaty, który obejmuje etap kontaktowania herbaty z wodnym roztworem mocznika. Podczas prowadzenia prac tych twórcy niniejszego wynalazku prac opracowali alternatywny sposób, który także dostarcza zwiększonego ekstrahowania teaflawin z herbaty. Twórcy nieoczekiwanie stwierdzili, że gdy herbatę kontaktuje się z wodą i octanem etylowym w wybranych ilościach, to uzyskano dużą ilość teaflawin wyekstrahowanych do fazy octanu etylowego. [0010] W publikacji patentowej EP (Tea Projects, 1993) opisano sposób wytwarzania pozbawionego kofeiny herbacianego produktu, który to sposób obejmuje poddawanie zielonej, częściowo obrobionej, 2

4 albo czarnej herbaty liściastej rozpuszczalnikowej ekstrakcji przez kontaktowania tych liści jednokrotnie, albo wielokrotne, z organicznym medium rozpuszczalnikowym, przy czym organiczne medium rozpuszczalnikowe obejmuje octan etylowy i jest bogate w nie-kofeinowe herbaciane produkty po przez (i) wcześniejsze poddawanie kontaktowaniu z pozbawioną kofeiny herbatą, albo (ii) wcześniejsze poddawanie kontaktowaniu z nie pozbawioną kofeiny herbatą a następnie selektywne usuwanie kofeiny. W korzystnym sposobie wytwarzanie organicznego rozpuszczalnikowego medium obejmuje etap kontaktowania nawilżonej pozbawionej kofeiny herbaty z aż do 10 krotnością jej wagi organicznym rozpuszczalnikiem zawierającym octan etylowy, oddzielania tak wytworzonego organicznego rozpuszczalnikowego medium oraz jeśli to pożądane, kontaktowania jednej albo więcej porcji nawilżonej pozbawionej kofeiny herbaty kolejno z organiczny rozpuszczalnikowym medium, odpowiednio, wytworzonym albo z każdym poprzednim kontaktowaniu. Zatem, chociaż herbatę ekstrahowano z mieszaniną wody i octanu etylowego to tak wytworzone rozpuszczalnikowe medium stosowano dalej do wytwarzania pozbawionej kofeiny herbaty. Ta publikacja nie ujawnia, że rozpuszczalnikowa mieszanina zawierająca wodę i octan etylowy może być zastosowana do polepszonego ekstrahowania teaflawin. [0011] W publikacji patentowej JP (Mitsui, 1986) opisano sposób otrzymywania katechin z herbacianych liści. Sposób obejmuje przemywanie herbacianych liści mieszaniną wzajemnie kompatybilnych hydrofobowych i hydrofilowych organicznych rozpuszczalników (korzystnie kombinacją chloroformu i metanolu) dla usuwania kofeiny i pigmentów z liści i te rozpuszczalniki oddestylowuje się z liści. Obrobione liście nawilża się wodą (korzystnie w stosunku wody do herbacianych liści mieszczącym się w zakresie 0.65 do 1.3 części wody na część herbacianych liści) i doprowadza się do kontaktu z organicznym rozpuszczalnikiem (korzystnie octanem etylowym) dla ekstrahowania komponentu zawierającego katechiny do rozpuszczalnika. Ta publikacja ujawnia ekstrahowanie katechin z pozbawionych kofeiny herbacianych liści z użyciem mieszaniny wody i octanu etylowego i nie ujawnia ekstrahowania teaflawin (które nie występują w zielonych herbacianych liściach, ale występują w fermentowanej albo częściowo fermentowanej herbacie) z obrobionej herbaty. [0012] Celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie sposobu zwiększonego ekstrahowania teaflawin z herbaty. [0013] Innym celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie sposobu zwiększonego ekstrahowania teaflawin z herbaty z użyciem prostego, ekonomicznego i łatwego do powiększenia skali sposobu. KRÓTKI OPIS WYNALAZKU [0014] Niniejszy wynalazek dostarcza sposobu ekstrahowania teaflawin z herbaty, sposobu obejmującego etapy: (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym jednocześnie, albo kolejno, z wytworzeniem dyspersji, w której wagowy wody do herbaty jest w zakresie od 0.5 do 10; oraz (b) oddzielania octanu etylowego z dyspersji; dla wytworzenia ekstraktu teaflawin w octanie etylowym. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYNALAZKU [0015] Niniejszy wynalazek dotyczy polepszonego sposobu ekstrahowania teaflawin z herbaty. [0016] Określenie "herbata" dla celów niniejszego wynalazku oznacza liściasty materiał z rośliny Camellia sinensis var. sinensis albo Camellia sinensis var. Assamica, który zawiera teaflawiny. Odpowiednim surowcem dla sposobu według niniejszego wynalazku jest czarna herbata oraz/albo herbata oolong. Czarna herbata obejmuje herbatę dobrej jakości, jak również pozagatunkową wytworzoną podczas wytwarzania czarnej 3

5 herbaty. Najbardziej korzystnym źródłem dla ekstrahowania teaflawin jest czarna herbata. [0017] Herbata wytworzona sposobem z pełnym procesem fermentacji i jest czarnego/brązowego koloru jest określana jako czarna herbata. Większość wytworzonych herbat jest tego rodzaju. Technologia wytwarzania czarnej herbaty zasadniczo obejmuje rozrywanie komórkowej nienaruszalności herbacianych pędów, a przez to umożliwia mieszanie substratów (polifenoli) i enzymów (polifenolooksudaz). To skutkuje zainicjowaniem serii biochemicznych i chemicznych reakcji z pobieraniem atmosferycznego tlenu i tworzeniem utlenionych polifenolowych związków, które są charakterystyczne dla herbaty, razem z lotnymi zapachowymi związkami, które nadają herbacie charakterystyczny aromat. [0018] Gdy fermentację prowadzi się częściowo, to otrzymywane herbaty są określane jako herbata oolong. Herbata oolong jest głównie konsumowana ze względu na swoje medyczne znaczenie. [0019] Sposób według wynalazku ekstrahowania teaflawin z herbaty obejmuje etapy (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym z wytworzeniem dyspersji, w której stosunek wagowy wody do herbaty jest w zakresie od 0.5 do 10; oraz (b) oddzielania octanu etylowego z dyspersji; dla wytworzenia ekstraktu teaflawin w octanie etylowym. [0020] Etap (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym może być prowadzony jednocześnie albo kolejno. Zatem, octan etylowy i wodę można wstępnie zmieszać z wytworzeniem mieszaniny przed kontaktowaniem herbaty z tą mieszaniną. Alternatywnie, herbatę kontaktuje się z wodą z wytworzeniem wilgotnej herbacianej masy zanim wilgotną herbacianą masę kontaktuje się z octanem etylowym. Zatem, w korzystnym sposobie wytwarzania dyspersji, etap (a) obejmuje etapy (i) kontaktowania herbaty z wodą z wytworzeniem jednorodnej masy a następnie (ii) mieszanie jednorodnej masy w octanie etylowym. [0021] Etap (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowy korzystnie prowadzi się w temperaturze w zakresie od 5 C do 50 C, bardziej korzystnie w zakresie od 15 do 30 C. Ten etap kontaktowania (a) korzystnie prowadzi się przy wartości ph w zakresie od 4 do 9, bardziej korzystnie w zakresie od 5 do 8. Herbatę korzystnie kontaktuje się z wodą i octanem etylowym przez okres czasu od 30 do 120 minut, bardziej korzystnie przez 60 do 120 minut. Stosunek wagowy wody do herbaty, podczas etapu (a), jest w zakresie od 0.5 do 10, korzystnie jest w zakresie od 0.5 do 8.0. Stosunek wagowy herbaty do całkowitej wagi octanu etylowego i wody podczas etapu ekstrahowania korzystnie jest w zakresie od 1:10 do 1:75, a bardziej korzystnie jest w zakresie od 1:25 do 1:75. Zatem, wynalazek dostarcza sposobu ekstrahowania herbaty z wodą i octanem etylowym, w którym wydajność ekstrahowania jest dobra tylko przy wysoce selektywnej ilości wody i w korzystnych wykonaniach selektywnych ilościach octanu etylowego. Słabe wydajności ekstrahowania uzyskuje się poza określonymi granicami. [0022] Gdy teaflawiny zostały wyekstrahowane do fazy octanu etylowego, to octan etylowy oddziela się z dyspersji w etapie (b), na przykład przez zwykłą dekantację. [0023] Teaflawiny, wyekstrahowane do fazy octanu etylowego korzystnie zatęża się do postaci proszku, na przykład, przez odparowanie octanu etylowego i wysuszenie teaflawin na proszek. PRZYKŁADY [0024] Wynalazek zostanie teraz przedstawiony w przykładach. Przykłady podano tylko ilustracyjnie i nie ograniczają w żaden sposób zakresu wynalazku. [0025] Źródło i pochodzenie składników stosowanych w wynalazku Składnik Postać składnika Źródło oraz geograficzne pochodzenie składnika 4

6 Składnik Postać składnika Źródło oraz geograficzne pochodzenie składnika Herbata Brooke Bond Red Label Tea (czarna herbata) Hindustan Unilever Limited, India Przykład porównawczy A i B: wpływ stosowania wody przy różnych temperaturach i różnych czasach ekstrahowania [0026] Ekstrahowanie teaflawin prowadzono stosując wodę w różnych warunkach temperaturowych. Próbki teaflawinowego ekstraktu pobierano po różnych czasach ekstrahowania. Ekstrahowanie prowadzono w warunkach, w jakich stosunek wagowy herbaty do wody wynosił 1:50. Sposób określania ilości teaflawin w wodnym roztworze oraz ilości teaflawin w herbacie jest opisany poniżej. Obliczano ilość wyekstrahowanych teaflawin jako procent wszystkich teaflawin w herbacie, a dane przedstawiono w Tabeli - 1. [0027] Ilość theaflavin w ekstrakcie określa się za pomocą analizy HPLC po odpowiednim rozpuszczeniu próbki w stabilizującym roztworze (0.5 g/litr kwasu askorbinowego, 0.5 g/litr EDTA, 10% obj./obj. acetonitrylu oraz 90% obj./obj. wody). Dla określenia całkowitej ilości teaflawiny występującej w czarnej herbacie, stosowano sposób w którym następuje ilościowe wyekstrahowanie teaflawiny, który obejmuje ekstrahowanie herbaty z 70% metanolem przez 10 minut, przy stosunku wagowym wody do liści wynoszącym 50:1 i w temperaturze C. Gdy bada się ekstrahowanie herbaty w wodnym medium, albo gdy bada się inne medium ekstrakcyjne, które daje częściowe ekstrahowanie teaflawin wtedy analizuje się dwie próbki a) dla wodnego medium ekstrakcyjnego (albo jakiekolwiek innego medium ekstrakcyjnego), oraz b) wyczerpaną herbatę ponownie ekstrahowano z 70% metanolem jak opisano powyżej. Ponieważ początkowa całkowita ilość teaflawin w herbacie jest znana to pomiar teaflawin w ekstrakcie i w wyczerpanym roztworze umożliwia zbilansowanie masy. Także umożliwia ilościowe określenie jakiejkolwiek degradacji teaflawiny podczas stosowanego sposobu ekstrahowania. [0028] Poziom teaflawiny jest sumą poziomu czterech głównych teaflawin określonych za pomocą HPLC. Ilość czterech teaflawin w próbce jest analizowana za pomocą HPLC z użyciem kolumny oktadecylokrzemionkowej (C18) (Nova-pak z firmy Waters, 3.9 mm i.d.x 150 mm) z detekcją przy 380 nm, temperatura kolumny 40 C, wstrzykiwana objętość 20 µl i szybkość przepływu 1 ml/min. Fazami mobilnymi dla analizy teaflawiny były 2% (obj./obj.) kwas octowy w wodzie (mobilna faza A) i acetonitryl (mobilna faza B). Stosowano gradient od 8% B do 69% B w ciągu 50 minut dla rozdzielenia czterech teaflawin (TF1,TF2, TF3, TF4) po czym kolumnę równoważono 8% buforem A przez 5 minut. Czyste teaflawiny stosowano jako standardy do ilościowego określania. Tabela - 1 Przykład porównawczy Temperatura ekstrakcji, C % teaflawin wyekstrahowanych w ciągu 40 minut (średnia z 3 odczytów) A B [0029] Dane z Tabeli - 1 wskazują, że nie więcej niż średnio około 33% teaflawin może być wyekstrahowanych do wody nawet w temperaturze tak wysokiej jak 85 C. Przykłady 1 do 15: Ekstrahowanie teaflawin sposobem według niniejszego wynalazku: Przykłady C do E: Ekstrahowanie teaflawin sposobem spoza zakresu wynalazku: Ekstrahowanie teaflawin prowadzono stosując poniższy proces: [0030] Odmierzano czarną herbatę (1 gram) do szklanego naczynia i ekstrahowano z mieszaniną wody i octanu etylowego w różnych warunkach, jak pokazano w Tabeli - 2. Zmienne parametry to (i) stosunek wa- 5

7 gowy wody do herbaty, oraz (ii) stosunek wagowy herbaty do (octan etylowy + woda). Doświadczenia prowadzono w temperaturze 25 C. Wydajność wszystkich teaflawin określano jak wcześniej opisano, a wyniki podano w Tabeli - 2 Przykład - F: Ekstrahowanie teaflawin sposobem ze stanu techniki: [0031] Przeprowadzono doświadczenia stosując metodę znaną ze stanu techniki, w której octan etylowy stosuje się przy ekstrahowaniu ciecz-ciecz wodnego herbacianego ekstraktu. W skrócie, czarną herbatę ekstrahowano z gorącą wodą w temperaturze 85 C przez 10 minut w stosunku woda-do-herbaty wynoszącym 50:1 dla otrzymania wodnego ekstraktu herbaty w gorącej wodzie. Ekstrakt ochłodzono do temperatury 25 C i teaflawiny w wodnym ekstrakcie dalej ekstrahowano z równą objętością octanu etylowego. Wydajność teaflawin we frakcji octanu etylowego przedstawiono w Tabeli - 2. Tabela - 2 Przykład Stosunek woda : herbata % wydajność teaflawin Stosunek wagowy herbata : (woda + octan etylowy) = 1 : Stosunek wagowy herbata : (woda + octan etylowy) = 1 : Stosunek wagowy herbata: (woda + octan etylowy) = 1 : C D Stosunek wagowy herbata: (woda + octan etylowy) = 1 :

8 Przykład Stosunek woda : herbata % wydajność teaflawin Stosunek wagowy herbata : (woda + octan etylowy) = 1 : 50 E Ekstrahowanie z użyciem sposobu ze stanu techniki F [0032] Dane z Tabeli - 2 pokazują, że sposób jak według niniejszego wynalazku (Przykłady 1 do 15) dostarcza zwiększonej wydajności teaflawin w porównaniu z warunkami z poza zakresu wynalazku (Przykłady C do E). Także wydajność jest ogólnie lepsza niż otrzymywana dla ekstrahowania gorącą wodą (Przykład B), albo ekstrahowania gorącą wodą a następnie ekstrakcji ciecz-ciecz z octanem etylowym wodnego ekstraktu (Przykład F). Przykład - 16: Kinetyka ekstrahowania teaflawin: [0033] Odważoną czarną herbatę (jeden gram) w szklanym naczyniu ekstrahowano z mieszaniną wody (2.5 gramy) i octanu etylowego (47.5 gramów). Doświadczenia prowadzono w temperaturze 25 C. Całkowita wydajność teaflawin była określana tak jak wcześniej opisano, a wyniki przedstawiono w Tabeli - 3. Tabela - 3 Czas, minuty % wydajność teaflawin [0034] Dane w Tabeli - 3 pokazują, że otrzymano bardzo dobre wydajności dla czasu kontaktowania między 30 a 120 minut. Przykłady 16 do 18: Wpływ kolejności dodawania składników [0035] Przykład 16: przeprowadzono doświadczenie w poniższych warunkach: waga czarnej herbaty (czarna herbata Assam) = 1 gram; stosunek wagowy woda: czarna herbata = 2.5 : 1; stosunek wagowy herbata : (woda + octan etylowy) = 1 : 52.5; temperatura ekstrahowania = 25 C; Czas ekstrahowania = 90 minut. W tym doświadczeniu, wodę dodawano do czarnej herbaty z wytworzeniem jednorodnej masy po czym dodawano octan etylowy i mieszano. [0036] Przykład 17: przeprowadzono doświadczenie w warunkach jak dla Przykładu 16 z tym, że najpierw do herbaty dodawano octan etylowy z wytworzeniem jednorodnej masy, po czym dodawano wodę. [0037] Przykład 18: przeprowadzono doświadczenie w warunkach jak dla Przykładu 16 z tym, że najpierw zmieszano wodę i octan etylowy z wytworzeniem dyspersji. Następnie czarną herbatę dodawano do dyspersji, z mieszaniem. [0038] Wydajność ekstrahowania teaflawin w każdym z Przykładów 16 do 18 jest przedstawiona poniżej w 7

9 Tabeli - 4. Dane są średnią dla 3 odczytów. Tabela - 4 Przykład % wydajność teaflawin, średnia % teaflawin, standardowe odchylenie [0039] Dane z Tabeli - 4 pokazują, że każda kolejność dodawania składników podczas etapu ekstrahowania daje wydajność ogromnie lepszą niż otrzymana gdy stosowano gorącą wodę. [0040] Wynalazek dostarcza sposobu polepszonego ekstrahowania teaflawin z herbaty, sposobu, który jest prosty, ekonomiczny i łatwy do powiększenia skali. Zastrzeżenia patentowe: 1. Sposób ekstrahowania teaflawin z herbaty obejmujący etapy: (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym - jednocześnie, przy czym octan etylowy i wodę wstępnie miesza się z wytworzeniem mieszaniny zanim herbatę kontaktuje się z mieszaniną, albo - kolejno, przy czym herbatę kontaktuje się z wodą z wytworzeniem wilgotnej herbacianej masy zanim herbacianą masę kontaktuje się z octanem etylowym, z wytworzeniem dyspersji, w której stosunek wagowy wody do herbaty jest w zakresie od 0.5 do 10; oraz (b) oddzielania octanu etylowego z dyspersji; dla wytworzenia ekstraktu teaflawin w octanie etylowym. 2. Sposób jak zastrzegany w zastrzeżeniu 1, w którym etap (a) wytwarzania dyspersji obejmuje etapy: (i) kontaktowania herbaty z wodą z wytworzeniem jednorodnej masy, a następnie (ii) mieszania tej masy w octanie etylowym. 3. Sposób jak zastrzegany w zastrzeżeniu 1 albo 2, w którym stosunek wagowy wody do herbaty w etapie (a) jest w zakresie od 0.5 do Sposób jak zastrzegany w dowolnym z poprzednich zastrzeżeń, w którym stosunek wagowy herbaty do łącznej wagi wody i octanu etylowego w etapie (a) jest w zakresie od 1:10 do 1: Sposób jak zastrzegany w dowolnym z poprzednich zastrzeżeń, który to sposób obejmuje dodatkowy etap suszenia ekstraktu teaflawin z octanu etylowego na proszek. 6. Sposób jak zastrzegany w dowolnym z poprzednich zastrzeżeń, w którym dana herbata jest herbatą czarną, herbatą oolong albo ich mieszaniną. 7. Sposób jak zastrzegany w zastrzeżeniu 6, w którym herbata jest herbatą czarną. 8. Sposób jak zastrzegany w dowolnym z poprzednich zastrzeżeń, w którym etap (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym prowadzi się w temperaturze w zakresie od 5 C do 50 C. 9. Sposób jak zastrzegany w dowolnym z poprzednich zastrzeżeń, w którym etap (a) kontaktowania herbaty z wodą i octanem etylowym prowadzi się przy wartości ph w zakresie od 4 do 9. 8 Pełnomocnik:

10 ODNOŚNIKI CYTOWANE W OPISIE Poniższa lista odnośników cytowanych przez zgłaszającego ma na celu wyłącznie pomoc dla czytającego i nie stanowi części dokumentu patentu europejskiego. Pomimo, że dołożono największej staranności przy jej tworzeniu, nie można wykluczyć błędów lub przeoczeń i EUP nie ponosi żadnej odpowiedzialności w tym względzie. Dokumenty patentowe cytowane w opisie US A [0008] US A [0008] IN 722MUM2007 [0009] EP A [0010] JP A, Mitsui [0011] JP 1986 A [0011 9