(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 11/07 EP B1 (13) (1) T3 Int.Cl. A23L 1/ (06.01) A23L 1/8 (06.01) A61K 31/7024 (06.01) A61K 31/71 (06.01) A61K 3/74 (06.01) (4) Tytuł wynalazku: Zastosowanie probiotyków i włókien w biegunce () Pierwszeństwo: EP (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr /1 (4) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 11/06 (73) Uprawniony z patentu: N.V. Nutricia, Zoetermeer, NL (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 JACQUES BINDELS, Nieuwveen, NL ANNA CHRISTINA GOEDHART, Rotterdam, NL (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Urszula Bartnik POLSERVICE KANCELARIA RZECZNIKÓW PATENTOWYCH SP. Z O.O. ul. Bluszczańska Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 2 Opis wynalazku DZIEDZINA WYNALAZKU [0001] Wynalazek należy do dziedziny żywienia niemowląt obejmującego probiotyki i błonnik w celu zapobiegania i/lub leczenia biegunki. 1 2 TŁO WYNALAZKU [0002] Biegunka stanowi poważny problem zdrowia publicznego, jest znaczącym czynnikiem powodującym niedożywienie i w krajach rozwijających się jest związana z jedną czwartą wszystkich zgonów dzieci poniżej roku życia, szczególnie niemowląt. Każdego roku biegunka powoduje ponad 1 miliard przypadków choroby, ze średnią światową 3 przypadków zachorowań na dziecko i prawie milionów zgonów na świecie. [0003] Obecne zalecenia stanowią, że opanowywanie ostrej biegunki powinno obejmować uzupełnianie utraconych płynów i elektrolitów łącznie ze wspomaganiem odżywiania, szczególnie u niemowląt. Jednak takie leczenie nie skraca czasu trwania biegunki. Postępowania w celu skrócenia czasu trwania biegunki obejmują stosowanie antybiotyków, leków zwalniających perystaltykę i hamujących wydzielanie soków trawiennych. Nie zawsze jest to skuteczne i często powoduje poważne efekty uboczne. Istnieje powszechny konsensus, iż środki farmakologiczne nie są konieczne do leczenia u niemowląt ostrego zapalenia żołądka i jelit.

3 3 1 2 [0004] Probiotyki, szczególnie z rodzaju lactobacillus, stosuje się profilaktycznie, tak jak i leczniczo, żeby przyspieszyć wyleczenie biegunki. [000] EP odnosi się do preparatu żywieniowego do zapobiegania i leczenia zaburzeń przewodu pokarmowego, zawierającego szczepy Bifidobacterium, Enterococcus faecium i Lactobacillus, i korzystnie zawierającego związki będące prebiotykami. Preparat może występować w postaci opcjonalnie zawierającego błonnik suplementu diety, gotowej do użycia kompozycji odżywczej, preparatu dla niemowląt lub w postaci do podawania przez zgłębnik. [0006] WO 06/ odnosi się do kompozycji zawierających L. rhamnosus i ewentualnie błonnik do leczenia i/lub zapobiegania sepsie, bakteriemii i/lub endotoksemii. US 6,241,983 odnosi się do kompozycji sprzyjających zdrowiu przewodu pokarmowego zawierających probiotyki i błonnik spożywczy. Preferowane, korzystne ludzkie mikroorganizmy jelitowe obejmują pałeczki kwasu mlekowego i bifidobakterie. [0007] WO 06/1406 odnosi się do kompozycji zawierających składnik probiotyczny i składnik słodzący. [0008] WO 0/ odnosi się do kompozycji zawierających mieszaniny nie ulegających trawieniu oligosacharydów i Bifidobacterium breve. [0009] WO 06/0913 odnosi się do kompozycji zawierających Bifidobacterium breve, dwóch nie ulegających trawieniu oligosacharydów i opcjonalnie Lactobacillus paracasei.

4 4 STRESZCZENIE WYNALAZKU 1 2 [00] Wynalazcy stwierdzili, że kompozycja zawierająca L. rhamnosus w połączeniu z inuliną i polisacharydami sojowymi (PS soi) ma korzystny wpływ na skrócenie czasu trwania biegunki, co najmniej podobny do opisanego dla samego L. rhamnosus, odtwarzając jednocześnie mikroflorę jelitową dzięki dostarczaniu ulegających fermentacji substratów do okrężnicy, cofając spowodowany biegunką zanik błony śluzowej i odtwarzając niedobory odżywcze. Kombinacja L. rhamnosus, inuliny i PS soi przyniesie więcej korzyści w zmniejszaniu biegunki u niemowląt, zwiększoną przeżywalność żywych bakterii w produktach żywieniowych, z przedłużonym w konsekwencji okresem trwałości, zwiększoną liczbę spożytych bakterii osiągających okrężnicę w żywej postaci, w stymulowaniu w okrężnicy wzrostu i kolonizacji bakterii zarówno egzogennych jak i endogennych, w aktywacji metabolizmu tych bakterii, oraz w wywieraniu działania w jelicie cienkim i w okrężnicy. [0011] Obecność nierozpuszczalnych polisacharydów soi korzystnie odbiera wodę z płynnych stolców. Kompozycja zawierająca połączenie L. rhamnosus, inuliny i polisacharydów soi korzystnie łączy w sobie zalety skrócenia skutków biegunki, takie jak stymulacja układu immunologicznego, zwiększona przeżywalność szczepu probiotycznego, polepszenie mikroflory jelitowej, działania antypatogenne, poprawione zatrzymywanie soli nieorganicznych, poprawione zatrzymywanie wody,

5 polepszone gojenie ścian jelitowych i/lub uzupełnienie niedoborów żywieniowych. Działania te przewyższyły działania pojedynczych składników. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYNALAZKU 1 [0012] Niniejszy wynalazek odnosi się do sposobu leczenia i/lub zapobiegania biegunce u człowieka, w szczególności ostrej biegunce, który to sposób, obejmuje podawanie wspomnianemu człowiekowi kompozycji zawierającej Lactobacillus rhamnosus, inulinę i polisacharydy soi. Innymi słowy, niniejszy wynalazek odnosi się do stosowania kompozycji zawierającej Lactobacillus rhamnosus, inulinę i polisacharydy soi do wytwarzania kompozycji żywieniowej do leczenia i/lub zapobiegania biegunce u człowieka. Niniejszy wynalazek może być również wyrażony jako kompozycja zawierająca Lactobacillus rhamnosus, inulinę i polisacharydy soi do leczenia i/lub zapobiegania biegunce, w szczególności ostrej biegunce, u człowieka. Lactobacillus rhamnosus 2 [0013] Niniejsza kompozycja zawiera Lactobacillus rhamnosus. Spośród pałeczek kwasu mlekowego obecnych w ludzkich jelitach ten rodzaj jest jednym z najliczniejszych i odkryto, że szczepy należące do tych rodzajów są efektywne w zapobieganiu i/lub leczeniu biegunki, łącznie z ostrą biegunką u niemowląt. Przypuszczalnie mechanizm zapobiegania lub leczenia biegunki obejmuje pobudzanie układu odpornościowego,

6 6 1 2 polepszanie mikroflory jelitowej i/lub bezpośrednie działania antypatogenne. Korzystnie, stosowany w wynalazku Lactobacillus rhamnosus ma co najmniej 9, jeszcze korzystniej co najmniej 97, nawet jeszcze korzystniej co najmniej 99% identyczność z sekwencją 16S rrna, w porównaniu z typowym szczepem L. rhamnosus ATCC 7469 (Stackebrandt & Goebel; 1994, Int. J. Syst. Bacteriol. 44: ). L. rhamnosus wywiera działanie przeciwbiegunkowe zarówno w jelicie cienkim jak i w okrężnicy. Stosowanie L. rhamnosus jest bardziej preferowane niż stosowanie bifidobakterii, ponieważ wywiera ona swoje działanie również w jelicie cienkim, miejscu gdzie często mają miejsce infekcje powodujące biegunkę, podczas gdy bifidobakterie są aktywne jedynie w okrężnicy. Tak więc, stosowanie L. rhamnosus zamiast bifidobakterii ma taką korzyść, że biegunka jest również zwalczana w jelicie cienkim. Spośród rodzajów pałeczek kwasu mlekowego preferowany jest L. rhamnosus ponieważ szczepy należące do tego rodzaju są w jelicie najliczniejsze, najsilniejsze i najbardziej skuteczne przeciwko biegunce. [0014] Preferowanymi szczepami L. rhamnosus są szczepy wyizolowane z kału zdrowych niemowląt karmionych ludzkim mlekiem. Kilka szczepów L. rhamnosus jest dostępne komercyjnie od producentów bakterii kwasu mlekowego, lecz mogą one być również bezpośrednio wyizolowane z kału, zidentyfikowane, scharakteryzowane i wytworzone. W preferowanej postaci, kompozycja według wynalazku zawiera co najmniej jeden szczep L. rhamnosus wybrany z grupy obejmującej L. rhamnosus LCS-742 (Morinaga), L. rhamnosus LR-3 (Chr. Hansen), L.

7 7 1 2 rhamnosus GG (Valio), L. rhamnosus HN001 (Howaru), L. rhamnosus R39, R0011, R0049 (Lallemand), L. rhamnosus LBA 12,U, LR-32 (Rhodia), L. rhamnosus (Probi AB), L. rhamnosus KC1 (DSM), L. rhamnosus LMG P Jeszcze korzystniej, szczepem L. rhamnosus jest Lactobacillus GG (ATCC 33). Jeszcze korzystniej, szczepem L. rhamnosus jest szczep LMG P Szczep L. rhamnosus LMG P jest szczepem wykazującym dobre własności technologiczne, nie posiadającym niepożądanej oporności na antybiotyki, o wysokim stopniu przeżywalności w przewodzie pokarmowym, dobrej przyczepności do komórek ścian jelitowych i o dobrych właściwościach zapobiegania adhezji patogenów jelitowych do komórek ścian jelitowych. [001] Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera 2 do 12 jednostek tworzących kolonie (cfu) L. rhamnosus na gram suchej masy tej kompozycji, korzystnie od 4 do 11, jeszcze korzystniej od do, najkorzystniej od do x 9. W 0 ml gotowej do użytku kompozycji, kompozycja według wynalazku zawiera korzystnie 3 do 13 cfu L. rhamnosus, korzystniej 4 do 12, jeszcze korzystniej do 11 a najkorzystniej od 6 do x cfu. Dawka L. rhamnosus według wynalazku jest korzystnie podawana w dziennych dawkach od 2 do 13, jeszcze korzystniej od do 11, najkorzystniej od 7 do x cfu. Inulina [0016] Niniejsza kompozycja zawiera inulinę. Inulina jest rozpuszczalnym w wodzie błonnikiem, który może być

8 8 1 2 fermentowany przez ludzką mikroflorę jelitową. Inulina jest tutaj zdefiniowana jako nieulegający trawieniu oligosacharyd stanowiący łańcuch jednostek fruktozy związanych wiązaniem β, o stopniu polimeryzacji (DP) od 2 do 20, w którym to łańcuchu, ponad 90% jednostek fruktozy jest związanych wiązaniem beta(2 1). Łańcuch fruktozy może ale nie musi być zakończony jednostką glukozy. Inulina może zatem być opisana jako GFn lub Fn, gdzie G przedstawia jednostkę glukozylu, F przedstawia jednostkę fruktozylu a n jest liczbą jednostek fruktozylu połączonych ze sobą, gdzie n wynosi 2 lub więcej. Korzystnie średni DP inuliny stosowanej w niniejszym wynalazku wynosi 7 lub więcej. Średni DP wynosi korzystnie co najmniej, jeszcze korzystniej co najmniej. Odpowiednią inuliną jest na przykład inulina dostępna komercyjnie pod nazwą Raftiline ST, RaftilineHP (Orafti) lub Frutafit (Sensus). Użycie inuliny o średnim DP powyżej 7, jeszcze korzystniej, nawet jeszcze korzystniej, zmniejsza obciążenie osmotyczne w jelitach w porównaniu do inuliny o mniejszym średnim DP, zapobiegając tym samym szkodliwym przeczyszczającym skutkom, które są szczególnie niepożądane, gdy cierpi się na biegunkę. [0017] Obecność inuliny wybiórczo pobudza rozwój i/lub aktywność bakterii jelitowych, szczególnie pałeczek kwasu mlekowego. Ta stymulacja szczególnie ma miejsce w okrężnicy. Skutkiem tego korzystnie jest obniżane ph i tworzone są kwasy organiczne, takie jak mleczan i krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (szczególnie maślan), które mają działania zwalczające patogeny (łącznie z patogenami powodującymi biegunkę) i służą

9 9 1 2 enterocytom za paliwo (tym samym odbudowując ściankę jelita) i które pomagają w zatrzymywaniu soli nieorganicznych, co jest szczególnie korzystne podczas biegunki. Dodatkowo inulina pobudza wzrost, przeżywalność i/lub aktywność metaboliczną w przewodzie pokarmowym szczepu probiotycznego L. rhamnosus. To obejmuje nie tylko jelito grube, lecz również, co jest korzystne, jelito cienkie. [0018] Kompozycja żywieniowa według wynalazku zawiera korzystnie co najmniej 0, mg inuliny na g suchej masy kompozycji, korzystniej co najmniej 1, mg, jeszcze korzystniej co najmniej mg, nawet jeszcze korzystniej co najmniej mg. Korzystnie, kompozycja według wynalazku nie zawiera więcej niż 0, g inuliny na g suchej masy kompozycji, jeszcze korzystniej, nie więcej niż 0,3 g, nawet jeszcze korzystniej nie więcej niż 0,2 g a najkorzystniej nie więcej niż 0,1 g. Niniejsza kompozycja żywieniowa zawiera korzystnie co najmniej mg inuliny na 0 ml niniejszej płynnej kompozycji, korzystniej, co najmniej 1 mg, jeszcze korzystniej, co najmniej 0 mg na 0 ml, nawet jeszcze korzystniej, co najmniej 0 mg. Korzystnie, niniejsza kompozycja nie zawiera więcej niż g inuliny na 0 ml, jeszcze korzystniej, nie więcej niż g na 0 ml, nawet jeszcze korzystniej nie więcej niż 2 g na 0 ml, najkorzystniej nie więcej niż 1 g na 0 ml. Niniejsza inulina jest korzystnie podawana w dziennych dawkach od 0,1 do g, jeszcze korzystniej od 0,2 do g, jeszcze korzystniej, od 0, do 3 g. Polisacharydy soi

10 1 2 [0019] Kompozycja według wynalazku zawiera polisacharydy soi. W niniejszym wynalazku terminy polisacharyd soi (PS) i błonnik soi mogą być stosowane zamiennie i są określane jako nieskrobiowe, w większości nierozpuszczalne polisacharydy wyizolowane z ziarna soi. W niniejszym wynalazku, w odniesieniu do polisacharydów soi, polisacharydy są definiowane jako sacharydy o DP ponad, jeszcze korzystniej ponad, jeszcze korzystniej ponad 0 a nawet jeszcze korzystniej ponad 0. Odpowiednim źródłem błonnika soi jest Fibrim (Solae). Polisacharydy soi zawierają zarówno celulozowy jak i niecelulozowy błonnik spożywczy. Zazwyczaj dostępne komercyjnie źródła polisacharydów soi odpowiednich dla niniejszego wynalazku zawierają, według oznaczenia urzędowym sposobem AOAC, 72-78% całkowitego błonnika spożywczego, a składnik błonnika zawiera około 94-9 % błonnika nierozpuszczalnego w wodzie (celulozy i hemicelulozy) i około -6 % błonnika rozpuszczalnego w wodzie (polisacharydów typu arabinogalaktanu). Obecność nierozpuszczalnych polisacharydów soi korzystnie oddziela wodę z płynnych stolców. Dodatkowo obecność PS soi powoduje tworzenie maślanu. Maślan jest dla enterocytów paliwem i pomaga przy naprawie uszkodzenia jelita spowodowanego zapalnymi reakcjami przeciwko patogenom powodującym biegunkę. [00] Kompozycja żywieniowa według wynalazku zawiera korzystnie co najmniej 0,8 mg PS soi na g suchej masy kompozycji, korzystniej co najmniej 2, mg, jeszcze korzystniej co najmniej 8 mg, nawet jeszcze

11 korzystniej co najmniej 1 mg na g suchej masy. Korzystnie, niniejsza kompozycja nie zawiera więcej niż 0,8 g PS soi na g suchej masy kompozycji, jeszcze lepiej nie więcej niż 0,6 g, nawet jeszcze korzystniej nie więcej niż 0,3 g, najkorzystniej nie więcej niż 0,1 g na g suchej masy. Niniejsza kompozycja żywieniowa zawiera korzystnie co najmniej 8 mg PS soi na 0 ml niniejszej płynnej kompozycji, korzystniej, co najmniej 2 mg, jeszcze korzystniej, co najmniej 80 mg na 0 ml, nawet jeszcze korzystniej, co najmniej 10 mg na 0 ml. Korzystnie, niniejsza kompozycja nie zawiera więcej niż 1 g PS soi na 0 ml, jeszcze korzystniej,nie więcej niż 8 g na 0 ml, nawet jeszcze korzystniej, nie więcej niż 3 g na 0 ml, najkorzystniej nie więcej niż 1, g na 0 ml. Korzystnie, niniejsza PS soi jest podawana w dziennych dawkach od 0,1 do 1 g, jeszcze korzystniej, 0,3 do 8 g, jeszcze korzystniej, 0,8 do g. [0021] Stosunek wagowy PS soi:inuliny wynosi korzystnie :0,2, jeszcze lepiej 3:0,, nawet jeszcze korzystniej 2:1. Zrównoważony stosunek inuliny do PS soi jest korzystny, ponieważ zapewnia to odpowiedni stosunek błonników rozpuszczalnego i nierozpuszczalnego i ich dobroczynne działanie w biegunce. Dla jasności należy zauważyć, że wyrażenie stosunek wagowy PS soi:inuliny wynosi :0,2 oznacza, że waga PS soi podzielona przez wagę inuliny daje wartość znajdującą się pomiędzy a 0,2. Kompozycja zawierająca połączenie L. rhamnosus, inuliny i polisacharydów soi korzystnie łączy w sobie działania skracające biegunkę, takie jak pobudzenie układu

12 12 1 immunologicznego, zwiększoną przeżywalność szczepu probiotycznego, rozwój mikroflory jelitowej, działania antypatogenne, polepszone zatrzymywanie soli nieorganicznych, zwiększone zatrzymywanie wody, poprawione gojenie ścian jelitowych i/lub uzupełnienie niedoborów odżywczych w całym przewodzie pokarmowym. Przyjmuje się, że działania te przewyższają skutki działań pojedynczych składników. Szczególnie, połączenie L. rhamnosus, PS soi i inuliny powoduje zwiększone wytwarzanie krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych, w tym maślanu i mleczanu i lepsze działanie w jelicie cienkim. Korzystnie, kompozycja zawiera 4 do 12 jednostek tworzących kolonie (cfu) L. rhamnosus na gram PS soi plus inulina, korzystniej 6 do 11, jeszcze korzystniej 7 do, najkorzystniej od 8 do x 9 cfu. Mikroelementy 2 [0022] Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera cynk. Niedobór cynku jest szeroko rozpowszechniony u dzieci w krajach rozwijających się. Suplementy cynku podawane w trakcie trwania biegunki skracają czas trwania i ostrość leczonych stanów. Podczas biegunki pojawia się zazwyczaj nadprodukcja tlenku azotu (NO), który pobudza, jako wolny rodnik, sekrecję i uszkadzanie komórki. Dodatek cynku może przyczyniać się do poprawiania stanu fizjologicznego jelita cienkiego i potencjalnego zmniejszania ryzyka powtórnych przypadków biegunki. Korzystnie, kompozycja zawiera co najmniej 3 µg cynku na g suchej masy kompozycji, jeszcze

13 13 1 korzystniej, co najmniej 60 µg. Korzystnie, kompozycja nie zawiera więcej niż 20 µg cynku na g suchej masy kompozycji. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera żelazo, żeby uzupełnić ubytek żelaza. Co więcej, żelazo skraca czas trwania biegunki. Korzystnie, kompozycja zawiera co najmniej 40 µg na g suchej masy, jeszcze korzystniej, co najmniej 80 µg. Korzystnie, kompozycja nie zawiera więcej niż 20 µg żelaza na g suchej masy kompozycji. Dobrze jeśli kompozycja zawiera zarówno cynk jak i żelazo, ponieważ odkryto, że jednoczesne uzupełnianie cynku i żelaza zmniejsza ryzyko występowania ostrej biegunki. Korzystnie, stosunek wagowy żelaza do cynku wynosi między 0,8 a 1,3. Zrównoważony stosunek cynku i żelaza zapewnia właściwą absorpcję zarówno cynku jak i żelaza. Kompozycja żywieniowa 2 [0023] Niniejsza kompozycja jest szczególnie odpowiednia do zapewniania dziennych zapotrzebowań żywieniowych u niemowlęcia w wieku poniżej 36 miesięcy, szczególnie u niemowlęcia w wieku poniżej 24 miesięcy, nawet jeszcze lepiej niemowlęcia w wieku poniżej 12 miesięcy. Zatem korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera składnik lipidowy, białkowy i łatwo przyswajalny składnik węglowodanowy, przy czym składnik lipidowy dostarcza do % całkowitej ilości kalorii, składnik białkowy dostarcza do 1% całkowitej ilości kalorii, a łatwo przyswajalny składnik węglowodanowy dostarcza do 7% całkowitej ilości kalorii.

14 Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera składnik lipidowy dostarczający 2 do 0% całkowitej ilości kalorii, składnik białkowy dostarczający 6 do 13% całkowitej ilości kalorii i łatwo przyswajalny składnik węglowodanowy dostarczający 40 do 6% całkowitej ilości kalorii. [0024] Jeśli jest to postać płynna, np. płyn gotowy do spożycia, to kompozycja zawiera korzystnie od 1,0 do 6, g tłuszczu na 0 ml, jeszcze korzystniej od 1,8 do 4,0 g na 0 ml. W przeliczeniu na suchą masę, niniejsza kompozycja korzystnie zawiera od 8 do 40 % wagowych tłuszczu, jeszcze korzystniej od 12 do % wagowych. Korzystnie, ilość nasyconych kwasów tłuszczowych wynosi poniżej 8 % wagowych wszystkich kwasów tłuszczowych, jeszcze korzystniej, poniżej 4 % wagowych. Korzystnie, stężenie jednonienasyconych kwasów tłuszczowych zawiera się w zakresie od 17 do 60% w przeliczeniu na masę wszystkich kwasów tłuszczowych. Korzystnie, stężenie wielonienasyconych kwasów tłuszczowych zawiera się w zakresie od do 60% w przeliczeniu na masę wszystkich kwasów tłuszczowych. Korzystnie, kompozycja zawiera n-6 polinienasycony kwas tłuszczowy (LA), kwas linolowy i n-3 polinienasycony kwas tłuszczowy (ALA), kwas α-linolenowy. Korzystnie, stosunek wagowy LA/ALA wynosi od 4 do, jeszcze korzystniej, od do 7. Korzystnie, kompozycja zawiera długołańcuchowe nienasycone kwasy tłuszczowe, takie jak kwas arachidonowy, kwas dokozaheksaenowy i/lub kwas eikozapentaenowy. Korzystnie, obecne są kwasy n-3 LC- PUFA, takie jak EPA i/lub DHA. Kwasy n3-lc-pufa

15 1 1 2 zmniejszają jelitowe odpowiedzi zapalne, co jest szczególnie korzystne u niemowląt cierpiących na biegunkę. [002] Jeśli kompozycja występuje w płynnej postaci, np. jako płyn gotowy do spożycia, to korzystnie zawiera od 0, do 4 g białka na 0 ml, jeszcze korzystniej od 1,0 do 3,0 g na 0 ml. W przeliczeniu na suchą masę, niniejsza kompozycja zawiera od do % wagowych białka, jeszcze korzystniej do % wagowych. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera co najmniej 0 % wagowych białka pochodzącego z mleka nie ludzkiego, w przeliczeniu na białko całkowite, jeszcze korzystniej, co najmniej 90 % wagowych. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera co najmniej 0 % wagowych białka pochodzącego z krowiego mleka, w przeliczeniu na białko całkowite, jeszcze korzystniej, co najmniej 90 % wagowych. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera kazeinę i/lub białka serwatki. Korzystnie, stosunek wagowy kazeina:białka serwatki zawiera się w zakresie od 0:0 do 0:0, jeszcze korzystniej od :90 do 90:, jeszcze korzystniej od :80 do 80:. Termin białko, w niniejszym wynalazku, odnosi się do sumy białek, peptydów i wolnych aminokwasów. Kompozycja może opcjonalnie zawierać białka hydrolizowane i wolne aminokwasy. Dobrze jeśli kompozycja nie zawiera hydrolizowanych białek i/lub wolnych aminokwasów, ponieważ zwiększa to obciążenie osmotyczne kompozycji, które jest niepożądane dla ludzi cierpiących na biegunkę. [0026] Jeśli kompozycja występuje w płynnej postaci, np. jako płyn gotowy do spożycia, to korzystnie zawiera

16 od 2 do g łatwo przyswajalnych węglowodanów na 0 ml, jeszcze lepiej od do 1 g na 0 ml. W przeliczeniu na suchą masę, niniejsza kompozycja korzystnie zawiera 40 do 80 % wagowych łatwo przyswajalnych węglowodanów, jeszcze korzystniej, 0 do 70 % wagowych. Korzystnie, kompozycja zawiera co najmniej jeden łatwo przyswajalny węglowodan wybrany z grupy składającej się z laktozy, maltodekstryny, skrobi, sacharozy, glukozy i maltozy. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera maltodekstrynę i/lub skrobię. Stosowanie łatwo przyswajalnych węglowodanów o wyższym stopniu polimeryzacji zamiast mono- i disacharydów zmniejsza obciążenie osmotyczne, co jest korzystne u ludzi cierpiących na biegunkę. Niniejsza kompozycja korzystnie zawiera skrobię ryżową. Stwierdzono, że doustne roztwory nawadniające (ORS) bazujące na skrobi ryżowej są bardziej skuteczne w zmniejszaniu wydalania stolca, skracaniu czasu trwania biegunki i poprawianiu jelitowej absorpcji płynów i elektrolitów u dzieci z ostrą biegunką zakaźną, w porównaniu do ORS bazujących na glukozie. Zalety ORS bazujących na ryżu przypisywano uprzednio ich niższemu obciążeniu osmotycznemu, szybszej absorpcji i wyższej zawartości węglowodanów. Innym wytłumaczeniem na zmniejszanie się wydalania stolca i poprawę absorpcji przy ORS bazujących na ryżu może być zdolność ryżu do hamowania wydalania jelitowego. Korzystnie, niniejsza kompozycja zawiera pektynę lub produkty rozkładu pektyny. Pektyna i/lub produkty jej rozkładu korzystnie hamują adhezję do ściany jelitowej

17 patogenicznych mikroorganizmów powodujących biegunkę, zmniejszając przez to biegunkę. Korzystnie, kompozycja zawiera galaktooligosacharydy (GOS), jeszcze lepiej GOS z wiązaniami β. Te GOS z wiązaniami β korzystnie zmniejszają przyczepność bakterii powodujących biegunkę do ścian jelitowych. Korzystnie, kompozycja zawiera do 0 mg GOS z wiązaniami β na g suchej masy, jeszcze lepiej do 90 mg. Odpowiednim źródłem GOS z wiązaniami β jest Vivinal (Borculo). Korzystnie, kompozycja zawiera nukleotydy. Dietetyczne nukleotydy korzystnie usprawniają naprawę jelitowych komórek uszkodzonych przez patogeny powodujące biegunkę. [0027] Niniejszą kompozycję korzystnie podaje się w postaci płynnej. Dla zaspokojenia kalorycznego zapotrzebowania niemowlęcia, kompozycja korzystnie zawiera 0 do 0 kcal/0 ml płynu, bardziej korzystnie, 60 do 90 kcal/0 ml płynu, nawet jeszcze korzystniej, 60 do 7 kcal/0 ml płynu. Taka gęstość kaloryczna zapewnia optymalny stosunek wody do spożytych kalorii. Osmolarność niniejszej kompozycji wynosi korzystnie od 10 do 4 mosmoli/litr, jeszcze korzystniej, 260 do 3 mosmoli/litr. Taka osmolarność jest sprawą najwyższej wagi dla niemowląt cierpiących na biegunkę i pomaga w zmniejszeniu stresu żołądkowojelitowego i zmniejszeniu biegunki. [0028] Korzystnie, kompozycja występuje w postaci płynnej o lepkości poniżej 3 cps mierzonej wiskozymetrem Brookfielda w temperaturze C przy szybkości ścinania 0 s -1. Dogodnie, kompozycja

18 18 1 występuje w postaci proszku, który może być odtworzony wodą do postaci płynnej lub do ciekłego koncentratu, który powinien być rozcieńczony wodą. Jeśli kompozycja występuje w postaci płynnej to preferowana podawana objętość wyrażona w dziennych dawkach zawiera się w zakresie od około 80 do 200 ml, jeszcze lepiej od około 40 do 00 ml dziennie. Dogodnie, kompozycję odtwarza się wodą, żeby sporządzić półpłynną kompozycję możliwą do podawania łyżeczką. [0029] W preferowanej realizacji, kompozycja jest roztworem nawadniającym zawierającym L. rhamnosus, inulinę, PS soi, glukozę oraz chlorek sodu i potasu, o osmolarności między 0 a 3 mosmoli/litr, jeszcze lepiej między 2 a 28 mosmoli/litr, najlepiej między 23 a 24 mosmoli/litr. Podawanie 2 [00] Stwierdzono, że kompozycja według niniejszego wynalazku jest szczególnie użyteczna jako odżywka dla niemowląt, w szczególności dla dzieci urodzonych przedwcześnie, jak również dla niemowląt urodzonych w terminie oraz tych, które są w okresie odstawiania od piersi i przechodzenia na pożywienie stałe. Niniejszy wynalazek dostarcza zatem sposobu zapewnienia pożywienia ludzkiemu niemowlęciu, który to sposób obejmuje podawanie niemowlęciu niniejszej kompozycji. Korzystnie, noworodek jest w wieku od 0 do 36 miesięcy, jeszcze korzystniej od 0 do 18 miesięcy, a najlepiej od 0 do 12 miesięcy. Niniejsza kompozycja może być korzystnie stosowana do wytwarzania leku do stosowania

19 w zapobieganiu i/lub leczeniu biegunki, w szczególności biegunki zakaźnej, a bardziej szczególnie biegunki rotawirusowej. Korzystnie, kompozycję zawierającą L. rhamnosus, inulinę i PS soi stosuje się do leczenia ostrej biegunki. [0031] W preferowanej realizacji, połączenie L. rhamnosus, inuliny i PS soi jest zawarte w doustnym roztworze nawadniającym zawierającym dodatkowo w pierwszym etapie nawadniania glukozę i elektrolity, żeby przywrócić stan równowagi wody i elektrolitów, podczas gdy w międzyczasie zapewniana jest natychmiast obecność L. rhamnosus, inuliny i PS soi w przewodzie pokarmowym. [0032] Kompozycję według wynalazku korzystnie stosuje się po trwającym około 3 do 4 godzin pierwszym etapie nawadniania mieszaniną glukozy z elektrolitem, dla przywrócenia stanu równowagi wody i elektrolitów. Połączenie L. rhamnosus, inuliny i PS soi razem ze składnikiem lipidowym, łatwo przyswajalnym składnikiem węglowodanowym i składnikiem białkowym szybko przywraca normalne wydalanie stolca i normalną jego konsystencję, zapewniając jednocześnie pożywienie dla wzrostu i odbudowy, szczególnie ściany jelita cienkiego. Niniejszą kompozycję stosuje się przez 2-, jeszcze lepiej 2- dni, do czasu ustania biegunki. [0033] W tym dokumencie i w zastrzeżeniach, czasownik zawierać i jego odmiany jest używany w jego nie ograniczającym znaczeniu, znacząc, że elementy po nim następujące są nim objęte, lecz elementy nie wyszczególnione nie są wykluczone. Dodatkowo odniesienie do elementu rodzajnikiem nieokreślonym

20 jakiś, jakaś nie wyklucza możliwości, że znajduje się więcej niż jeden element, chyba że kontekst jasno stwierdza, że jest tam jeden i tylko jeden z elementów. Rodzajnik nieokreślony jakiś, jakaś zatem zazwyczaj znaczy, co najmniej jeden. PRZYKŁADY Przykład 1: Wspomaganie odżywcze mieszaniną L. rhamnosus, inuliny i polisacharydów soi oraz śladowymi czynnikami odżywczymi dla skrócenia czasu trwania ostrej biegunki dziecięcej 1 2 Sposoby: [0034] Przeprowadzono randomizowane badanie kliniczne z podwójnie ślepą próbą, żeby ocenić skuteczność mieszanki dziecięcej zawierającej Lactobacillus rhamnosus (probiotyk) i błonnik pokarmowy (inulina, polisacharydy soi), w leczeniu 8 indonezyjskich, dobrze odżywionych niemowląt płci męskiej w wieku 3-12 miesięcy, cierpiących na ostrą biegunkę z umiarkowanym odwodnieniem. Po odpowiednim doustnym nawodnieniu, pacjentom losowo przepisano otrzymywanie albo niskolaktozowej mieszanki dziecięcej zawierającej połączenie Lactobacillus rhamnosus (* 8 na 0 ml), błonnika spożywczego (0,1 g inuliny/0 ml i 0,2 g polisacharydów soi/0 ml) i zwiększone stężenie licznych specyficznych śladowych czynników odżywczych (1,1 mg żelaza/0 ml, 0,9 mg cynku/0ml, 0,0 mg miedzi/0ml, 7 µg manganu/0 ml, µg selenu/0 ml,

21 21 1 1,9 mg witaminy D3/0ml i 1,1 µg witaminy E/0 ml) (grupa badana), albo niskolaktozowej mieszanki dziecięcej bez Lactobacillus rhamnosus lub błonnika spożywczego (grupa kontrolna) i ze standardowymi stężeniami śladowych czynników odżywczych (0, mg żelaza/0 ml, 0, mg cynku/0ml, 0,04 mg miedzi/0 ml, 1,4 mg witaminy D3/0ml i 0,8 µg witaminy E/0 ml) (grupa kontrolna). Każdego dnia dla każdego niemowlęcia zapisywano następujące dane: objętość stolca, częstość oddawania i konsystencję stolca i dokładny pomiar masy ciała. Czas trwania biegunki określano jako liczbę godzin po przyjęciu, aż do wydalenia ostatniego płynnego lub półpłynnego stolca, po którym przez następne 24 godziny nie następował inny, nieprawidłowy stolec. Wyniki 2 [003] Podczas przyjmowania pacjenci w obu grupach byli porównywalni w odniesieniu do wieku, wskaźników antropometrycznych, stanu odżywienia, objawów klinicznych, historii leczenia i wskaźników laboratoryjnych, które mogą łączyć się z zapadalnością na biegunkę. W grupie badanej średni (SD) wiek wynosił 8,1 (2,6) miesięcy i 8,0 (2,7) miesięcy w grupie kontrolnej. Przy przyjęciu pacjenci mieli umiarkowany stan odwodnienia. Nie wykryto między grupami, badaną i kontrolną, różnic w wydzielaniu patogenów. Najbardziej dominującym czynnikiem etiologicznym był w 76 % przypadków rotawirus i był wykrywany w tym samym stopniu w grupie badanej i kontrolnej.

22 22 1 Czas trwania biegunki w grupie badanej był znacząco krótszy niż w grupie kontrolnej (1,63 wobec 2,4 dni, p<0,0, odpowiednio dla grupy badanej i grupy kontrolnej) i okazało się to oczywiste po pierwszym dniu leczenia. Niniejsze badanie potwierdza dowody, że formulacja przeciwbiegunkowa zawierająca probiotyki, prebiotyki i śladowe czynniki odżywcze, po doustnym nawodnieniu, wywiera korzystne działanie na skrócenie czasu trwania dziecięcej biegunki w krajach rozwijających się. W grupie badanej, w porównaniu do grupy kontrolnej, istniała tendencja w kierunku niższej wagi stolca. Po leczeniu dietetycznym grupa badana miała tendencję do mniejszego wydalania stolca (w gramach na kilogram masy ciała na dzień) w porównaniu do grupy kontrolnej już po pierwszym i drugim dniu po nawodnieniu w szpitalu. Przykład 2: Synergiczne działanie PS soi, inuliny i Lactobacillus rhamnosus Materiały: 2 [0036] Stosowano układ półdynamicznej fermentacji wsadowej in vitro z użyciem kału malucha. Jako źródło PS soi użyto Fibrim (The Solae Company). Jako źródło inuliny użyto RaftilinST (Orafti). Jako źródło L. rhamnosus użyto L GG (Valio). Świeży kał otrzymywano od zdrowych maluchów w wieku 2 lat. Doświadczalną pożywką była pożywka McBain & MacFarlane (zbuforowana woda peptonowa 3,0 g/l, wyciąg z drożdży

23 23 2, g/l, Trypton 3,0 g/l, L-Cysteina-HCl 0,4 g/l, sole żółciowe 0,0 g/l, K 2 HPO 4.3H 2 O 2,6 g/l, NaHCO 3 0,2 g/l, NaCl 4, g/l, MgSO 4.7H 2 O 0, g/l, CaCl 2 0,228 g/l, FeSO 4 0,00 g/l). Sposoby: 1 [0037] Świeży materiał kału mieszano z pożywką McBain & MacFarlane, która jest reprezentatywna dla jelitowego środowiska, w stosunku wagowym 1:. W czasie t=0 zmieszano 6 ml zawiesiny odchodów z błonnikami i/lub L GG i przeniesiono do rurki do dializy umieszczonej w 0 ml kolbie napełnionej zbuforowaną pożywką do dializy (K.HPO 4 x3h 2 O 2,6 g/l, NaHCO 3 0,2 g/l, NaCl 4, g/l, MgSO 4 x7h 2 O 0, g/l, CaCl 2 0,228 g/l, FeSO 4 x7h 2 O 0,00 g/l, ph 6,3). Kolbę zamknięto i inkubowano w temperaturze 37 C. Mieszaniny błonników i L GG miały następujące składy: Mieszanina PS soi 0 192mg 0 0 1mg 1mg Inulina mg 0 72mg 72mg L GG ,2x 9 cfu 0 1,2x 9 cfu 2 [0038] Po 48 godz. pobrano próbki 0, ml z rurki do dializy i z buforu dializy strzykawką do iniekcji podskórnych i przechowywano w temperaturze -18 C. Doświadczenia przeprowadzano podwójnie, a wszystkie operacje przeprowadzano w komorze beztlenowej. Mleczan oznaczano enzymatycznie, stosując zestaw do wykrywania kwasu mlekowego z dehydrogenazą D- i L-

24 24 1 mleczanową (Raisio Diagnostics Spa, Rzym, Włochy). Krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (SCFA) wykrywano za pomocą chromatografii gazowej: SCFA ekstrahowano wodą o czystości MilliQ. Jako standard wewnętrzny stosowano 2- etylomaślan. Próbki analizowano na kolumnie kapilarnej (Restek Stabilwax DA 1m x 0,3 x 1,0 µm; ZB-FFAB 1mx0,13x1,0 µm ) z detektorem płomieniowo-jonizacyjnym (FID). Fazą ruchomą był hel. Wyniki i wnioski [0039] Wyniki wyrażono jako ilość milimoli wytworzonego mleczanu lub SCFA na g błonnika i przedstawiono w Tabeli 1 Tabela 1 Kwasy organiczne (w mmol/g błonnika) wytworzone podczas fermentacji różnych mieszanin błonnika Mieszanina Mleczan 0,4 1,19 6,22 0,19 1, 1,88 SCFA 7,11 19,09 2,42 7,01 21,80 23,3 Octan 3,18,6 17,9 3,21 11,81 13,6 Propionian 1,22 2,62 0,62 1, 2,89 2,84 Maślan 0,26 0,21 0,01 0,21 0,84 0, [0040] Te wyniki wykazują, że sam L. rhamnosus nie polepsza jelitowej fermentacji. Połączenie PS soi i inuliny wykazuje zwiększone wytwarzanie mleczanu i SCFA w porównaniu do użycia jedynie PS soi. Obecność L rhamnosus dodatkowo wzmacnia tworzenie mleczanu i SCFA mieszaniny inuliny i PS soi.

25 2 Gdy stosuje się jedynie inulinę, obserwuje się zwiększone wytwarzanie mleczanu i SCFA. Jednakże maślan jest prawie niewytwarzany. Obecność w mieszaninie inuliny razem z PS soi lub PS soi i L. rhamnosus korzystnie polepsza wytwarzanie maślanu. Zatem mieszanka PS soi, inuliny i L. rhamnosus wykazuje najlepszą charakterystykę fermentacji u dzieci cierpiących na biegunkę. Przykład 3: Odżywka dla niemowląt 1 2 [0041] Odżywka dla niemowląt zawierająca: - składnik tłuszczu roślinnego dostarczający 27% całkowitej ilości kalorii, zawierający 40% polinienasyconych kwasów tłuszczowych w przeliczeniu na całkowite kwasy tłuszczowe, o stosunku wagowym LA/ALA wynoszącym,, - składnik białka krowiego mleka dostarczający 12% całkowitej ilości kalorii, składający się w % wagowych z białka serwatki i w 80% wagowych z kazeiny i - składnik łatwo przyswajalnego węglowodanu dostarczający 61% całkowitej ilości kalorii, zawierający ponad 80 % wagowych maltodekstryny i skrobię, - L. rhamnosus: * 8 cfu na 0 ml - inulinę: 0,1 g na 0 ml - polisacharydy soi 0,2 na 0 ml [0042] Etykieta na opakowaniu tej odżywki dla niemowląt wskazuje, że odżywkę należy stosować w przypadku biegunki.

26 26 Przykład 4: [0043] Doustny płyn nawadniający zawierający na 0 ml: 2,0 g glukozy, 0,2 g cytrynianu, 138 mg sodu, 78 mg potasu, 177 mg chlorku, 1* 8 cfu L. rhamnosus, 0,0 g inuliny, 0, g PS soi. 1 2 Zastrzeżenia patentowe 1. Zastosowanie kompozycji zawierającej Lactobacillus rhamnosus, inulinę i polisacharydy soi do wytwarzania kompozycji żywieniowej do leczenia i/lub zapobiegania biegunce u człowieka. 2. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym stosunek wagowy PS soi:inuliny wynosi od do 0,2. 3. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym kompozycja ponadto zawiera składnik tłuszczowy dostarczający od do % całkowitej ilości kalorii, składnik białkowy dostarczający do 1% całkowitej ilości kalorii i łatwo przyswajalny składnik węglowodanowy dostarczający od do 7% całkowitej ilości kalorii. 4. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym człowiek jest w wieku poniżej 36 miesięcy.. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym kompozycja zawiera od 4 do 11 cfu L. rhamnosus na g suchej masy kompozycji. 6. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym jako L. rhamnosus stosuje się L. rhamnosus szczep LMG P

27 Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym kompozycja zawiera od 1, do mg inuliny na g suchej masy kompozycji. 8. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym kompozycja zawiera od 2, do 600 mg polisacharydów soi na g suchej masy kompozycji. 9. Zastosowanie według któregokolwiek z poprzednich zastrzeżeń, w którym kompozycja ponadto zawiera co najmniej 3 µg cynku i/lub 40 µg żelaza na g suchej masy kompozycji.. Zastosowanie według zastrz. 3 do zastrz.9, w którym łatwo przyswajalny składnik węglowodanowy zawiera maltodekstrynę i/lub skrobię i w którym składnik białkowy zawiera białka niehydrolizowane. 11. Zastosowanie według któregokolwiek z uprzednich zastrzeżeń do leczenia ostrej biegunki. 12. Zastosowanie według któregokolwiek z uprzednich zastrzeżeń, do leczenia biegunki rotawirusowej. N.V. Nutricia 2 Zastępca: