(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 11/49 EP B1 (13) (1) T3 Int.Cl. A61K 31/198 (06.01) A61K 36/18 (06.01) A61K 31/7084 (06.01) A61P 1/ (06.01) (4) Tytuł wynalazku: L-cytrulina do leczenia zaburzeń erekcji () Pierwszeństwo: IT MI08067 (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr /49 (4) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 12/0 (73) Uprawniony z patentu: Androsystems S.R.L., Roma, IT (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 ERMANNO GRECO, Roma, IT (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Janina Kossowska PRZEDSIĘBIORSTWO RZECZNIKÓW PATENTOWYCH PATPOL SP. Z O.O. SKR. POCZT Warszawa 1 Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 EP B1 Opis Dziedzina techniczna [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy L-cytruliny w dawce równej 6 g/dzień i jej kompozycji farmaceutycznej do leczenia zaburzeń erekcji. Tło [0002] Obecnie powszechnie uznaje się, że dysfunkcja śródbłonka, zmiana prawidłowych procesów biochemicznych normalnie zachodzących w tkance śródbłonka, która powoduje szereg zaburzeń naczyniowych, a zwłaszcza zaburzenia erekcji u mężczyzn, jest wynikiem zmniejszonej miejscowej biodostępności tlenku azotu (NO), podstawowej endogennej substancji rozszerzającej naczynia krwionośne. 1 [0003] Produkcja tlenku azotu zaczyna się od półniezbędnego aminokwasu, L-argininy, który jest przekształcany do tlenku azotu i cytruliny przez enzym syntazę tlenku azotu (NOS). Istnieją trzy izoformy tego enzymu, określone odpowiednio przez akronimy NOS1 (neuronowy), NOS2 (indukowalny) i NOS3 (śródbłonkowy). [0004] Tlenek azotu, gdy jest wytworzony, wchodzi do komórek mięśni gładkich, gdzie aktywuje konkretny enzym znany jako rozpuszczalna cyklaza guanylanowa (sgc), co prowadzi do wzrostu ilości wewnątrzkomórkowego cyklicznego monofosforanu guanozyny (cgmp), zmniejszenia stężenia jonu Ca 2+ i w konsekwencji do rozszerzenia naczyń krwionośnych. 2 [000] W związku z powyższym, istnieją trzy hipotetyczne sposoby działania na obniżenie biodostępności tlenku azotu: zwiększenie biodostępności prekursora tlenku azotu, tj. L-argininy, zwiększenie aktywności enzymów NOS oraz zwiększenie stężenia wewnątrzkomórkowego cgmp. 3 [0006] Półniezbędny aminokwas L-arginina pochodzi głównie z pożywienia, a tylko -1% z syntezy de novo. Kilka badań metabolicznych wykazało, że po podaniu doustnym, L-arginina poddawana jest masywnej eliminacji układowej i przedukładowej przez bakterie jelitowe i przez arginazy obecne w jelitach i wątrobie. Niedawne badanie eksperymentalne, w którym podawano radioaktywny izotop L-argininy, wykazało, że tylko 1% podanej dawki jest wykorzystywany jako prekursor przez NOS, głównie z powodu intensywnego metabolizmu jelitowego. Ponadto wykazano naukowo, że podawanie L-argininy prowadzi do poziomów tego aminokwasu we krwi, które charakteryzują się krótkim okresem półtrwania, czynnika, który poważnie ogranicza możliwość osiągnięcia dzięki L-argininie zadowalającego efektu terapeutycznego. Kolejnym ograniczeniem doustnego podawania dużych dawek L-argininy jest obecność endogennych inhibitorów reakcji konwersji L- argininy do tlenku azotu przez NOS. Inhibitory te przesuwają krzywą aktywności reakcji enzymatycznej w kierunku wyższych poziomów L-argininy niż te podawane, efekt potwierdzony naukowo jako "efekt paradoksalny". [0007] Asymetryczna dimetyloarginina (ADMA) jest endogennym inhibitorem wszystkich trzech izoform 1

3 EP B1 1 NOS. ADMA normalnie krąży we krwi w niskich dawkach, ale jej wyraźny wzrost obserwuje się u osób dotkniętych dysfunkcją śródbłonka, a w szczególności zaburzeniami erekcji lub u osób otrzymujących nadmierne dawki L-argininy. Udowodniono naukowo, że stosunek L-argininy i ADMA jest jednym z kluczowych czynników w produkcji tlenku azotu przez NOWS. [0008] W związku z powyższym, doustne podawanie L-argininy nie jest w stanie zwiększyć endogennej produkcji tlenku azotu ze względu na niską absorpcję tego aminokwasu spowodowaną: intensywnym katabolizmem, któremu jest poddawany w jelitach, jego krótkim okresem półtrwania, a także trudnością w modyfikowaniu stosunku L-arginina/ADMA. [0009] Obecnie terapia zaburzenia erekcji opiera się zasadniczo na doustnym podaniu inhibitorów fosfodiesterazy- (PDE). Leki zawierające substancje czynne zdolne do hamowania PDE działają przez zwiększenie biodostępności cgmp na poziomie komórek mięśni gładkich, hamując jej katabolizm prowadzony przez PDE. Jednakże, leki te rzeczywiście nie są w stanie zwiększać syntezę tlenku azotu i dlatego są uważane za leki "na żądanie", które prowadzą do tymczasowego wzrostu funkcjonalności erekcji. [00] WO 06/0096 ujawnia L-cytrulinę jako jedyny środek do leczenia zaburzeń erekcji. Dawka L- cytruliny wynosiła do 3 g dziennie. 2 [0011] Jako alternatywę, testuje się terapie do leczenia zaburzeń erekcji przez bezpośrednie wprowadzenie genu NOS na poziomie komórek śródbłonka prącia. Ta procedura terapii genowej wykorzystuje wektory bakteryjne do transferu genu NOS i jak do tej pory okazała się uzasadniona dla poprawy erekcji u szczurów. Jednak taki sposób nie został jeszcze wystarczająco opracowany do stosowania u ludzi, co więcej, stosowanie procedur terapii genowej, a w szczególności wykorzystywanie wektorów bakteryjnych, jest podejściem, które może być trudniejsze do zaakceptowania przez pacjenta w odniesieniu do podawanie leku. [0012] Istnieje zatem zapotrzebowanie na lek, którym można leczyć zaburzenia erekcji przez zwiększenie ilości tlenku azotu produkowanego przez organizm. Ujawnienie wynalazku 3 [0013] Celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie leku, który może leczyć zaburzenia erekcji wszędzie tam, gdzie one następują, przez zwiększenie endogennej produkcji tlenku azotu, a uzyskanie chwilowego wzrostu tlenku azotu nie wymaga podawania ad hoc. [0014] W zakresie tego celu, przedmiotem wynalazku jest dostarczenie leku, który ma zdolność działania w zróżnicowany, ale równoczesny sposób w prawidłowych procesach biochemicznych, które regulują endogenną syntezę tlenku azotu. [001] Innym przedmiotem wynalazku jest dostarczenie leku, który prowadzi do zwiększenia biodostępności L-argininy. 2

4 EP B1 [0016] Jeszcze innym przedmiotem niniejszego wynalazku jest dostarczenie leku, który może indukować aktywność syntazy tlenku azotu (NOS). [0017] Wreszcie, przedmiotem niniejszego wynalazku jest dostarczenie leku, który może zwiększyć penetrację L-argininy na poziomie wewnątrzkomórkowym śródbłonka. [0018] Inne przedmioty, cechy i zalety wynalazku będą opisane w poniższym opisie szczegółowym. [0019] Niniejszy cel i niniejsze inne przedmioty, które staną się lepiej widoczne dalej, uzyskuje się dzięki L- cytrulinie do leczenia zaburzeń erekcji. 1 [00] Niniejszy cel i przedmioty wynalazku można również osiągnąć dzięki kompozycji farmaceutycznej zawierającej L-cytrulinę w kombinacji z jedną lub więcej substancjami wybranymi z grupy składającej się z ekstraktu wodnego z Viscum album i fosforanu dinukleotydu nikotynamidoadeninowego (NADPH). Sposoby przeprowadzenia wynalazku 2 [0021] Bez zamiaru związania z żadną szczególną teorią, uważa się, że terapeutyczne działanie L-cytruliny w leczeniu dysfunkcji śródbłonka wynika z faktu, że ten aminokwas nie niezbędny nie ulega eliminacji przedukładowej. W rzeczywistości uważa się, że L-cytrulina ulega metabolizmowi układowemu, podczas którego jest konwertowana przez enzym syntazę L-argininobursztynianową do L-argininobursztynianu, który z kolei jest rozkładany przez enzym L-argininobursztynazę, z uzyskaniem L-argininy. Z tego punktu widzenia, L-cytrulinę można rozważać jako naturalny prekursor L-argininy. L-cytrulina w rzeczywistości pozwala pośrednio zwiększyć biodostępność i okres półtrwania w osoczu L-argininy, ponieważ inaczej niż L-arginina nie ulega intensywnemu katabolizmowi jelitowemu. [0022] Twórca niniejszego wynalazku stwierdził w ten sposób, że podawanie L-cytruliny w dawce równej 6 g/dzień, jest zdolne leczyć zaburzenia erekcji. [0023] Inne wykonanie według wynalazku polega na dalszej kombinacji L-cytruliny z ekstraktem wodnym z Viscum album do leczenia zaburzeń erekcji. 3 [0024] Viscum album jest rośliną znaną pod bardziej popularną nazwą jemioła. Ekstrakt wodny z tej rośliny okazał się zdolny do indukowania nadekspresji enzymów NOS2 i NOS3 na poziomie komórek mięśniowych świnek morskich, którym został podany. [002] Twórca niniejszego wynalazku stwierdził, że stosowanie kombinacji L-cytruliny z ekstraktem Viscum album pozwala zwiększyć ilość i aktywność endogennych NOS, co wiąże się z wyższą produkcją tlenku azotu. [0026] Inne wykonanie niniejszego wynalazku również polega na dalszej kombinacji L-cytruliny z fosforanem dinukleotydu nikotynamidoadeninowego (NADPH) do leczenia zaburzeń erekcji. 3

5 EP B1 [0027] Kofaktory enzymów, takie jak NADPH, są substancjami, których obecność jest wymagana do optymalnej aktywności biochemicznej niektórych enzymów. W szczególności, w przypadku reakcji do produkcji tlenku azotu z L-argininy, enzymy NOS wykorzystują NADPH i tetrahydrobiopterynę jako niezbędne kofaktory. [0028] Twórca niniejszego wynalazku stwierdził, że stosowanie kombinacji L-cytruliny z NADPH sprzyja aktywności NOS i, odpowiednio, produkcji tlenku azotu. [0029] Ponadto, wiadomo, że wzrost poziomu homocysteiny we krwi zmniejsza penetrację śródbłonka przez L-argininę oraz że u pacjenta z zaburzeniami erekcji wzrasta poziom homocysteiny we krwi. Kwas foliowy, kofaktor enzymów uczestniczących w syntezie homocysteiny, ma szczególne działanie w obniżaniu poziomu homocysteiny. 1 [00] Dlatego też, w wykonaniu niniejszego wynalazku, L-cytrulinę samą lub w kombinacji z jedną lub więcej substancjami wybranymi z grupy składającej się z ekstraktu wodnego z Viscum album i NADPH można scharakteryzować w ten sposób, że leczenie zaburzeń erekcji następuje przez jednoczesny wzrost poziomów L-argininy i syntazy tlenku azotu (NOS). [0031] W wykonaniu wynalazku, L-cytrulinę podaje się w ilości równej 6 gramów/dzień. Na przykład, dzien- ne podawanie L-cytruliny można podzielić na dwie dawki po 3 gramy każda lub trzy dawki po 2 gramy każda. 2 [0032] Ponadto, L-cytrulina do leczenia zaburzeń erekcji może być stosowana również w kombinacji z innymi lekami już znanymi w leczeniu zaburzeń erekcji, na przykład lekami zawierającymi inhibitory PDE. [0033] W innym aspekcie, niniejszy wynalazek dotyczy także kompozycji farmaceutycznej charakteryzującej się tym, że obejmuje L-cytrulinę w kombinacji z jedną lub więcej substancjami wybranymi z grupy składającej się z ekstraktu wodnego z Viscum album i NADPH. [0034] Oczywiście, kompozycja farmaceutyczna według niniejszego wynalazku może ponadto obejmować jedną lub więcej substancji pomocniczych powszechnie stosowanych w praktyce farmaceutycznej. 3 [003] Ponadto, kompozycja może mieć postać każdej formulacji odpowiednią do podawania pacjentowi dotkniętemu zaburzeniami erekcji. Na przykład, kompozycja według wynalazku może być w postaci proszku, kapsułek lub saszetek. [0036] Twórca niniejszego wynalazku stwierdził, że kompozycja farmaceutyczna tutaj opisana jest skuteczna przede wszystkim w leczeniu zaburzeń erekcji, a więc w korzystnym wykonaniu kompozycja farmaceutyczna według wynalazku może być stosowana do leczenia zaburzeń erekcji. [0037] Niniejszy wynalazek dotyczy leczenia zaburzeń erekcji przez podawanie pacjentowi L-cytruliny, 4

6 EP B1 ewentualnie w kombinacji z jedną lub więcej substancjami wybranymi z grupy składającej się z ekstraktu wodnego z Viscum album i NADPH. [0038] Korzystnie, sposób według wynalazku może zapewnić doustne podawanie L-cytruliny. [0039] Ponadto, w sposobie według wynalazku L-cytrulinę podaje się w ilości równej 6 gramów/dzień. Na przykład, dzienne podawanie L-cytruliny może być podzielone na dwie dawki jednostkowe po 3 gramy każda lub trzy dawki po 2 gramy każda. 1 [00] Skuteczność podawania L-cytruliny w leczeniu zaburzeń erekcji została zweryfikowana przez przeprowadzenie prospektywnego randomizowanego badania na pacjentach, podczas którego L-cytrulinę podawano doustnie pacjentom dotkniętym zaburzeniami erekcji w dawce 6 gram/dzień, w dwóch oddzielnych 3-gramowych dawkach. Dla porównania, druga grupa pacjentów otrzymała podanie dawki L-argininy równe 3 gramy/dzień, podzielone na dwie dawki 1,-gramowe. [0041] Następnie przebadano skutki podania na poziomie biochemicznym, badając następujące parametry: 1. poziomy L-argininy w osoczu; 2. modyfikacja we krwi stosunku L-arginina/ADMA; 3. wydalanie azotanów z moczem; 4. wydalanie cgmp z moczem. 2 [0042] Ponadto efekty na poziomie klinicznym zbadano również przez podanie pacjentom "karty oceny funkcji erekcyjnej " (kwestionariusz IIEF-) i zmierzenie indukowanej przepływem wazodylacji tętnic ciał ja- mistych przed i po terapii. [0043] Dane odnoszące się do wyżej przytoczonych parametrów biochemicznych osiągnięto u pacjentów poddanych badaniu 7 dni po rozpoczęciu podawania leku i przedstawiono je poniżej w Tabeli 1, Tabeli 2, Tabeli 3 i Tabeli 4. Tabela 1 Poziomy L-argininy w osoczu (µmol/l) Lek Maks. stężenie w osoczu L-arginina 89 ± L-cytrulina 172 ± 2 3

7 EP B1 Tabela 2 Stosunek L-arginina/ADMA Lek linia podstawowa po podaniu L-arginina 186 ± ± L-cytrulina 183 ± ± 1 Table 3 Wydalanie azotanów z moczem (kreatynina w nmol/mmol) Lek linia podstawowa po podaniu L-arginina 91 ± 93 ± 12 L-cytrulina 89 ± ± 16 Table 4 Wydalanie cgmp z moczem (kreatynina w nmol/mmol) Lek linia podstawowa po podaniu L-arginina 38 ± 3,1 39 ± 4, L-cytrulina ± 2,8 ± 3,8 [0044] Dane przedstawione w Tabelach 1 do 4 pozwalają zaobserwować, że doustne podawanie L- cytruliny, w odniesieniu do podawania L-argininy, jest w stanie wytworzyć statystycznie wyższe poziomy argininy w osoczu i doprowadzić do statystycznie dłuższego okresu półtrwania L-argininy w osoczu. Ponadto, należy zauważyć, że podawanie L-cytruliny prowadzi również do wzrostu wydalania azotanów i cgmp (mierzone jako nmol/mmol kreatyniny), znak rzeczywistego wytwarzania tlenku azotu przez tkanki śródbłonka. 1 [004] Ponadto, z klinicznego punktu widzenia, zaobserwowano, że podawanie L-cytruliny prowadzi do zmiany przez pacjentów kwestionariusza IIF- na poziomie komponentów związanych z osiągnięciem i utrzymaniem erekcji. Również z klinicznego punktu widzenia, statystycznie wyższy wzrost indukowanej przepływemi wazodylacji tętnic ciał jamistych obserwowano również przy podawaniu L-cytruliny. [0046] W praktyce okazało się, że L-cytrulina do leczeniu zaburzeń erekcji według wynalazku w pełni osiąga zamierzony cel, ponieważ podawanie samej L-cytruliny w dawce równej 6 g/dzień zmienia pozytywnie i w statystycznie istotny sposób parametry biochemiczne i kliniczne związane z zaburzeniami erekcji, w ten sposób wskazując, że endogenna zdolność tkanek do syntezy tlenku azotu, została przywrócona. 6

8 EP B1 [0047] Ponadto zaobserwowano, że L-cytrulina w dawce równej 6 g/dzień, także dzięki kombinacji z innymi substancjami, takimi jak ekstrakt z Viscum albumu i NADPH, pozwala działać w zróżnicowany, ale równoczesny sposób na normalne procesy biochemiczne, które regulują endogenną syntezę tlenku azotu. [0048] W istocie zaobserwowano, że sama L-cytrulina w dawce równej 6 g/dzień lub w kombinacji z ekstraktem z Viscum album lub NADPH, pozwala zwiększyć biodostępność L-argininy, indukować aktywność enzymów NOS i zwiększyć penetrację L-argininy na poziomie wewnątrzkomórkowym śródbłonka. Zastrzeżenia 1 1. L-cytrulina do stosowania w leczeniu zaburzeń erekcji, przy czym L-cytrulinę podaje się w dawce równej 6 gramów/dzień. 2. L-cytrulina do stosowania według zastrz. 1, przy czym L- cytrulina jest w kombinacji z wodnym ekstraktem Viscum album. 3. L-cytrulina do stosowania według zastrz. 1 lub 2, przy czym L- cytrulina jest w kombinacji z NADPH. 4. Kompozycja farmaceutyczna obejmująca L-cytrulinę w kombinacji z wodnym ekstraktem Viscum album lub ewentualnie NADPH.. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 4 do stosowania w leczeniu zaburzeń erekcji

9 EP B1 ODNIESIENIA CYTOWANE W OPISIE Lista odnośników cytowanych przez zgłaszającego ma jedynie służyć wygodzie czytelnika. Nie stanowi ona części europejskiego dokumentu patentowego. Mimo że wyboru odnośników dokonano z wielką starannością, nie można wykluczyć błędów lub przeoczeń, a EUP nie bierze żadnej odpowiedzialności w tym względzie. Dokumenty patentowe cytowane w opisie 8